目的探討前列腺素F2α受體(PTGFR)和前列腺素合酶2(COX-2)在膽管良性瘢痕組織中的表達及意義，并研究轉化生長因子-β1(TGF-β1)對膽管成纖維細胞中PTGFR表達的影響。方法收集2008～2010年西安交通大學第一附屬醫院肝膽外科收治的18例肝外膽管瘢痕性狹窄患者的膽總管組織，另收集6例來自異體肝移植供體的正常膽總管組織作為對照。采用免疫組織化學SABC法分別檢測PTGFR及COX-2在兩種組織中的表達情況，然后用不同濃度(0、10、20及30 ng/ml) TGF-β1作用于膽管成纖維細胞后24 h，用半定量RT-PCR法以及ELISA法檢測膽管成纖維細胞中PTGFR的mRNA及蛋白表達。結果PTGFR和COX-2在膽管良性瘢痕組織中的表達陽性率分別為88.9%(16/18)和83.3%(15/18)，正常膽總管組織中其表達陽性率分別為33.3%(2/6)及0(0/6)，PTGFR及COX-2在前者均分別明顯高于后者(Plt;0.05)。TGF-β1作用于膽管成纖維細胞后24 h，隨著TGF-β1濃度增高，可上調PTGFR mRNA及蛋白在膽管成纖維細胞中的表達，并且呈濃度依賴性(Plt;0.05)。結論膽管良性瘢痕組織中PTGFR和COX-2高度表達是造成膽管瘢痕過度增生的重要因素，TGF-β1可誘導膽管成纖維細胞中PTGFR的表達增高，并呈濃度依賴性，調節膽管瘢痕的形成。
目的 檢測TGF-β1及p27在原發性膽囊癌中的表達，研究其蛋白產物在原發性膽囊癌發生、發展過程中的表達特點及相互關系。方法 應用免疫組化SP法檢測36例原發性膽囊癌中TGF-β1及p27的表達，并以同期20例慢性膽囊炎作對照。結果 36例原發性膽囊癌組織中23例TGF-β1基因蛋白產物呈陽性表達，表達陽性率為63.9%，高于對照組的10.0%（P＜0.05）； 17例p27蛋白陽性表達，表達陽性率為47.2%，顯著低于對照組的100%（P＜0.05）。TGF-β1在有淋巴結或遠處轉移及Nevin Ⅳ～Ⅴ期患者中表達陽性率（均為79.1%）明顯高于無轉移及Nevin Ⅰ～Ⅲ期的患者（均為33.3%），P＜0.05； p27在高、中分化、無淋巴結或遠處轉移及Nevin Ⅰ～Ⅲ期的患者中表達陽性率分別為60.9%、75.0%及75.0%，明顯高于低分化、有轉移及Nevin Ⅳ～Ⅴ期患者（23.0%、33.3%及33.3%），P＜0.05。 p27與TGF-β1表達兩者呈負相關(r=-0.447 3,P＜0.05)。 TGF-β1陽性患者生存率低于TGF-β1陰性患者，差異有顯著性意義（P＜0.05）； p27陽性患者生存率高于p27陰性患者，差異有顯著性意義（P＜0.05）。結論 在原發性膽囊癌細胞中TGF-β1表達上調，p27表達下調，且在有淋巴結或遠處轉移及Nevin Ⅳ～Ⅴ期患者中更為明顯。
目的 探討整合蛋白α5β1和微血管密度在胃癌組織中表達的臨床意義及其相互關系。方法采用免疫組化SP法檢測了35例胃癌組織及其中10例胃癌淋巴結轉移灶和8例慢性淺表性胃炎組織中整合蛋白α5β1的表達及微血管密度（MVD）。結果胃癌組織中整合蛋白α5β1表達水平及MVD均顯著高于慢性胃炎（t=3.32, P＜0.01； t=2.30, P＜0.05）； 胃癌原發灶中整合蛋白α5β1的表達僅與胃癌浸潤深度相關（t=2.29, P＜0.05），而MVD則與胃癌浸潤深度、淋巴結有無轉移及TNM分期之間密切相關（t=3.07,P＜0.01; t=2.48,P＜0.05; t=2.94，P＜0.01）； 胃癌淋巴結轉移灶中整合蛋白α5β1表達水平較相應的原發灶顯著增高（t=2.45, P＜0.05）； 整合蛋白α5β1的表達及MVD均與胃癌組織學分級無關（t=0.15,Pgt;0.05; t=0.41, Pgt;0.05）； 胃癌組織中整合蛋白α5β1不同表達水平間MVD的差異無顯著性意義（F=1.43, Pgt;0.05），相關性分析顯示兩者無顯著相關性（r=0.156, P=0.37）。 結論整合蛋白α5β1在胃癌組織中的表達顯著上調并與胃癌的進展有關，有可能成為判斷胃癌侵襲和轉移能力的指標及基因治療的靶標,其在胃癌血管生成中可能無重要作用。
目的 觀察阿魏酸鈉對肺纖維化大鼠肺組織轉化生長因子β1（TGF-β1）信號通路分子mRNA表達的影響，探討其防治肺纖維化的作用及機制。方法 氣管內滴入博來霉素（5 mg/kg）建立大鼠肺纖維化模型。將30只SD大鼠隨機分為三組（每組10只）：對照組、肺纖維化模型組和阿魏酸鈉組。HE染色檢測肺組織病理改變，膠原纖維染色檢測膠原纖維表達，原位雜交技術檢測肺組織TGF-βRⅡ及Smad4 mRNA表達，實時熒光定量RT-PCR技術檢測TGF-β1 mRNA表達。結果 膠原纖維染色顯示模型組大鼠肺內膠原纖維表達顯著高于對照組和阿魏酸鈉組（Plt;0.001）。大鼠肺內TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表達在模型組顯著高于對照組（Plt;0.01），在阿魏酸鈉組顯著低于模型組（Plt;0.05）。結論 阿魏酸鈉能有效地減輕肺纖維化大鼠肺組織的纖維化程度，其作用機制主要是通過抑制TGF-β1、TGF-βRⅡ和Smad4的mRNA表達上調，從而干擾TGF-β1/Smad4信號通路對靶基因的激活來實現的。
目的 探討γ干擾素（IFN-γ）對博萊霉素誘導的大鼠肺纖維化的干預作用及其可能的機制。方法 75只SD雄性大鼠隨機分為健康對照組、肺纖維化模型組、地塞米松干預組、高劑量IFN-γ干預組與低劑量IFN-γ干預組，每組15只。各組隨機分別于7，14，28 d各處死5只，收集肺組織作切片行HE及Masson染色判斷肺組織肺泡炎及肺纖維化程度，行免疫組化染色測定肺組織轉化生長因子-β1（TGF-β1）、結締組織生長因子（CTGF）、Ⅰ型和Ⅲ型膠原的表達水平。結果 與模型組比較，3個干預組的肺泡炎及肺纖維化程度均明顯減輕（P均lt;0.05），肺組織TGF-β1、CTGF、Ⅰ型及Ⅲ型膠原的蛋白表達水平明顯降低（P均lt;0.05），其中高劑量IFN-γ干預組肺組織TGF-β1、Ⅰ型及Ⅲ型膠原的蛋白表達水平較低劑量干預組更為顯著（P均lt;0.05）。結論 IFN-γ具有與地塞米松相似的較強的抗纖維化效應，且不良反應更少。機制可能為通過抑制細胞因子TGF-β1、CTGF的表達而減少肺組織中Ⅰ型及Ⅲ型膠原的生成，最終抑制肺纖維化。
目的 研究姜黃素干預對實驗性肺間質纖維化的治療作用及其可能的機制。方法 健康雄性SD大鼠96只，隨機分為正常對照組、模型組、潑尼松處理組和姜黃素處理組，每組24只。除正常對照組外，其余各組大鼠氣管內一次性注入博萊霉素誘導肺纖維化。造模后第15 d起，姜黃素處理組和潑尼松處理組分別給予姜黃素（300 mg/kg）和潑尼松（5 mg/kg）每日灌胃一次，其余兩組每日給予1%羧甲基纖維素鈉（10 mL/kg）灌胃一次。各組動物分別于造模后第21，28，42及56 d隨機處死6只，取肺組織行HE、Masson染色評價肺組織病理變化，消化法測定肺組織羥脯氨酸（HYP）含量，免疫組化法測定肺組織轉化生長因子β1（TGF-β1）的表達。結果 姜黃素處理組肺纖維化程度于造模后第42和56 d顯著低于模型組（P均lt;0.05），其肺組織HYP含量在造模后第42和56 d時較模型組顯著降低（Plt;0.01），肺組織TGF-β1蛋白表達于造模后第28，42及56 d顯著低于模型組（P均lt;0.05），其中第56 d時與正常對照組比較無顯著差異（Pgt;0.05）。結論 在博萊霉素誘導的大鼠肺纖維化形成階段應用姜黃素干預能有效減輕肺纖維化程度，可能機制為姜黃素抑制了TGF-β1蛋白在肺組織的表達。
目的 研究過氧化氫對 A549 細胞表達轉化生長因子 β1 （ TGF-β1 ）和 Smad3 磷酸化的影響。方法 用過氧化氫建立體外A549細胞損傷模型，MTT法檢測過氧化氫對A549細胞增殖活性的影響，免疫印跡法（Western Blotting）觀察過氧化氫作用不同時間后A549細胞TGF-β1和Smad 3磷酸化的表達。結果 過氧化氫明顯抑制A549細胞的增殖，濃度為1.0 mmol/L時，其對A549細胞增殖的抑制率為46.34%；A549細胞在過氧化氫（1.0 mmol/L）的刺激下，TGF-β1和Smad3磷酸化的表達量逐漸升高，24 h時達到高峰, 48 h下降。結論 氧化損傷早期，A549細胞表達TGF-β1和Smad3磷酸化增加,這可能與肺損傷后依賴Smad3的組織修復有關。
目的 研究實驗性酸吸入致肺纖維化可能的作用機制。方法 健康雄性SD大鼠120只，隨機分為正常對照組、博來霉素組、高濃度鹽酸組、中濃度鹽酸組和低濃度鹽酸組，每組24只。博來霉素組氣管內一次性注入博來霉素誘導纖維化，鹽酸組每周氣管內滴注不同濃度鹽酸1次，正常對照組每周氣管內滴注生理鹽水1次。各組分別于造模后第7、14、28及42 d隨機處死6只，取肺組織行HE、Masson染色評價肺組織病理變化，消化法測定肺組織羥脯氨酸（HYP）含量，分別采用RT-PCR和免疫組化法測定肺組織轉化生長因子β1（TGF-β1）的mRNA和蛋白表達。結果 鹽酸組肺泡炎程度始終顯著高于對照組（Plt;0.01），在開始2周內達到一個高峰，隨后仍舊維持一個相對較高狀態，從28 d達到或者超過博來霉素組水平。鹽酸組纖維化程度隨時間逐漸增強，顯著高于對照組（Plt;0.01或0.05），但始終未超過博來霉素組；第42 d時高濃度和中濃度鹽酸組與博來霉素組纖維化程度無顯著差異（Pgt;0.05）；而低濃度鹽酸組纖維化程度與高、中濃度組相比，早期沒有顯著差異，自42 d起與高濃度鹽酸組有明顯差異（Plt;0.05）。高、中濃度鹽酸組肺組織HYP含量自14 d起始終顯著高于對照組（P均lt;0.05），但未超過博來霉素組；高濃度鹽酸組HYP含量在第42 d與博來霉素組無明顯差異，中、低濃度鹽酸組HYP含量始終低于博來霉素組（P均lt;0.05）。鹽酸組肺組織TGF-β1 mRNA在28 d時達到博來霉素組水平，至42 d時超過博來霉素組水平。鹽酸組TGF-β1表達水平從42 d起與博來霉素組無顯著性差異。結論 實驗性酸吸入可引起大鼠肺纖維化，比傳統的博來霉素造模方法更符合肺纖維化的病理生理過程。
目的 觀察香煙煙霧提取物( CSE) 對轉化生長因子β1 ( TGF-β1 ) 刺激的人肺成纖維細胞( HLF) 增殖及分泌過氧化氫( H2O2 ) 的影響, 探討CSE 可能參與肺纖維化發病的機制。方法 將體外分離培養的HLF 細胞分為對照組和TGF-β1 ( 5 ng/mL) 刺激組, 用不同濃度的CSE( 0% 、2. 5% 、5% 、10% ) 進行干預。應用Brdu ELISA 法檢測細胞增殖; 熒光分光光度法測定細胞分泌的H2O2 ; 免疫熒光標記分泌的H2O2 和細胞α-平滑肌肌動蛋白( α-SMA) 表達。結果 TGF-β1 刺激組細胞經免疫熒光標記顯示α-SMA 陽性表達, 說明HLF 在TGF-β1 刺激下轉化為肌成纖維細胞( MF) 。TGF-β1刺激組中, 與0% 濃度CSE 比較, 2. 5%、5% 濃度的CSE 干預可以顯著促進細胞增殖( P lt; 0. 01 或0. 05) , 10% 濃度的CSE 干預抑制細胞增殖( P lt;0. 01) 。對照組中, 與0% 濃度CSE 比較, 2. 5%、5% 、10% 濃度的CSE 均使細胞增殖顯著減弱( P lt;0. 01 或P lt;0. 05) , 并呈劑量依賴性。TGF-β1 刺激HLF細胞能產生一定量的H2O2, CSE 干預后分泌產生的H2O2 明顯增加( P lt; 0. 01) , 經NADPH 氧化酶抑制劑二苯基碘( DPI) 預處理后檢測不到H2O2。免疫熒光標記顯示分泌的H2O2 來源于α-SMA 陽性表達的MF 細胞。結論 低濃度的CSE 能夠促進TGF-β1 刺激HLF 細胞轉化的MF細胞增殖, 并顯著增加MF 細胞向細胞外分泌H2O2 , 提示CSE 可能通過氧化應激參與肺纖維化的發生、發展。
目的 研究支氣管哮喘模型小鼠肺組織及肺T 細胞中三種β1, 3-N-乙酰糖基轉移酶( Fringe) RFNG、LFNG、MFNG 的基因和蛋白表達的特點, 探討Fringe 是否與哮喘發病有關。方法 使用卵白蛋白腹腔注射后霧化吸入法制備BALB/ c 小鼠哮喘模型, 并設置生理鹽水對照組。經Perco1 及尼龍毛法分離獲取肺T 細胞。采用半定量RT-PCR 檢測兩組小鼠肺組織及肺T 細胞中RFNG、LFNG、MFNG mRNA 表達;Western blot 檢測兩組小鼠肺組織中RFNG、LFNG、MFNG 蛋白表達。結果 兩組小鼠肺組織及肺T 細胞中均存在三種Fringe 表達。哮喘組肺組織及肺T 細胞的RFNGmRNA 表達較對照組增加( 肺組織: 0. 92 ±0. 35 比0. 51 ±0. 13, Plt;0. 01; 肺T 細胞: 0. 33 ±0. 06 比0. 18 ±0. 07, Plt; 0. 01) ; LFNG mRNA 表達較對照組減少( 肺組織: 0. 77 ±0. 32 比1. 61 ±0. 31, Plt;0. 01; 肺T細胞: 0. 49 ±0. 19 比0. 71 ±0. 03, P lt;0. 01) 。MFNG 在肺組織中的表達無明顯差異( 肺組織: 1. 44 ±0. 29 比1. 70 ±0. 44, P gt; 0. 05) , 但MFNG 在肺T 細胞中的表達明顯減少( 0. 11 ±0. 03 比0. 52 ±0. 18, P lt; 0. 01) 。肺組織中三種Fringe 蛋白表達與肺組織的mRNA 結果相似。哮喘組的RFNG 蛋白表達高于對照組( 1. 17 ±0. 04 比0. 68 ±0. 07, P lt; 0. 05) , MFNG 蛋白表達在兩者之間沒有明顯的差異( 8. 10 ±0. 60 比9. 12 ±0. 07, P gt; 0. 05) , 而LFNG 的蛋白表達則低于對照組( 4. 11 ±0. 38比6. 41 ±0. 11, P lt;0. 05) 。結論 三種Fringe 的異常表達可能與支氣管哮喘的發病有關。