目的了解一氧化氮(NO)在高動力循環綜合征(HCS)形成中的作用以及NO水平升高或降低時對HCS的影響。 方法結扎大鼠部分門靜脈使之形成穩定的HCS模型后，應用一氧化氮合成酶(NOS)抑制劑NG甲基L精氨酸(LNMMA)處理前、后檢測其門靜脈血中NO含量及肝組織NOS活性，同時檢測左心室功能及血流動力學指標。 結果門靜脈部分結扎后大鼠門靜脈血中NO含量及肝組織中NOS活性二者呈平行變化，與HCS的形成關系密切; 在注射LNMMA后門靜脈血中NO含量及肝組織中NOS活性均明顯降低并接近對照組水平，HCS明顯緩解。結論NO在HCS形成中起關鍵作用。降低或消除NO的作用則能明顯緩解或阻斷HCS，使門靜脈壓力明顯降低直至恢復到正常范圍。
摘 要: 目的 應用含牛內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因重組腺病毒(Ad5CMVNOSⅢ)轉染靜脈移植血管、觀察eNOS基因預防靜脈移植血管再狹窄的作用。方法 將21只雜種犬分為3組，手術對照組、Ad5CMVLac—Z(含大腸桿菌β半乳糖苷酶基因重組腺病毒)對照組和Ad5CMVNOSⅢ干預組。在犬頸靜脈、頸動脈旁路血管移植術中分別應用Ad5CMVNOSⅢ病毒液或Ad5CMVLac—Z病毒液常溫浸泡法感染靜脈移植血管30分鐘，術后28天病理切片觀測移植血管新內膜增生狀況。結果 與正常犬頸外靜脈相比，手術對照組、Ad5CMVLac—Z對照組和Ad5CMVNOSⅢ干預組頸外靜脈移植血管內膜／中膜比較均有不同程度增加(P＜0．05)，但Ad5CMVNOSⅢ組內膜／中膜比顯著低于另外2個對照組(P＜0．05)，新內膜增生明顯減輕。結論 Ad5CMVNOSⅢ感染靜脈旁路移植血管對預防再狹窄有一定作用。
為了探討一氧化氮（ＮＯ）和一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）抑制劑———硝基左旋精氨酸甲基酯（ＬＮＡＭＥ）在撕脫皮瓣壞死中的作用，采用家豬下肢皮膚撕脫傷模型，用測量、稱重以及微盤，組織化學和原位雜交的方法進行觀察。結果：撕脫皮瓣早期ＮＯＳ基因表達增多。ＮＯ含量、濕／干重比值升高，經統計學處理有顯著性差異（Ｐ＜０．０１）；應用ＬＮＡＭＥ后，ＮＯ含量、濕／干重比值降低（Ｐ＜０．０１），皮瓣成活面積明顯增加（Ｐ＜０．０１）。提示，ＮＯ可能參與了撕脫皮瓣早期充血、水腫及繼發壞死的病理過程，早期應用ＬＮＡＭＥ對撕脫皮瓣有保護和治療作用。
【摘要】目的探討重癥急性胰腺炎(SAP)時胰腺組織的誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)、內皮素（ET1） mRNA表達狀態, 以及與血漿中NO、ET1濃度和腸道損傷的關系及丹參治療的影響。方法Wistar大鼠45只隨機分為3組:SAP模型組(A組),SAP丹參治療組(B組),假手術 組(C組),進行不同治療和觀察分析。結果A組血中淀粉酶(AML)、ET1、NO、內毒素(LPS)含量、125 I白蛋白累積指數及腹水量均顯著高于C組(Plt;0.01);與A組比較,B組胰腺ET1和iNOS mRNA表達較弱,血中AML、ET1、NO、LPS及腹水量顯著下降(Plt;0.01),125 I白蛋白累積指數較A組也有下降,但無差異(Pgt;0.05)。結論SAP時存在腸道損傷,胰腺組織ET1、iNOS mRNA的過度表達,使血中ET1、NO濃度升高,造成腸道屏障功能受損,腸通透性增加,引起內毒素血癥。丹參注射液通過減輕SAP時胰腺的病理損害程度,下調胰腺ET1和iNOS mRNA的表達,使血中ET1、NO濃度下降,對SAP及其腸道損傷有一定治療作用。
【摘要】目的探討細菌性腹膜炎致多器官功能不全綜合征（MODS）大鼠結腸運動的變化和細胞因子白介素6（IL6）、腫瘤壞死因子α（TNFα）及誘生性一氧化氮合成酶（iNOS）對結腸運動的影響。方法將Wistar大鼠隨機分成正常對照組和MODS組； 分別觀測2組大鼠排便的糞點數、結腸肌條的振幅、結腸平滑肌細胞長度以及血清一氧化氮（NO）的變化； 利用免疫組化和逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR）方法檢測結腸平滑肌IL6、TNFα和iNOS表達的變化。結果MODS組排便的糞點數和肌條的振幅均明顯低于正常對照組（P＜0.05）； IL6、TNFα和iNOS蛋白表達在正常對照組為陰性表達，在MODS組為陽性表達； 在正常對照組未檢出IL6 mRNA、TNFα mRNA和iNOS mRNA的表達，而在MODS組，IL6 mRNA、TNFα mRNA和iNOS mRNA均呈陽性表達； MODS組平滑肌細胞的長度和血清NO水平均較正常對照組明顯增高（P＜0.01）。結論MODS后結腸運動功能障礙與iNOS、IL6和TNFα密切相關。
目的探討Oddi括約肌中神經細胞的變化與重癥急性胰腺炎（SAP）之間的關系。 方法通過牛磺膽酸鈉灌注的方式制備兔急性胰腺炎模型。采用免疫組化方法檢測一氧化氮合成酶（NOS）和血管活性腸肽（VIP）在Oddi括約肌神經細胞中的表達。 結果對照組肌間神經叢神經細胞的（45.83±2.17）%為NOS陽性細胞，（52.46±2.47）%為VIP陽性細胞，（22.73±1.95）%的神經細胞NOS和VIP均呈陽性表達。SAP組肌間神經叢神經細胞的（11.26±0.93）%為NOS陽性細胞，（28.62±2.83）%為VIP陽性細胞。SAP組的NOS和VIP陽性神經細胞的比例均明顯低于對照組（P＜0.01）。 結論NOS和VIP陽性神經細胞大量存在于Oddi括約肌；SAP時NOS及VIP陽性神經細胞比例均降低，可能是SAP時Oddi括約肌活動能力降低的原因。
目的通過人外周血分離培養早晚期內皮祖細胞（endothelial progenitor cells，EPCs），比較兩類EPCs的特性，以期找到可靠的穩定生物學表征及鑒定方法鑒定EPCs。 方法通過密度梯度離心法分離人外周血單核細胞，體外種植于內皮細胞全培養基誘導培養，分別于培養4～7 d及2～3周獲得早、晚期EPCs。對兩類EPCs的細胞形態、增殖能力、細胞表型、細胞因子表達情況、體外成血管能力及一氧化氮（nitric oxide，NO）釋放能力進行檢測比較，并以成熟人主動脈內皮細胞（human aortic endothelial cells，HAECs）作為陽性對照。 結果兩類EPCs形態不同，早期EPCs形成紡錘樣細胞簇，而晚期EPCs呈鵝卵石樣外觀；晚期EPCs具有高增殖潛能，可在基質膠上形成毛細管狀結構，而早期EPCs則不具備該特性；兩類EPCs均可攝取乙酰化低密度脂蛋白，并能與荊豆凝集素Ⅰ結合；流式細胞儀檢測發現早期EPCs不表達CD34和CD133，但造血干細胞標記CD14和CD45表達卻呈陽性，而晚期EPCs對于內皮型表面標記CD31和CD34表現為強陽性，但CD14、CD45、CD133表達則呈陰性。RT-PCR分析發現早期EPCs的血管內皮生長因子受體2及血管內皮鈣黏蛋白基因的相對表達量顯著低于晚期EPCs及HAECs（P＜0.05），而血管性血友病因子及內皮型一氧化氮合成酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）基因的相對表達量比較差異無統計學意義（P＞0.05）。細胞因子分泌方面，早期EPCs培養上清液中的VEGF、粒細胞集落刺激因子及IL-8濃度明顯高于晚期EPCs（P＜0.05）。Western blot檢測示，兩類EPCs均表達eNOS，但培養5周的晚期EPCs的eNOS表達水平高于早期EPCs（P＜0.05）；兩種EPCs均可釋放NO，但NO產量差異無統計學意義（P＞0.05）。 結論eNOS的表達及NO釋放能力作為內皮細胞的可靠生物學特征可用于EPCs鑒別，多方法聯合方式用于鑒定EPCs更為可行。
目的探討 N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA） 受體介導的脊髓缺血-再灌注的保護機制。方法將 42 只 SD 大鼠隨機分為 4 組：非阻斷組（n=6）、生理鹽水組（n=12）、NMDA 受體阻斷劑 K-1024（25 mg/kg）組（n=12）和電壓門控 Ca2+通道阻斷劑尼莫地平（0.5 mg/kg）組（n=12），各組藥物缺血前 30 min 腹腔注射。評價神經功能，觀察并比較腰段脊髓組織學變化、神經遞質氨基酸的釋放、脊髓神經元型一氧化氮合成酶（nNOS）蛋白表達情況。結果再灌注 8 h 時，K-1024 組大鼠行為學評分為（2.00±0.00）分，與生理鹽水組［（5.83±0.41）分］和尼莫地平組［（5.00±1.00）分］相比差異有統計學意義（P<0.05）。K-1024 組與生理鹽水組和尼莫地平組相比運動神經元損傷更小。在缺血 10 min 后，各組谷氨酸濃度差異無統計學意義（P=0.731）；K-1024 組與生理鹽水組比較 nNOS 蛋白表達明顯下調（P<0.01）。再灌注 8 h 后，K-1024 組與生理鹽水組比較 nNOS 蛋白表達明顯上調（P<0.05）。結論脊髓缺血期，K-1024 是通過抑制 NMDA 受體，下調 nNOS 蛋白表達發揮脊髓保護作用；再灌注期，K-1024 對脊髓的功能、結構和神經細胞生物活性有較好的保護作用。