引用本文： 吳其赫, 高揚, 蔡志平, 時靜華. 細菌溶解產物對哮喘小鼠急性發作狀態下肺功能及血清IgE的影響. 中國呼吸與危重監護雜志, 2022, 21(12): 873-877. doi: 10.7507/1671-6205.202208026 復制
支氣管哮喘（簡稱哮喘）是一類由多種細胞及細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病，累及1%～18%的人口，在中國大約有4570萬成年人患有哮喘，成人總體患病率為4.2%[1]。對于哮喘的發病機制，當前有著很多假說和爭議，較為普遍的觀點認為免疫反應和炎性反應是其重要原因，大多數患者有免疫失衡的現象，免疫功能狀況與該疾病密切相關[2-3]。細菌溶解產物制劑OM-85 BV含有8種細菌病原體的裂解物［流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌（肺炎亞種）、肺炎克雷伯菌（臭鼻亞種）、金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、血鏈球菌、卡他莫拉菌］，已被證明可以通過先天和適應性免疫提高免疫系統反應的效率[4]。據此聯系哮喘免疫反應的發病機制推測OM-85 BV可通過刺激機體免疫，降低機體接觸吸入性過敏原的免疫炎癥反應，起到預防哮喘氣道炎癥的作用，并在哮喘急性發作時減輕氣道炎癥表現與臨床癥狀的嚴重程度。哮喘急性發作時期以大氣道病變為主，典型癥狀是氣流阻塞受限、氣道功能障礙，并伴有肺生理功能下降，為此本實驗建立哮喘小鼠模型，通過外源性給予OM-85 BV進行干預，以哮喘小鼠的肺功能表現為主要觀察點，結合小鼠哮喘激發時癥狀、外周血清IgE變化與肺組織病理改變，研究OM-85 BV干預對預防哮喘急性發作和降低臨床癥狀嚴重程度的作用，以及OM-85 BV增強呼吸免疫系統功能對哮喘免疫失衡的影響是否有益，為OM-85 BV能否應用于哮喘的穩定期治療與免疫治療提供實驗依據。
1 材料與方法
1.1 材料及設備
1.1.1 實驗動物
選取4～6周齡SPF級雌性昆明小鼠30只，體重（20.0±2.2）g，來源于斯貝福（北京）生物技術有限公司［SCXK（京）2019-0010］，在自然通風實驗室中適應性喂養1周［SYXK（蒙）2020-0006］。實驗過程中嚴格按實驗動物使用的3R原則給與小鼠人道關懷。本研究方案已通過包頭醫學院第二附屬醫院醫學倫理委員會審批（2022年科倫審第LW-085）。
1.1.2 主要儀器、試劑
卵清蛋白（ovalbumin，OVA，美國Sigma公司），十二水硫酸鋁鉀干粉（美國Sigma公司），OM-85 BV（瑞士歐姆制藥），小鼠血清IgE酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbentassay，ELISA）檢測試劑盒（中國上海江萊生物科技有限公司），蘇木精–伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色試劑（中國珠海貝索生物技術有限公司），動物肺功能分析設備（中國上海玉研科學儀器有限公司）。
1.2 方法
1.2.1 動物分組及模型制作
采用隨機數字表示法把小鼠分為3組，每組10只，A組為空白對照組，B組為哮喘模型組，C組為細菌溶解產物OM-85 BV干預組。在實驗第1、8和15天分別給B、C組小鼠腹腔注射0.2 mL OVA和十二水硫酸鋁鉀混合液（含OVA 100 μg，十二水硫酸鋁鉀2 mg）使其致敏，第22天起，連續5 d每天霧化吸入5% OVA 30 min激發制備哮喘模型；C組小鼠自第1天起，以細菌溶解產物OM-85 BV溶于0.2 mL生理鹽水（含細菌溶解產物1.75 mg），每只小鼠連續灌胃10 d；A組小鼠的腹腔注射、灌胃用藥及霧化吸入試劑均以生理鹽水代替，B組小鼠灌胃用藥以生理鹽水代替。本實驗所用的哮喘小鼠模型制作方法以及藥物劑量均參照國內外文獻報道并加以改進[5-9]。
1.2.2 肺功能測定
第26天，以末次激發后1 h作為哮喘小鼠急性發作狀態時的檢測時間[10]，腹腔注射1%的戊巴比妥鈉溶液（50 mg/kg）麻醉小鼠。開啟動物肺功能的檢測設備（空氣壓縮機、動物呼吸機、信號調理器、電子計算機、負壓控制器），正中剪開小鼠頸部皮膚，解剖分離氣管。于3、4環骨處氣管橫向切開直徑1 mm的切口。置入小鼠規格的氣管插管，插入深度一般為5～7 mm，用手術縫線在氣管外結扎，將小鼠的肺部與體描箱隔離，以防止肺內氣體進入體描箱，每只小鼠氣管切口的位置和氣管插管插入氣管的深度保持一致，連接氣管插管與體描箱后關閉體描箱。按肺功能儀說明書設定生理潮氣量5 mL/kg，按容量控制方式行用力肺通氣功能實驗。由于實驗小鼠與正常人體肺功能之間存在巨大的物種差異，先進行預實驗測試本批昆明小鼠的正常組，以正常成人一秒率達到80%及以上為標準，并根據既往文獻資料作為參考[11]，應以0.15 s設定本實驗中昆明小鼠的第1秒用力呼氣容積與一秒率的時間節點標準，檢測每只小鼠用力肺活量（forced vital capacity，FVC）、第0.15秒用力呼氣容積（forced vital capacity in 0.15 second，FEV0.15）、0.15秒率（FEV0.15/FVC）、呼氣峰流速（peak expiratory flow，PEF）指標。
1.2.3 測定外周血清中IgE水平
肺功能檢查完成后，在小鼠仍然處于麻醉狀態下行眼球摘除的方式取血，將血液密封于EP管中并靜置1 h后，于臺式離心機離心15 min，然后以移液槍取出上層新鮮血清至凍存管內，置于–80 ℃的電冰箱內儲存，采用ELISA測定外周血清IgE，具體方法按照ELISA試劑盒說明書中所述操作，采用酶標儀測吸光度值，繪制標準曲線，查出血清標本IgE濃度。
1.2.4 支氣管肺組織病理學觀察
小鼠處死后取部分右肺下葉，采用4%多聚甲醛溶液固定48 h后，脫水，石蠟包埋，制備成厚4 μm的切片，行HE染色，光學顯微鏡下觀察支氣管肺組織病理，拍照記錄。
1.3 統計學方法
采用SPSS 20.0統計軟件。呈正態分布的計量資料以均數±標準差（
±s）表示，多組間采用單因素方差分析加以對比，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗，若方差不齊則采用Tamhane檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 一般情況觀察
小鼠以OVA激發過程中，B、C組小鼠出現了煩躁不安或平靜少動、擦鼻、呼吸急促、張口呼吸、腹式呼吸、弓背直立、前足縮抬的表現，口唇及爪有不同程度的發紺，毛發失去光澤，霧化激發過程完畢后，霧化箱內遺留較多排泄物；而B組小鼠于哮喘激發過程中的上述表現較C組更加強烈。霧化結束后15 min左右，B、C兩組小鼠的上述表現可自行緩解。A組小鼠則活動自如，無以上表現。
2.2 支氣管肺組織病理學表現
與A組小鼠相比，B組病理表現為支氣管上皮增生紊亂、塌陷，在支氣管周圍出現以淋巴細胞和嗜酸性細胞為主的炎癥細胞浸潤，氣管腔內出現少量黏液和脫落的上皮細胞，氣道管壁顯著增厚，證明哮喘小鼠模型制備良好成功；C組氣道病理表現較B組氣道損傷程度更輕，小鼠氣道壁厚度有所降低，炎癥細胞也顯著減少。結果見圖1。
圖1
各組小鼠肺組織病理檢查像（HE×400）
a. A組，正常小鼠氣道；b. B組，氣道明顯變形，炎性細胞浸潤；c. C組，氣道輕度變形伴少量炎性細胞。
2.3 各組小鼠肺功能對比
各組間小鼠的FVC指標差別不大，差異無統計學意義（P>0.05）；各組間小鼠FEV0.15、FEV0.15/FVC、PEF指標的差異均有統計學意義（均P<0.05）。與A對照組相比，B、C兩組FEV0.15、FEV0.15/FVC、PEF的值均有顯著下降；相較于普通哮喘模型B組，OM-85 BV干預下的哮喘模型C組FEV0.15、FEV0.15/FVC、PEF指標均有明顯上升，表明哮喘小鼠在OM-85 BV提前干預下，激發時肺功能表現更優，差異有統計學意義（均P<0.05）。結果見表1。
表1
各組小鼠肺功能測定結果［n=10，（
）］
2.4 外周血清IgE水平
A、B、C三組小鼠外周血清中IgE水平分別為（21.60±1.00）ng/mL、（82.06±1.50）ng/mL、（54.46±1.83）ng/mL，組間差異有統計學意義（P<0.05）。相較于A組，B、C兩組血清IgE水平均有顯著上升；相較于B組，C組血清IgE水平明顯下降，差異均有統計學意義（均P<0.05）。
3 討論
哮喘的發病機制和嚴重程度存在巨大異質性[12]，不同表型、不同個體、不同程度的哮喘具有不同的免疫失衡嚴重程度和病理特征[13]。本研究中OVA致敏激發的吸入性哮喘小鼠表現為氣道的慢性炎癥，其本質上是小鼠對環境抗原的免疫反應失衡，過敏使嗜酸性粒細胞增多，支氣管黏膜中性粒細胞積聚，并導致T輔助型1（Th1）細胞因子與T輔助型2（Th2）細胞因子偏向，Th1/Th2比值失衡[14]。哮喘患者發作的氣道炎癥反應以影響大氣道為主，造成通氣功能障礙，在評判通氣功能時，肺功能指標中以FEV1/FVC明顯下降（≤70%）為主，同時PEF與FEV1在評判時有著很好的相關性，結合FEV1/FVC可以反映大氣道的通暢性[15]。本研究結果證明，哮喘小鼠在外源性OM-85 BV的干預下，急性發作時不僅氣道損傷程度較哮喘小鼠模型更輕，血清IgE水平下降，肺生理功能也明顯改善，表現為FEV0.15/FVC、 FEV0.15、PEF指標均明顯提升；OM-85 BV可在一定程度上減輕哮喘急性發作時的癥狀與氣道炎癥，改善急性發作期肺生理功能。
近年來，多項研究探討了哮喘免疫治療的機制。服用OM-85 BV能有效上調巨噬細胞的氧化代謝和一氧化氮的產生，通過增加巨噬細胞的活化和自然殺傷細胞的遷移、活性和抗原識別來促進病原體的破壞[16]。OM-85 BV還通過刺激T淋巴細胞、B淋巴細胞、粒細胞遷移，巨噬細胞吞噬活性，間接影響自然免疫和獲得性免疫[17]。而通過本實驗結果推斷，OM-85 BV的這種免疫刺激可能對哮喘的免疫失衡有積極的治療作用。在臨床中，患有嗜酸性粒細胞增多性哮喘的患者還可能伴有細菌性支氣管炎或下呼吸道的病毒感染[18-19]，可導致肺組織上皮損傷，釋放多種免疫因子，導致特異性和非特異性免疫反應的失衡被認為是哮喘惡化的常見原因[2-3]。在有復發性呼吸道感染的兒童中，與安慰劑相比，OM-85 BV可減少急性呼吸道感染的數量25%～50%[20]。這些研究表明OM-85 BV可降低穩定期哮喘患者因感染因素惡化為重度哮喘的風險。
綜上所述，我們通過測試不同組別小鼠的肺功能、血清IgE水平，制作肺組織病理切片，證明了外源性的給予哮喘小鼠OM-85 BV后，能有效緩解哮喘小鼠發作時的氣道炎癥，減少嗜酸性粒細胞浸潤，降低其外周血清IgE的濃度，提升哮喘小鼠急性發作時的肺功能表現。本實驗參考既往研究方法于小鼠哮喘模型建立初期給藥干預，在保持可調節免疫系統的藥物有效濃度期間誘導小鼠哮喘急性發作，得出上述實驗結果，表明在口服OM-85 BV調節哮喘小鼠穩定期的免疫系統后，可減輕哮喘小鼠接觸過敏原急性發病時的病情嚴重程度，不僅為臨床中OM-85 BV治療哮喘提供了實驗依據，也一定程度上體現了使用OM-85 BV干預哮喘穩定期的治療價值。臨床中OM-85 BV總療程為3個月，因此將來進一步研究OM-85 BV對哮喘動物模型的影響機制時，可按照臨床實際應用，調節用藥時機與給藥時間的長短，調節小鼠鼠齡以對應臨床患者的年齡，同時因為吸入糖皮質激素作為臨床上哮喘的一線治療方法，可研究哮喘小鼠造模后再吸入糖皮質激素與口服OM-85 BV聯合治療的意義，將有助于探究OM-85 BV應用于哮喘急性發作和穩定期控制的臨床價值，完善哮喘免疫治療策略。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
支氣管哮喘（簡稱哮喘）是一類由多種細胞及細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病，累及1%～18%的人口，在中國大約有4570萬成年人患有哮喘，成人總體患病率為4.2%[1]。對于哮喘的發病機制，當前有著很多假說和爭議，較為普遍的觀點認為免疫反應和炎性反應是其重要原因，大多數患者有免疫失衡的現象，免疫功能狀況與該疾病密切相關[2-3]。細菌溶解產物制劑OM-85 BV含有8種細菌病原體的裂解物［流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌（肺炎亞種）、肺炎克雷伯菌（臭鼻亞種）、金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、血鏈球菌、卡他莫拉菌］，已被證明可以通過先天和適應性免疫提高免疫系統反應的效率[4]。據此聯系哮喘免疫反應的發病機制推測OM-85 BV可通過刺激機體免疫，降低機體接觸吸入性過敏原的免疫炎癥反應，起到預防哮喘氣道炎癥的作用，并在哮喘急性發作時減輕氣道炎癥表現與臨床癥狀的嚴重程度。哮喘急性發作時期以大氣道病變為主，典型癥狀是氣流阻塞受限、氣道功能障礙，并伴有肺生理功能下降，為此本實驗建立哮喘小鼠模型，通過外源性給予OM-85 BV進行干預，以哮喘小鼠的肺功能表現為主要觀察點，結合小鼠哮喘激發時癥狀、外周血清IgE變化與肺組織病理改變，研究OM-85 BV干預對預防哮喘急性發作和降低臨床癥狀嚴重程度的作用，以及OM-85 BV增強呼吸免疫系統功能對哮喘免疫失衡的影響是否有益，為OM-85 BV能否應用于哮喘的穩定期治療與免疫治療提供實驗依據。
1 材料與方法
1.1 材料及設備
1.1.1 實驗動物
選取4～6周齡SPF級雌性昆明小鼠30只，體重（20.0±2.2）g，來源于斯貝福（北京）生物技術有限公司［SCXK（京）2019-0010］，在自然通風實驗室中適應性喂養1周［SYXK（蒙）2020-0006］。實驗過程中嚴格按實驗動物使用的3R原則給與小鼠人道關懷。本研究方案已通過包頭醫學院第二附屬醫院醫學倫理委員會審批（2022年科倫審第LW-085）。
1.1.2 主要儀器、試劑
卵清蛋白（ovalbumin，OVA，美國Sigma公司），十二水硫酸鋁鉀干粉（美國Sigma公司），OM-85 BV（瑞士歐姆制藥），小鼠血清IgE酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbentassay，ELISA）檢測試劑盒（中國上海江萊生物科技有限公司），蘇木精–伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色試劑（中國珠海貝索生物技術有限公司），動物肺功能分析設備（中國上海玉研科學儀器有限公司）。
1.2 方法
1.2.1 動物分組及模型制作
采用隨機數字表示法把小鼠分為3組，每組10只，A組為空白對照組，B組為哮喘模型組，C組為細菌溶解產物OM-85 BV干預組。在實驗第1、8和15天分別給B、C組小鼠腹腔注射0.2 mL OVA和十二水硫酸鋁鉀混合液（含OVA 100 μg，十二水硫酸鋁鉀2 mg）使其致敏，第22天起，連續5 d每天霧化吸入5% OVA 30 min激發制備哮喘模型；C組小鼠自第1天起，以細菌溶解產物OM-85 BV溶于0.2 mL生理鹽水（含細菌溶解產物1.75 mg），每只小鼠連續灌胃10 d；A組小鼠的腹腔注射、灌胃用藥及霧化吸入試劑均以生理鹽水代替，B組小鼠灌胃用藥以生理鹽水代替。本實驗所用的哮喘小鼠模型制作方法以及藥物劑量均參照國內外文獻報道并加以改進[5-9]。
1.2.2 肺功能測定
第26天，以末次激發后1 h作為哮喘小鼠急性發作狀態時的檢測時間[10]，腹腔注射1%的戊巴比妥鈉溶液（50 mg/kg）麻醉小鼠。開啟動物肺功能的檢測設備（空氣壓縮機、動物呼吸機、信號調理器、電子計算機、負壓控制器），正中剪開小鼠頸部皮膚，解剖分離氣管。于3、4環骨處氣管橫向切開直徑1 mm的切口。置入小鼠規格的氣管插管，插入深度一般為5～7 mm，用手術縫線在氣管外結扎，將小鼠的肺部與體描箱隔離，以防止肺內氣體進入體描箱，每只小鼠氣管切口的位置和氣管插管插入氣管的深度保持一致，連接氣管插管與體描箱后關閉體描箱。按肺功能儀說明書設定生理潮氣量5 mL/kg，按容量控制方式行用力肺通氣功能實驗。由于實驗小鼠與正常人體肺功能之間存在巨大的物種差異，先進行預實驗測試本批昆明小鼠的正常組，以正常成人一秒率達到80%及以上為標準，并根據既往文獻資料作為參考[11]，應以0.15 s設定本實驗中昆明小鼠的第1秒用力呼氣容積與一秒率的時間節點標準，檢測每只小鼠用力肺活量（forced vital capacity，FVC）、第0.15秒用力呼氣容積（forced vital capacity in 0.15 second，FEV0.15）、0.15秒率（FEV0.15/FVC）、呼氣峰流速（peak expiratory flow，PEF）指標。
1.2.3 測定外周血清中IgE水平
肺功能檢查完成后，在小鼠仍然處于麻醉狀態下行眼球摘除的方式取血，將血液密封于EP管中并靜置1 h后，于臺式離心機離心15 min，然后以移液槍取出上層新鮮血清至凍存管內，置于–80 ℃的電冰箱內儲存，采用ELISA測定外周血清IgE，具體方法按照ELISA試劑盒說明書中所述操作，采用酶標儀測吸光度值，繪制標準曲線，查出血清標本IgE濃度。
1.2.4 支氣管肺組織病理學觀察
小鼠處死后取部分右肺下葉，采用4%多聚甲醛溶液固定48 h后，脫水，石蠟包埋，制備成厚4 μm的切片，行HE染色，光學顯微鏡下觀察支氣管肺組織病理，拍照記錄。
1.3 統計學方法
采用SPSS 20.0統計軟件。呈正態分布的計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組間采用單因素方差分析加以對比，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗，若方差不齊則采用Tamhane檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 一般情況觀察
小鼠以OVA激發過程中，B、C組小鼠出現了煩躁不安或平靜少動、擦鼻、呼吸急促、張口呼吸、腹式呼吸、弓背直立、前足縮抬的表現，口唇及爪有不同程度的發紺，毛發失去光澤，霧化激發過程完畢后，霧化箱內遺留較多排泄物；而B組小鼠于哮喘激發過程中的上述表現較C組更加強烈。霧化結束后15 min左右，B、C兩組小鼠的上述表現可自行緩解。A組小鼠則活動自如，無以上表現。
2.2 支氣管肺組織病理學表現
與A組小鼠相比，B組病理表現為支氣管上皮增生紊亂、塌陷，在支氣管周圍出現以淋巴細胞和嗜酸性細胞為主的炎癥細胞浸潤，氣管腔內出現少量黏液和脫落的上皮細胞，氣道管壁顯著增厚，證明哮喘小鼠模型制備良好成功；C組氣道病理表現較B組氣道損傷程度更輕，小鼠氣道壁厚度有所降低，炎癥細胞也顯著減少。結果見圖1。
圖1
各組小鼠肺組織病理檢查像（HE×400）
a. A組，正常小鼠氣道；b. B組，氣道明顯變形，炎性細胞浸潤；c. C組，氣道輕度變形伴少量炎性細胞。
2.3 各組小鼠肺功能對比
各組間小鼠的FVC指標差別不大，差異無統計學意義（P>0.05）；各組間小鼠FEV0.15、FEV0.15/FVC、PEF指標的差異均有統計學意義（均P<0.05）。與A對照組相比，B、C兩組FEV0.15、FEV0.15/FVC、PEF的值均有顯著下降；相較于普通哮喘模型B組，OM-85 BV干預下的哮喘模型C組FEV0.15、FEV0.15/FVC、PEF指標均有明顯上升，表明哮喘小鼠在OM-85 BV提前干預下，激發時肺功能表現更優，差異有統計學意義（均P<0.05）。結果見表1。
表1
各組小鼠肺功能測定結果［n=10，（）］
2.4 外周血清IgE水平
A、B、C三組小鼠外周血清中IgE水平分別為（21.60±1.00）ng/mL、（82.06±1.50）ng/mL、（54.46±1.83）ng/mL，組間差異有統計學意義（P<0.05）。相較于A組，B、C兩組血清IgE水平均有顯著上升；相較于B組，C組血清IgE水平明顯下降，差異均有統計學意義（均P<0.05）。
3 討論
哮喘的發病機制和嚴重程度存在巨大異質性[12]，不同表型、不同個體、不同程度的哮喘具有不同的免疫失衡嚴重程度和病理特征[13]。本研究中OVA致敏激發的吸入性哮喘小鼠表現為氣道的慢性炎癥，其本質上是小鼠對環境抗原的免疫反應失衡，過敏使嗜酸性粒細胞增多，支氣管黏膜中性粒細胞積聚，并導致T輔助型1（Th1）細胞因子與T輔助型2（Th2）細胞因子偏向，Th1/Th2比值失衡[14]。哮喘患者發作的氣道炎癥反應以影響大氣道為主，造成通氣功能障礙，在評判通氣功能時，肺功能指標中以FEV1/FVC明顯下降（≤70%）為主，同時PEF與FEV1在評判時有著很好的相關性，結合FEV1/FVC可以反映大氣道的通暢性[15]。本研究結果證明，哮喘小鼠在外源性OM-85 BV的干預下，急性發作時不僅氣道損傷程度較哮喘小鼠模型更輕，血清IgE水平下降，肺生理功能也明顯改善，表現為FEV0.15/FVC、 FEV0.15、PEF指標均明顯提升；OM-85 BV可在一定程度上減輕哮喘急性發作時的癥狀與氣道炎癥，改善急性發作期肺生理功能。
近年來，多項研究探討了哮喘免疫治療的機制。服用OM-85 BV能有效上調巨噬細胞的氧化代謝和一氧化氮的產生，通過增加巨噬細胞的活化和自然殺傷細胞的遷移、活性和抗原識別來促進病原體的破壞[16]。OM-85 BV還通過刺激T淋巴細胞、B淋巴細胞、粒細胞遷移，巨噬細胞吞噬活性，間接影響自然免疫和獲得性免疫[17]。而通過本實驗結果推斷，OM-85 BV的這種免疫刺激可能對哮喘的免疫失衡有積極的治療作用。在臨床中，患有嗜酸性粒細胞增多性哮喘的患者還可能伴有細菌性支氣管炎或下呼吸道的病毒感染[18-19]，可導致肺組織上皮損傷，釋放多種免疫因子，導致特異性和非特異性免疫反應的失衡被認為是哮喘惡化的常見原因[2-3]。在有復發性呼吸道感染的兒童中，與安慰劑相比，OM-85 BV可減少急性呼吸道感染的數量25%～50%[20]。這些研究表明OM-85 BV可降低穩定期哮喘患者因感染因素惡化為重度哮喘的風險。
綜上所述，我們通過測試不同組別小鼠的肺功能、血清IgE水平，制作肺組織病理切片，證明了外源性的給予哮喘小鼠OM-85 BV后，能有效緩解哮喘小鼠發作時的氣道炎癥，減少嗜酸性粒細胞浸潤，降低其外周血清IgE的濃度，提升哮喘小鼠急性發作時的肺功能表現。本實驗參考既往研究方法于小鼠哮喘模型建立初期給藥干預，在保持可調節免疫系統的藥物有效濃度期間誘導小鼠哮喘急性發作，得出上述實驗結果，表明在口服OM-85 BV調節哮喘小鼠穩定期的免疫系統后，可減輕哮喘小鼠接觸過敏原急性發病時的病情嚴重程度，不僅為臨床中OM-85 BV治療哮喘提供了實驗依據，也一定程度上體現了使用OM-85 BV干預哮喘穩定期的治療價值。臨床中OM-85 BV總療程為3個月，因此將來進一步研究OM-85 BV對哮喘動物模型的影響機制時，可按照臨床實際應用，調節用藥時機與給藥時間的長短，調節小鼠鼠齡以對應臨床患者的年齡，同時因為吸入糖皮質激素作為臨床上哮喘的一線治療方法，可研究哮喘小鼠造模后再吸入糖皮質激素與口服OM-85 BV聯合治療的意義，將有助于探究OM-85 BV應用于哮喘急性發作和穩定期控制的臨床價值，完善哮喘免疫治療策略。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
