引用本文： 何永鴻, 王宋平. 阿托伐他汀鈣對香煙暴露大鼠肺血管炎癥模型組蛋白脫乙酰酶2的影響. 中國呼吸與危重監護雜志, 2021, 20(12): 881-884. doi: 10.7507/1671-6205.202007090 復制
肺血管炎癥常繼發于慢性阻塞性肺疾病（簡稱慢阻肺），好發于中老年人，男性偏多，伴隨一系列如咳嗽、呼吸困難、氣促胸悶等呼吸系統癥狀，出現氣流受限[1]。肺血管炎癥及氣道炎癥長期未控制使得炎癥刺激和慢性缺氧進一步惡化，出現氣道重塑、肺實質破壞、肺血管收縮及重構，進一步發展為肺動脈高壓，并形成肺血管重建，是引起呼吸衰竭和肺源性心臟病的主要原因[2]。
阿托伐他汀作為調脂藥物的一種，目前主要應用于心血管疾病的預防和治療中，但除了降脂作用外，他汀類藥物還有抗炎、抗氧化、改善內皮功能、調節免疫等作用[3-4]。目前，在慢阻肺患者的治療中，對于他汀類藥物可以起到抗炎、抗氧化作用的報道明顯增多[5]。長期使用他汀類藥物可減少慢阻肺患者病情惡化和病死率[6]。探討他汀類藥物對慢阻肺患者氣道炎癥、肺血管炎癥及肺血管重構等相關研究內容報道較少，相關抗炎機制尚不明確。因此，本研究旨在觀察阿托伐他汀鈣通過組蛋白脫乙酰酶2（HDAC2）對香煙暴露大鼠肺血管炎癥的影響。
1 材料與方法
1.1 實驗動物
選取健康雌性SD大鼠18只，7~10周齡，體重（180±20）g。大鼠由西南醫科大學城北校區動物實驗中心購入，飼養于西南醫科大學忠山校區動物房，室內恒溫空調房，溫度維持在24~26 ℃，空氣濕度維持在50%左右，給予足量的食物喂養及飲水。
1.2 實驗的主要試劑、器材
阿托伐他汀鈣片（輝瑞制藥有限公司，20 mg）；脂多糖（Sigma公司）；中國嬌子牌香煙（焦油量11 mg、煙氣煙堿量1.1 mg、煙氣一氧化碳量12 mg，四川中煙工業有限責任公司）；HDAC2酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒（大鼠型，ELK Biotechnology公司）；蘇木素染液、伊紅染液（國藥集團化學試劑有限公司）、TRIpure Total RNA Extraction Reagent試劑（ELK Biotechnology公司）、聚合酶鏈反應（PCR）儀（基因擴增儀TC-XP，杭州博日科技公司）等實驗器材。
1.3 實驗方法及操作
1.3.1 實驗大鼠模型的建立
大鼠于動物房適應性喂養1周后，以每6只為一組將18只大鼠隨機分配為空白對照組（A組）、肺血管炎癥模型組（B組）、阿托伐他汀鈣藥物干預實驗組（C組）。A組大鼠予以正常的飼養，參照經典慢阻肺大鼠模型［7-8］的制作，使用香煙加脂多糖的方法對B組模型組進行造模：在第1、14天，每只大鼠經氣道滴入脂多糖200 μg，共計35 d，A組同期予以霧化吸入等量生理鹽水。C組在B組的基礎上，參考文獻[7]設定阿托伐他汀鈣劑量5 mg/（kg·d），A、B組同期予以等量生理鹽水進行灌胃。
1.3.2 體重的記錄
每周一，清晨空腹，電子秤測量大鼠體重，3次取平均值并記錄。
1.3.3 標本的采集、制作
血清采集：第35天對所有大鼠使用3%戊巴比妥鈉注射液（1.5 mL/kg）進行充分麻醉，開胸后心臟取血，以3000 r/min離心15 min，取上層血清，于–80 °C冰箱保存。病理標本的制備：取大鼠新鮮右肺中葉組織，用4%多聚甲醛固定，脫水后使用石蠟包埋并切片，使用蘇木精–伊紅（HE）染色，對各組病理組織改變進行記錄，同時進行肺血管炎癥的評價。參考文獻［8］，根據光鏡下表現，對肺血管炎癥進行評分：0分，無炎癥細胞浸潤；1分，少許炎癥細胞浸潤；2分，炎性細胞浸潤較多但分布不均勻；3分，炎癥細胞浸潤多，分布均勻，但不聚集成團；4分，大量炎性細胞浸潤并聚集成團。
1.3.4 ELISA法檢測各組大鼠血清中HDAC2水平
參照試劑盒說明書，按以下濃度稀釋標準品：1.57、3.13、6.25、12.5、25.0、50.0、100.0 ng/mL，并設置標準稀釋劑空白濃度0.0 ng/mL。同時設置空白孔、標準孔、樣品孔，樣品組設復孔2個。調零孔加樣品稀釋液100 μL，其余孔分別加入標準品或待測樣品100 μL，37 ℃下孵育2 h，每個孔中加入生物素化抗大鼠HDAC2抗體稀釋劑100 μL，37 ℃下反應60 min，磷酸鹽緩沖液洗滌3次，每孔加生物素辣根過氧化物酶工作液100 μL，37 ℃溫育25 min，上述步驟反復 5 次，每孔加入90 μL四甲基聯苯胺底物顯色液，37 ℃避光孵育20 min，最后每孔加停止液50 μL，溶液變黃，在酶標儀450 nm波長處測量各孔的光密度值，并與標準曲線比較。
1.3.5 蛋白印跡法檢測肺組織中HDAC2水平
清洗組織后，使用組織蛋白提取劑，再離心獲取組織蛋白液，BCA蛋白質濃度測定試劑盒測定樣品蛋白濃度，并依次予以十二烷基硫酸鈉–聚丙烯酰胺凝膠電泳、轉膜，將轉好的膜加入封閉液室溫封閉1 h。除去封閉液，加入用一抗稀釋液稀釋好的一抗4 ℃過夜。回收已稀釋的一抗，用TBST洗3次，每次5 min加入二抗稀釋液稀釋好的二抗，室溫孵育30 min，用TBST在室溫下搖床上洗4次，每次5 min。滴加新鮮配制的ECL混合溶液（A∶B=1∶1）到膜的蛋白面側，于暗室曝光，在不同的光強度調整曝光條件下顯影、定影。
1.3.6 實時熒光定量PCR法檢測肺組織HDAC2 mRNA的表達
取新鮮左肺上葉組織，參照試劑盒說明書，提取總RNA，將RNA逆轉錄為第一cDNA，行PCR擴增目的基因，產物行瓊脂糖凝膠電泳。擴增引物：（1）HDAC2上游引物5’-ACCTAACTGTCAAAGGTCACGCT-3’，下游引物5’-ACCTAACTGTCAAAGGTCACGCT-3’，產物152 bp；（2）GAPDH上游引物5’-GCCAAGGTCATCCATGACAAC-3’，下游引物5’-GTGGATGCAGGGATGATGTTC-3’，產物152 bp。反應條件：95 ℃預變性3 min，95 ℃變性15 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，循環40次。將熔解曲線程序設定為儀器出廠默認設置，利用熒光定量PCR儀自動計算每個樣本的CT值，使用ΔΔCT法分析HDAC2 mRNA的表達水平。
1.4 統計學方法
采用SPSS 19.0統計軟件。計量資料以均數±標準差（
±s）表示，組間比較使用 SNK?q 檢驗，方差齊數據使用單因素方差分析，兩變量間使用Pearson 法分析相關性，P<0.05 為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 各組大鼠一般情況
經適應性喂養后1周各組大鼠一般情況可，進食攝水正常，毛發顏色明亮光澤。經實驗造模相關操作處理后2周，C、B組大鼠出現間斷喘息、咳嗽，呼吸急促，逐漸進食減少，精神狀態欠佳，毛發變黃、脫落，B組大鼠更為明顯。各組大鼠最初體重差異無統計學意義（P>0.05），經喂養42 d后，A組大鼠體重增加值（112.83±16.35）g，C組大鼠體重增加值（88.33±7.52）g，均明顯高于B組大鼠（64.83±25.22）g，其差異有統計學意義（P<0.05）。
2.2 各組大鼠肺組織的病理改變
A組大鼠肺組織中肺間隔、肺氣管壁正常，肺氣管壁周圍炎性細胞浸潤正常，肺血管以及周圍組織形態正常，炎性細胞較少（圖1a～c）。B組大鼠肺組織中氣管壁明顯增厚，氣管周圍明顯有大量炎性細胞聚集，肺泡有大量炎性細胞浸潤，血管周圍有大量的炎性細胞聚集，肺血管平滑肌增生明顯，肺間隔明顯增厚，肺組織中有大量的炎性細胞浸潤（圖1d～f）。C組大鼠肺組織中肺氣管壁以及肺氣管周圍炎性細胞浸潤較B組有較大改善，肺血管周圍有炎性細胞浸潤，肺組織中有炎性細胞浸潤，肺血管平滑肌增生程度低于B組、炎性細胞較B組少（圖1g～i）。與A組比較，B組和C組肺血管炎癥明顯，而C組的肺血管炎癥明顯輕于B組。各組的炎癥評分見表1。
圖1
各組肺部氣道及血管改變（HE×100）
a～c：A組大鼠肺的支氣管、肺泡和血管；d～f：B組大鼠肺的支氣管、肺泡和血管；g～i：C組大鼠肺的支氣管、肺泡和血管。A組肺組織中肺泡、肺間隔及肺血管形態正常。B組肺組織中呼吸性細支氣管、肺泡管、肺泡囊及肺泡可見明顯擴大，肺血管炎癥明顯。C組肺組織中肺血管周圍有炎性細胞浸潤，肺組織中有炎性細胞浸潤，程度輕。
表1
各組大鼠的血管炎癥評分、血清中HDAC2水平、肺組織中HDAC2蛋白和mRNA水平的比較（
）
2.3 各組大鼠血清中HDAC2水平
A組大鼠血清中HADC2水平略高于C組，但C組和A組HADC2水平明顯高于B組，各組之間的差異有統計學意義（P<0.05）。結果見表1。
2.4 各組大鼠肺組織中HDAC2蛋白的表達水平
B組大鼠肺組織的HDAC2蛋白表達明顯減少，而通過阿托伐他汀鈣藥物干預后，C組的HDAC2蛋白表達相較于B組明顯增加，略低于A組。結果見表1、圖2。
圖2
各組肺組織中HDAC2蛋白印跡檢測像
2.5 各組大鼠肺組織中HDAC2 mRNA水平
A組和C組的HDAC2 mRNA水平明顯高于B組，其差異有統計學意義（P<0.05），結果如表1。
3 討論
建立動物模型是探索疾病發病機制及研究臨床藥物的重要方式，使用氣管滴入脂多糖聯合充分煙霧暴露是建立肺血管炎癥大鼠模型的常用方法之一[9]。在本實驗中，使用經典香煙刺激聯合脂多糖建立肺血管炎癥大鼠模型，5周后B組大鼠的病理組織改變特征明顯，而且B、C組大鼠出現了呼吸增快、紫紺，病理結果提示支氣管周圍炎性細胞團聚浸潤，部分肺泡結構破壞，黏液分泌增多。血管管腔變厚，動脈血管多層內膜均增生，出現不規則病理性增生血管和小分支動脈分流，符合嚴重的氣管炎癥、典型肺血管炎癥模型改變，說明建模成功。進一步檢測分析顯示，C組與A組大鼠血清中HDAC2水平、肺組織中HDAC2蛋白水平、肺組織中HDAC2 mRNA水平都明顯高于B組（P<0.05）。其中A組大鼠血清中HDAC2水平、肺組織中HDAC2蛋白水平、肺組織中HDAC2 mRNA水平都明顯高于C組（P<0.05）。
本研究結果顯示，阿托伐他汀鈣可以改善大鼠氣道炎癥、肺血管炎癥程度，延緩肺血管重塑的發生發展，與相關研究報道一致[10-15]。其機制可能為阿托伐他汀抑制乙酰輔酶A生成，減少鳥苷三磷酸含量，扼制核因子κB，從而競爭性地減少了HDAC2被特異性結合，核因子κB乙酰化去路增加[13]，炎癥因子及炎癥介質釋放減少，因此肺血管炎癥明顯減輕，進而減少嗜酸粒細胞、淋巴細胞趨勢游走、炎癥因子進入組織，降低血管的通透性及下調肺血管內皮因子等相關炎性介質[11]，避免氣道細胞炎癥趨化作用引起的血管炎癥[14]。因此，研究結果表明，鑒于阿托伐他汀對肺血管炎癥的抑制作用，可將其運用于存在肺血管炎癥患者的輔助治療。
本研究存在一定的局限：第一，樣本量較小。第二，使用單一的阿托伐他汀劑量（5 mg/kg）進行實驗。第三，未測定肺泡灌洗液中中性粒細胞等細胞的數量，無直接的相關炎癥因子及介質的含量測定。未來應增加樣本量，同時摸索阿托伐他汀的適宜劑量尤其是最佳劑量，設定更多的相關炎癥因子及介質指標，以獲得更準確的結論。
綜上所述，本研究表明阿托伐他汀鈣可改善大鼠的肺血管炎癥改變，其機制可能是通過增加HDAC2的表達，抑制炎癥基因表達，減少炎癥因子、肺血管內皮因子的釋放，維持血管通透性，防止肺血管炎癥進一步發生發展及肺血管重構。研究為肺血管炎癥的藥物治療提供了新的依據及方向。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
肺血管炎癥常繼發于慢性阻塞性肺疾病（簡稱慢阻肺），好發于中老年人，男性偏多，伴隨一系列如咳嗽、呼吸困難、氣促胸悶等呼吸系統癥狀，出現氣流受限[1]。肺血管炎癥及氣道炎癥長期未控制使得炎癥刺激和慢性缺氧進一步惡化，出現氣道重塑、肺實質破壞、肺血管收縮及重構，進一步發展為肺動脈高壓，并形成肺血管重建，是引起呼吸衰竭和肺源性心臟病的主要原因[2]。
阿托伐他汀作為調脂藥物的一種，目前主要應用于心血管疾病的預防和治療中，但除了降脂作用外，他汀類藥物還有抗炎、抗氧化、改善內皮功能、調節免疫等作用[3-4]。目前，在慢阻肺患者的治療中，對于他汀類藥物可以起到抗炎、抗氧化作用的報道明顯增多[5]。長期使用他汀類藥物可減少慢阻肺患者病情惡化和病死率[6]。探討他汀類藥物對慢阻肺患者氣道炎癥、肺血管炎癥及肺血管重構等相關研究內容報道較少，相關抗炎機制尚不明確。因此，本研究旨在觀察阿托伐他汀鈣通過組蛋白脫乙酰酶2（HDAC2）對香煙暴露大鼠肺血管炎癥的影響。
1 材料與方法
1.1 實驗動物
選取健康雌性SD大鼠18只，7~10周齡，體重（180±20）g。大鼠由西南醫科大學城北校區動物實驗中心購入，飼養于西南醫科大學忠山校區動物房，室內恒溫空調房，溫度維持在24~26 ℃，空氣濕度維持在50%左右，給予足量的食物喂養及飲水。
1.2 實驗的主要試劑、器材
阿托伐他汀鈣片（輝瑞制藥有限公司，20 mg）；脂多糖（Sigma公司）；中國嬌子牌香煙（焦油量11 mg、煙氣煙堿量1.1 mg、煙氣一氧化碳量12 mg，四川中煙工業有限責任公司）；HDAC2酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒（大鼠型，ELK Biotechnology公司）；蘇木素染液、伊紅染液（國藥集團化學試劑有限公司）、TRIpure Total RNA Extraction Reagent試劑（ELK Biotechnology公司）、聚合酶鏈反應（PCR）儀（基因擴增儀TC-XP，杭州博日科技公司）等實驗器材。
1.3 實驗方法及操作
1.3.1 實驗大鼠模型的建立
大鼠于動物房適應性喂養1周后，以每6只為一組將18只大鼠隨機分配為空白對照組（A組）、肺血管炎癥模型組（B組）、阿托伐他汀鈣藥物干預實驗組（C組）。A組大鼠予以正常的飼養，參照經典慢阻肺大鼠模型［7-8］的制作，使用香煙加脂多糖的方法對B組模型組進行造模：在第1、14天，每只大鼠經氣道滴入脂多糖200 μg，共計35 d，A組同期予以霧化吸入等量生理鹽水。C組在B組的基礎上，參考文獻[7]設定阿托伐他汀鈣劑量5 mg/（kg·d），A、B組同期予以等量生理鹽水進行灌胃。
1.3.2 體重的記錄
每周一，清晨空腹，電子秤測量大鼠體重，3次取平均值并記錄。
1.3.3 標本的采集、制作
血清采集：第35天對所有大鼠使用3%戊巴比妥鈉注射液（1.5 mL/kg）進行充分麻醉，開胸后心臟取血，以3000 r/min離心15 min，取上層血清，于–80 °C冰箱保存。病理標本的制備：取大鼠新鮮右肺中葉組織，用4%多聚甲醛固定，脫水后使用石蠟包埋并切片，使用蘇木精–伊紅（HE）染色，對各組病理組織改變進行記錄，同時進行肺血管炎癥的評價。參考文獻［8］，根據光鏡下表現，對肺血管炎癥進行評分：0分，無炎癥細胞浸潤；1分，少許炎癥細胞浸潤；2分，炎性細胞浸潤較多但分布不均勻；3分，炎癥細胞浸潤多，分布均勻，但不聚集成團；4分，大量炎性細胞浸潤并聚集成團。
1.3.4 ELISA法檢測各組大鼠血清中HDAC2水平
參照試劑盒說明書，按以下濃度稀釋標準品：1.57、3.13、6.25、12.5、25.0、50.0、100.0 ng/mL，并設置標準稀釋劑空白濃度0.0 ng/mL。同時設置空白孔、標準孔、樣品孔，樣品組設復孔2個。調零孔加樣品稀釋液100 μL，其余孔分別加入標準品或待測樣品100 μL，37 ℃下孵育2 h，每個孔中加入生物素化抗大鼠HDAC2抗體稀釋劑100 μL，37 ℃下反應60 min，磷酸鹽緩沖液洗滌3次，每孔加生物素辣根過氧化物酶工作液100 μL，37 ℃溫育25 min，上述步驟反復 5 次，每孔加入90 μL四甲基聯苯胺底物顯色液，37 ℃避光孵育20 min，最后每孔加停止液50 μL，溶液變黃，在酶標儀450 nm波長處測量各孔的光密度值，并與標準曲線比較。
1.3.5 蛋白印跡法檢測肺組織中HDAC2水平
清洗組織后，使用組織蛋白提取劑，再離心獲取組織蛋白液，BCA蛋白質濃度測定試劑盒測定樣品蛋白濃度，并依次予以十二烷基硫酸鈉–聚丙烯酰胺凝膠電泳、轉膜，將轉好的膜加入封閉液室溫封閉1 h。除去封閉液，加入用一抗稀釋液稀釋好的一抗4 ℃過夜。回收已稀釋的一抗，用TBST洗3次，每次5 min加入二抗稀釋液稀釋好的二抗，室溫孵育30 min，用TBST在室溫下搖床上洗4次，每次5 min。滴加新鮮配制的ECL混合溶液（A∶B=1∶1）到膜的蛋白面側，于暗室曝光，在不同的光強度調整曝光條件下顯影、定影。
1.3.6 實時熒光定量PCR法檢測肺組織HDAC2 mRNA的表達
取新鮮左肺上葉組織，參照試劑盒說明書，提取總RNA，將RNA逆轉錄為第一cDNA，行PCR擴增目的基因，產物行瓊脂糖凝膠電泳。擴增引物：（1）HDAC2上游引物5’-ACCTAACTGTCAAAGGTCACGCT-3’，下游引物5’-ACCTAACTGTCAAAGGTCACGCT-3’，產物152 bp；（2）GAPDH上游引物5’-GCCAAGGTCATCCATGACAAC-3’，下游引物5’-GTGGATGCAGGGATGATGTTC-3’，產物152 bp。反應條件：95 ℃預變性3 min，95 ℃變性15 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，循環40次。將熔解曲線程序設定為儀器出廠默認設置，利用熒光定量PCR儀自動計算每個樣本的CT值，使用ΔΔCT法分析HDAC2 mRNA的表達水平。
1.4 統計學方法
采用SPSS 19.0統計軟件。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較使用 SNK?q 檢驗，方差齊數據使用單因素方差分析，兩變量間使用Pearson 法分析相關性，P<0.05 為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 各組大鼠一般情況
經適應性喂養后1周各組大鼠一般情況可，進食攝水正常，毛發顏色明亮光澤。經實驗造模相關操作處理后2周，C、B組大鼠出現間斷喘息、咳嗽，呼吸急促，逐漸進食減少，精神狀態欠佳，毛發變黃、脫落，B組大鼠更為明顯。各組大鼠最初體重差異無統計學意義（P>0.05），經喂養42 d后，A組大鼠體重增加值（112.83±16.35）g，C組大鼠體重增加值（88.33±7.52）g，均明顯高于B組大鼠（64.83±25.22）g，其差異有統計學意義（P<0.05）。
2.2 各組大鼠肺組織的病理改變
A組大鼠肺組織中肺間隔、肺氣管壁正常，肺氣管壁周圍炎性細胞浸潤正常，肺血管以及周圍組織形態正常，炎性細胞較少（圖1a～c）。B組大鼠肺組織中氣管壁明顯增厚，氣管周圍明顯有大量炎性細胞聚集，肺泡有大量炎性細胞浸潤，血管周圍有大量的炎性細胞聚集，肺血管平滑肌增生明顯，肺間隔明顯增厚，肺組織中有大量的炎性細胞浸潤（圖1d～f）。C組大鼠肺組織中肺氣管壁以及肺氣管周圍炎性細胞浸潤較B組有較大改善，肺血管周圍有炎性細胞浸潤，肺組織中有炎性細胞浸潤，肺血管平滑肌增生程度低于B組、炎性細胞較B組少（圖1g～i）。與A組比較，B組和C組肺血管炎癥明顯，而C組的肺血管炎癥明顯輕于B組。各組的炎癥評分見表1。
圖1
各組肺部氣道及血管改變（HE×100）
a～c：A組大鼠肺的支氣管、肺泡和血管；d～f：B組大鼠肺的支氣管、肺泡和血管；g～i：C組大鼠肺的支氣管、肺泡和血管。A組肺組織中肺泡、肺間隔及肺血管形態正常。B組肺組織中呼吸性細支氣管、肺泡管、肺泡囊及肺泡可見明顯擴大，肺血管炎癥明顯。C組肺組織中肺血管周圍有炎性細胞浸潤，肺組織中有炎性細胞浸潤，程度輕。
表1
各組大鼠的血管炎癥評分、血清中HDAC2水平、肺組織中HDAC2蛋白和mRNA水平的比較（）
2.3 各組大鼠血清中HDAC2水平
A組大鼠血清中HADC2水平略高于C組，但C組和A組HADC2水平明顯高于B組，各組之間的差異有統計學意義（P<0.05）。結果見表1。
2.4 各組大鼠肺組織中HDAC2蛋白的表達水平
B組大鼠肺組織的HDAC2蛋白表達明顯減少，而通過阿托伐他汀鈣藥物干預后，C組的HDAC2蛋白表達相較于B組明顯增加，略低于A組。結果見表1、圖2。
圖2
各組肺組織中HDAC2蛋白印跡檢測像
2.5 各組大鼠肺組織中HDAC2 mRNA水平
A組和C組的HDAC2 mRNA水平明顯高于B組，其差異有統計學意義（P<0.05），結果如表1。
3 討論
建立動物模型是探索疾病發病機制及研究臨床藥物的重要方式，使用氣管滴入脂多糖聯合充分煙霧暴露是建立肺血管炎癥大鼠模型的常用方法之一[9]。在本實驗中，使用經典香煙刺激聯合脂多糖建立肺血管炎癥大鼠模型，5周后B組大鼠的病理組織改變特征明顯，而且B、C組大鼠出現了呼吸增快、紫紺，病理結果提示支氣管周圍炎性細胞團聚浸潤，部分肺泡結構破壞，黏液分泌增多。血管管腔變厚，動脈血管多層內膜均增生，出現不規則病理性增生血管和小分支動脈分流，符合嚴重的氣管炎癥、典型肺血管炎癥模型改變，說明建模成功。進一步檢測分析顯示，C組與A組大鼠血清中HDAC2水平、肺組織中HDAC2蛋白水平、肺組織中HDAC2 mRNA水平都明顯高于B組（P<0.05）。其中A組大鼠血清中HDAC2水平、肺組織中HDAC2蛋白水平、肺組織中HDAC2 mRNA水平都明顯高于C組（P<0.05）。
本研究結果顯示，阿托伐他汀鈣可以改善大鼠氣道炎癥、肺血管炎癥程度，延緩肺血管重塑的發生發展，與相關研究報道一致[10-15]。其機制可能為阿托伐他汀抑制乙酰輔酶A生成，減少鳥苷三磷酸含量，扼制核因子κB，從而競爭性地減少了HDAC2被特異性結合，核因子κB乙酰化去路增加[13]，炎癥因子及炎癥介質釋放減少，因此肺血管炎癥明顯減輕，進而減少嗜酸粒細胞、淋巴細胞趨勢游走、炎癥因子進入組織，降低血管的通透性及下調肺血管內皮因子等相關炎性介質[11]，避免氣道細胞炎癥趨化作用引起的血管炎癥[14]。因此，研究結果表明，鑒于阿托伐他汀對肺血管炎癥的抑制作用，可將其運用于存在肺血管炎癥患者的輔助治療。
本研究存在一定的局限：第一，樣本量較小。第二，使用單一的阿托伐他汀劑量（5 mg/kg）進行實驗。第三，未測定肺泡灌洗液中中性粒細胞等細胞的數量，無直接的相關炎癥因子及介質的含量測定。未來應增加樣本量，同時摸索阿托伐他汀的適宜劑量尤其是最佳劑量，設定更多的相關炎癥因子及介質指標，以獲得更準確的結論。
綜上所述，本研究表明阿托伐他汀鈣可改善大鼠的肺血管炎癥改變，其機制可能是通過增加HDAC2的表達，抑制炎癥基因表達，減少炎癥因子、肺血管內皮因子的釋放，維持血管通透性，防止肺血管炎癥進一步發生發展及肺血管重構。研究為肺血管炎癥的藥物治療提供了新的依據及方向。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
