引用本文： 歐剛, 李琴, 溫娟, 陳斌. 不同濃度七氟烷對大鼠高氧性肺損傷的影響. 中國呼吸與危重監護雜志, 2020, 19(3): 281-286. doi: 10.7507/1671-6205.201903087 復制
急性肺損傷是臨床上常見的急危重癥之一，病死率高，臨床上引起肺損傷的病因主要包括：機械通氣、高氧、嚴重肺部感染、膿毒癥、脂肪栓塞、輸血相關性損傷、胃酸吸入、重癥胰腺炎等。氧療在臨床麻醉應用廣泛，對自身存在嚴重的肺基礎疾病的患者，臨床麻醉可能誘發高氧性急性肺損傷（hyperoxia-induced lung injury，HALI）[1]，對自身存在嚴重的肺基礎疾病的患者，可影響術后康復。
七氟烷一種廣泛應用于臨床的吸入麻醉藥，研究認為能降低組織炎癥、抗氧化應激的作用[2-3]，但對 HALL 是否有保護作用尚未知。據此，本研究擬探討七氟烷對高氧造成的肺損傷是否存在保護功能，并探討適宜的七氟烷濃度。
1 材料與方法
1.1 實驗動物、主要試劑與儀器
SPF 級健康 SD 大鼠 72 只，體重 120～150 g，購自川北醫學院動物實驗中心［動物生產許可證編號：SCXK（川）2018-18］。七氟烷（產品批號 19090931）；純氧（川北醫學院麻醉系）；酶聯免疫吸附試驗試劑盒（欣博盛，中國）；4% 多聚甲醛固定液 AR1068（博士德，中國）；10% 水合氯醛溶液 XFSJ1477（信帆生物，中國）。麻醉機 Drger Fabius ?plus（德爾格，德國）；氧濃度檢測儀（CiTicel，英國）；血氣分析儀 GEM premier 3000（GEM，美國）；電子天平 YB2002-E（上海力能電子，中國）；電熱鼓風干燥箱 WGL-125B（天津泰斯特儀器，中國）；氣相色譜儀 7890A（安捷倫科技，美國）。
1.2 方法
1.2.1 實驗分組及處理
大鼠適應性喂養一周后隨機分為：對照組 C 組、不同濃度七氟烷處理 S 組，S 組包含 5 個亞組。參考文獻[4]的方法，C 組不作任何處理，S 組采用自制的鼠籠連接麻醉機螺紋管，向鼠籠內持續供氧，氧流量 5 L/min，用氧濃度檢測儀動態監測鼠籠內及廢氣排出口氧氣濃度，使其維持在 95% 以上，持續 48 h 后停止供氧以建立高氧性肺損傷模型。造模后 S0 組、S1 組、S1.5 組、S2.0 組、S2.5 組大鼠分別自由吸入濃度維持在 0%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5% 的七氟烷 1 h，七氟烷濃度據氣相色譜儀監測調整，C 組自由呼吸空氣 1 h。
1.2.2 實驗取材
腹腔注射 4 mL/kg 的 10% 水合氯醛麻醉大鼠，待大鼠睫毛反射消失后，固定大鼠于手術解剖板，分離腹主動脈，穿刺抽取動脈血，儲存于 1.5 mL EP 管內放置于–80 ℃ 冰箱凍存備用，另抽取 3 mL 左右血液于肝素化容器中，用 GEM premier 3000 進行血氣分析。處死大鼠后立即剪開腹部皮膚、筋膜，提起劍突，打開胸腔，迅速解剖切除雙側肺。將左側肺置于無菌培養皿內，將右側肺用磷酸鹽緩沖液清洗表面血液后，立即置于 4% 的多聚甲醛中固定 24～48 h。整個標本操作過程迅速，預防動脈血溶血及左肺在空氣中暴露時間過長，導致水分蒸發。
1.2.3 動脈血氣分析
采用 GEM premier 3000 血氣分析儀檢測動脈血氧分壓（arterial partial pressure of oxygen，PaO2）和動脈血二氧化碳分壓（arterial partial pressure of carbon dioxide，PaCO2），每管血連續測 3 次。
1.2.4 炎癥因子測定
從深低溫冰箱取出凍存動脈血的 EP 管，室溫下解凍。待解凍完全后，4 °C 2 000 r/min 高速離心 5 min，小心吸取上清液 100 μL，參照欣博盛公司試劑盒內說明書進行酶聯免疫吸附試驗測定腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α、白細胞介素（interleukin，IL）-8、IL-6。
1.2.5 肺組織濕/干比測定
使用電子微量天平精確稱重左肺，記錄為濕重（W），然后置于 80 ℃ 烤箱內烘干 24 h 后連續測量三次至重量不再變化后記錄為干重（D），記錄 W/D 值。通常，W/D 比值>4，提示肺組織水腫。
1.2.6 肺組織病理觀察
肺組織固定后石蠟包埋切片進行蘇木精–伊紅染色（hematoxylin-eosin staining，HE）染色，觀察病理改變并進行病理評分。評分指標：（1）肺泡腔充血；（2）出血；（3）肺泡腔或血管壁中性粒細胞浸潤聚集；（4）肺泡壁增厚和透明膜形成。評分標準參考文獻[5]，0 分為無病變或輕微，1 分為輕度病變，2 分為中度病變，3 分為重度病變，4 分為極重度病變，各項分數相加作為病理評分。
1.3 統計學方法
采用 SPSS 23.0 統計軟件。計量資料采用均數±標準差（
±s），而單因素方差（One-way ANOVA）分析用于組間比較，方差齊時選擇 LSD t 檢驗用于組間兩兩比較，方差不齊時選擇 Tamhane's T2 法用于組間兩兩比較。P<0.05 為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 各組大鼠動脈血氣分析值比較
與 C 組比較，S 組 PaO2 降低、PaCO2 增加（P<0.05）；T1 時刻：與 S0 組比較，S1.0 至 S2.5 組動脈血 PaO2、PaCO2 無統計學差異（P>0.05）；T2 時刻：與 S0 組比較，S1.0 至 S2.5 動脈血 PaO2 升高、PaCO2 降低（P<0.05）；與 S2.0 組比較，S1.0 至 S1.5 動脈血 PaO2 降低、PaCO2 增高（P<0.05），而 S2.5 上述指標無統計學差異。詳細見表 1。
表1
各組動脈血 PaO2、PaCO2 比較（
，n=6）
2.2 各組大鼠血清炎癥因子
與 C 組比較，S 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度升高（P<0.05）；T1 時刻：與 S0 組比較，S1.0 至 S2.5 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度無統計學差異（P>0.05）；T2 時刻：與 S0 比較，S1.0 至 S2.5 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度降低（P<0.05）；與 S2.0 組比較，S1.0 至 S1.5 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度升高（P<0.05），而 S2.5 上述指標無統計學差異，詳細見表 2。
表2
各組動物模型血清中 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度比較（
，n=6）
2.3 各組大鼠肺組織 W/D 比值與病理觀察結果
與 C 組比較，S 組 W/D 比值、病理損傷評分升高（P<0.05）；T1 時刻：與 S0 比較，S1.0 至 S2.5 組 W/D 比值、病理評分無統計學差異（P>0.05）；T2 時刻：與 S0 比較，S1.0 至 S2.5 組 W/D 比值、病理評分降低（P<0.05），與 S2.0 組比較，S1.0 至 S1.5 組的 W/D 比值、病理損傷評分升高（P<0.05），S2.5 組無統計學差異。詳細結果見表 3。各組肺組織病理染色見圖 1、圖 2，結果提示七氟烷吸入能有效地減輕高氧導致的肺損傷。
圖1
各組大鼠在高氧處理 48 h（T1）肺組織病理像（HE×100）
a. C 組；b～f. S0 組、S1.0 組、S1.5 組、S2.0 組、S2.5 組。C 組肺組織肺泡腔清晰，結構完整，壁光滑，肺泡腔內無滲出液，肺泡間隔均勻一致。S0 至 S2.5 組肺組織正常結構均受到破壞，呈現彌漫性損傷，肺組織結構模糊，炎癥細胞聚集，組織充血水腫、出血及透明膜形成，部分出現滲出液和漏出的紅細胞（紅色箭頭所指區域為病變部位）
圖2
各組大鼠在高氧處理后吸入七氟烷 1 h（T2）肺組織病理像（HE×100）
a. C 組；b～f. S0 組、S1.0 組、S1.5 組、S2.0 組、S2.5 組。C 組肺組織肺泡腔清晰，結構完整，壁光滑，肺泡腔內無滲出液，肺泡間隔均勻一致；S0 組表現為大量炎性粒細胞浸潤，組織充血水腫，無明顯的肺泡結構；S1.0 與 S1.5 組肺組織結構紊亂，肺泡邊緣模糊，肺泡腔及肺間質內有較多的炎癥細胞浸潤，部分組織中伴水腫、透明膜形成、可見滲出液和漏出的紅細胞；S2.0、S2.5 組肺泡紋理清晰，有少量的炎性細胞浸潤，部分結構有破壞，滲出液與腫脹肺泡明顯減少（紅色箭頭所指區域為病變部位）
表3
各組動物模型 W/D 比值與病理損傷評分比較（
，n=6）
3 討論
本研究參考文獻[4]的方法，應用吸入 95% 48 h 制作高氧性肺損傷模型，S 組中各組肺臟 HE 染色表明：肺組織正常結構均受到破壞、呈現彌漫性損傷、炎癥細胞浸潤、組織充血水腫、出血及透明膜形成。部分出現滲出液和漏出的紅細胞，提示造模成功。給予七氟烷處理后，與七氟烷處理前比較，S1.0 至 S2.5 組大鼠病理損傷評分降低、動脈血 PaO2 升高、PaCO2 降低、肺組織 W/D 比值降低、血清炎癥因子含量降低，而 S0 組上述指標無統計學差異，說明七氟烷可以對高氧導致的肺損傷產生保護作用。
HALI 的急性期有明顯的肺泡–毛細血管屏障損傷，炎癥因子在其中發揮重要作用。當吸入高濃度氧氣時，肺組織直接暴露于高氧中，導致肺組織通透性增加，肺泡滲出增多以及肺泡表面活性物質減少，高氧還可促進肺內多種炎癥因子表達，如 TNF-α、IL-8 和 IL-6 等[6]，TNF-α 是一種炎細胞因子，通過作用于細胞膜上的可溶性受體（TNFR1 與 TNFR2）激活凋亡蛋白 caspase-8 誘導細胞凋亡[7-8]，此外 TNF-α 還可以促進 IL-8、IL-6 的表達[9]，IL-8 通過誘導并趨化中心粒細胞浸潤，以及與 FcγRIIa 受體結合加重肺損傷[10]，IL-8 作為中性粒細胞高敏感的激活劑與趨化劑，募集中性粒細胞介導微血管損傷，而肺泡中性粒細胞浸潤是肺損傷的重要特征[11]；IL-6 被認為是肺損傷時激活 Rho 信號通路導致炎癥性二次損傷的主要因素[12]。TNF-α 和 IL-6 主要通過 NF-κβ、p38、MAPK、JAK/STAT 及 JNK 等信號通路介導炎性細胞和炎性介質強化炎性反應，是評估早期肺損傷程度的重要指標[13]，本研究中 T1 時刻 S0 至 S2.5 組大鼠血清 TNF-α、IL-8 及 IL-6 較 C 組升高也印證了上述觀點。
七氟烷因具有誘導快、蘇醒迅速、呼吸道刺激小等優點已廣泛應用于臨床麻醉，其可以通過抗炎、抗氧化作用發揮重要器官的保護作用，Ferrando 等[2]的研究表明七氟烷對急性呼吸窘迫綜合征中肺的保護作用與炎癥得到抑制有關；Yang 等[14]的研究表明七氟烷可以通過調節 c-PLA2 的表達減輕機械通氣相關肺損傷；Luo 等[3]的研究證實七氟烷可以減輕腸缺血再灌注導致的肺損傷；然而七氟烷對高氧導致的肺損傷是否具有保護效應還研究尚少。本研究發現七氟烷能有效地減輕高氧導致的肺損傷，由此降低了肺組織的通透性、改善了肺組的通氣與換氣功能、降低炎癥反應強度，產生這種結果的原因可能與七氟烷能降低炎癥反應以及抑制肺損傷后低氧性肺血管收縮有關[15-16]，Toll-NF-κB 是生物體內廣泛存在的炎癥信號通路，活化的 NF-κB 進入細胞核調節炎性因子的表達，研究已經證實七氟烷的器官保護作用與抑制該信號通活性有關[17-18]，因此，本實驗中七氟烷是否也是通過此信號通路發揮保護作用，也是我們下步實驗需要驗證的。同時我們還觀察到隨著七氟烷吸入濃度的升高，其肺保護效應也逐漸增強，且肺保護效應在七氟烷濃度為 2.0% 時達到頂峰，隨后逐漸下降。這與 Wang 等[19]的實驗結果不一致，他們發現經過濃度為 2.5% 七氟烷治療 30 min 可以減輕大鼠內毒素導致的肺損傷。分析差異的可能原因是七氟烷治療的時間不同以及大鼠的周齡不一致。
綜上表明，七氟烷吸入能通過抗炎作用改善大鼠高氧造成的肺損傷，這將為臨床上治療 HALI 提供新的思路和策略，其中以 2.0% 濃度效果最佳，此后七氟烷濃度增加也并未提高肺保護作用，但其具體機制有待進一步研究。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
急性肺損傷是臨床上常見的急危重癥之一，病死率高，臨床上引起肺損傷的病因主要包括：機械通氣、高氧、嚴重肺部感染、膿毒癥、脂肪栓塞、輸血相關性損傷、胃酸吸入、重癥胰腺炎等。氧療在臨床麻醉應用廣泛，對自身存在嚴重的肺基礎疾病的患者，臨床麻醉可能誘發高氧性急性肺損傷（hyperoxia-induced lung injury，HALI）[1]，對自身存在嚴重的肺基礎疾病的患者，可影響術后康復。
七氟烷一種廣泛應用于臨床的吸入麻醉藥，研究認為能降低組織炎癥、抗氧化應激的作用[2-3]，但對 HALL 是否有保護作用尚未知。據此，本研究擬探討七氟烷對高氧造成的肺損傷是否存在保護功能，并探討適宜的七氟烷濃度。
1 材料與方法
1.1 實驗動物、主要試劑與儀器
SPF 級健康 SD 大鼠 72 只，體重 120～150 g，購自川北醫學院動物實驗中心［動物生產許可證編號：SCXK（川）2018-18］。七氟烷（產品批號 19090931）；純氧（川北醫學院麻醉系）；酶聯免疫吸附試驗試劑盒（欣博盛，中國）；4% 多聚甲醛固定液 AR1068（博士德，中國）；10% 水合氯醛溶液 XFSJ1477（信帆生物，中國）。麻醉機 Drger Fabius ?plus（德爾格，德國）；氧濃度檢測儀（CiTicel，英國）；血氣分析儀 GEM premier 3000（GEM，美國）；電子天平 YB2002-E（上海力能電子，中國）；電熱鼓風干燥箱 WGL-125B（天津泰斯特儀器，中國）；氣相色譜儀 7890A（安捷倫科技，美國）。
1.2 方法
1.2.1 實驗分組及處理
大鼠適應性喂養一周后隨機分為：對照組 C 組、不同濃度七氟烷處理 S 組，S 組包含 5 個亞組。參考文獻[4]的方法，C 組不作任何處理，S 組采用自制的鼠籠連接麻醉機螺紋管，向鼠籠內持續供氧，氧流量 5 L/min，用氧濃度檢測儀動態監測鼠籠內及廢氣排出口氧氣濃度，使其維持在 95% 以上，持續 48 h 后停止供氧以建立高氧性肺損傷模型。造模后 S0 組、S1 組、S1.5 組、S2.0 組、S2.5 組大鼠分別自由吸入濃度維持在 0%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5% 的七氟烷 1 h，七氟烷濃度據氣相色譜儀監測調整，C 組自由呼吸空氣 1 h。
1.2.2 實驗取材
腹腔注射 4 mL/kg 的 10% 水合氯醛麻醉大鼠，待大鼠睫毛反射消失后，固定大鼠于手術解剖板，分離腹主動脈，穿刺抽取動脈血，儲存于 1.5 mL EP 管內放置于–80 ℃ 冰箱凍存備用，另抽取 3 mL 左右血液于肝素化容器中，用 GEM premier 3000 進行血氣分析。處死大鼠后立即剪開腹部皮膚、筋膜，提起劍突，打開胸腔，迅速解剖切除雙側肺。將左側肺置于無菌培養皿內，將右側肺用磷酸鹽緩沖液清洗表面血液后，立即置于 4% 的多聚甲醛中固定 24～48 h。整個標本操作過程迅速，預防動脈血溶血及左肺在空氣中暴露時間過長，導致水分蒸發。
1.2.3 動脈血氣分析
采用 GEM premier 3000 血氣分析儀檢測動脈血氧分壓（arterial partial pressure of oxygen，PaO2）和動脈血二氧化碳分壓（arterial partial pressure of carbon dioxide，PaCO2），每管血連續測 3 次。
1.2.4 炎癥因子測定
從深低溫冰箱取出凍存動脈血的 EP 管，室溫下解凍。待解凍完全后，4 °C 2 000 r/min 高速離心 5 min，小心吸取上清液 100 μL，參照欣博盛公司試劑盒內說明書進行酶聯免疫吸附試驗測定腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α、白細胞介素（interleukin，IL）-8、IL-6。
1.2.5 肺組織濕/干比測定
使用電子微量天平精確稱重左肺，記錄為濕重（W），然后置于 80 ℃ 烤箱內烘干 24 h 后連續測量三次至重量不再變化后記錄為干重（D），記錄 W/D 值。通常，W/D 比值>4，提示肺組織水腫。
1.2.6 肺組織病理觀察
肺組織固定后石蠟包埋切片進行蘇木精–伊紅染色（hematoxylin-eosin staining，HE）染色，觀察病理改變并進行病理評分。評分指標：（1）肺泡腔充血；（2）出血；（3）肺泡腔或血管壁中性粒細胞浸潤聚集；（4）肺泡壁增厚和透明膜形成。評分標準參考文獻[5]，0 分為無病變或輕微，1 分為輕度病變，2 分為中度病變，3 分為重度病變，4 分為極重度病變，各項分數相加作為病理評分。
1.3 統計學方法
采用 SPSS 23.0 統計軟件。計量資料采用均數±標準差（±s），而單因素方差（One-way ANOVA）分析用于組間比較，方差齊時選擇 LSD t 檢驗用于組間兩兩比較，方差不齊時選擇 Tamhane's T2 法用于組間兩兩比較。P<0.05 為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 各組大鼠動脈血氣分析值比較
與 C 組比較，S 組 PaO2 降低、PaCO2 增加（P<0.05）；T1 時刻：與 S0 組比較，S1.0 至 S2.5 組動脈血 PaO2、PaCO2 無統計學差異（P>0.05）；T2 時刻：與 S0 組比較，S1.0 至 S2.5 動脈血 PaO2 升高、PaCO2 降低（P<0.05）；與 S2.0 組比較，S1.0 至 S1.5 動脈血 PaO2 降低、PaCO2 增高（P<0.05），而 S2.5 上述指標無統計學差異。詳細見表 1。
表1
各組動脈血 PaO2、PaCO2 比較（，n=6）
2.2 各組大鼠血清炎癥因子
與 C 組比較，S 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度升高（P<0.05）；T1 時刻：與 S0 組比較，S1.0 至 S2.5 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度無統計學差異（P>0.05）；T2 時刻：與 S0 比較，S1.0 至 S2.5 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度降低（P<0.05）；與 S2.0 組比較，S1.0 至 S1.5 組 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度升高（P<0.05），而 S2.5 上述指標無統計學差異，詳細見表 2。
表2
各組動物模型血清中 TNF-α、IL-8 及 IL-6 濃度比較（，n=6）
2.3 各組大鼠肺組織 W/D 比值與病理觀察結果
與 C 組比較，S 組 W/D 比值、病理損傷評分升高（P<0.05）；T1 時刻：與 S0 比較，S1.0 至 S2.5 組 W/D 比值、病理評分無統計學差異（P>0.05）；T2 時刻：與 S0 比較，S1.0 至 S2.5 組 W/D 比值、病理評分降低（P<0.05），與 S2.0 組比較，S1.0 至 S1.5 組的 W/D 比值、病理損傷評分升高（P<0.05），S2.5 組無統計學差異。詳細結果見表 3。各組肺組織病理染色見圖 1、圖 2，結果提示七氟烷吸入能有效地減輕高氧導致的肺損傷。
圖1
各組大鼠在高氧處理 48 h（T1）肺組織病理像（HE×100）
a. C 組；b～f. S0 組、S1.0 組、S1.5 組、S2.0 組、S2.5 組。C 組肺組織肺泡腔清晰，結構完整，壁光滑，肺泡腔內無滲出液，肺泡間隔均勻一致。S0 至 S2.5 組肺組織正常結構均受到破壞，呈現彌漫性損傷，肺組織結構模糊，炎癥細胞聚集，組織充血水腫、出血及透明膜形成，部分出現滲出液和漏出的紅細胞（紅色箭頭所指區域為病變部位）
圖2
各組大鼠在高氧處理后吸入七氟烷 1 h（T2）肺組織病理像（HE×100）
a. C 組；b～f. S0 組、S1.0 組、S1.5 組、S2.0 組、S2.5 組。C 組肺組織肺泡腔清晰，結構完整，壁光滑，肺泡腔內無滲出液，肺泡間隔均勻一致；S0 組表現為大量炎性粒細胞浸潤，組織充血水腫，無明顯的肺泡結構；S1.0 與 S1.5 組肺組織結構紊亂，肺泡邊緣模糊，肺泡腔及肺間質內有較多的炎癥細胞浸潤，部分組織中伴水腫、透明膜形成、可見滲出液和漏出的紅細胞；S2.0、S2.5 組肺泡紋理清晰，有少量的炎性細胞浸潤，部分結構有破壞，滲出液與腫脹肺泡明顯減少（紅色箭頭所指區域為病變部位）
表3
各組動物模型 W/D 比值與病理損傷評分比較（，n=6）
3 討論
本研究參考文獻[4]的方法，應用吸入 95% 48 h 制作高氧性肺損傷模型，S 組中各組肺臟 HE 染色表明：肺組織正常結構均受到破壞、呈現彌漫性損傷、炎癥細胞浸潤、組織充血水腫、出血及透明膜形成。部分出現滲出液和漏出的紅細胞，提示造模成功。給予七氟烷處理后，與七氟烷處理前比較，S1.0 至 S2.5 組大鼠病理損傷評分降低、動脈血 PaO2 升高、PaCO2 降低、肺組織 W/D 比值降低、血清炎癥因子含量降低，而 S0 組上述指標無統計學差異，說明七氟烷可以對高氧導致的肺損傷產生保護作用。
HALI 的急性期有明顯的肺泡–毛細血管屏障損傷，炎癥因子在其中發揮重要作用。當吸入高濃度氧氣時，肺組織直接暴露于高氧中，導致肺組織通透性增加，肺泡滲出增多以及肺泡表面活性物質減少，高氧還可促進肺內多種炎癥因子表達，如 TNF-α、IL-8 和 IL-6 等[6]，TNF-α 是一種炎細胞因子，通過作用于細胞膜上的可溶性受體（TNFR1 與 TNFR2）激活凋亡蛋白 caspase-8 誘導細胞凋亡[7-8]，此外 TNF-α 還可以促進 IL-8、IL-6 的表達[9]，IL-8 通過誘導并趨化中心粒細胞浸潤，以及與 FcγRIIa 受體結合加重肺損傷[10]，IL-8 作為中性粒細胞高敏感的激活劑與趨化劑，募集中性粒細胞介導微血管損傷，而肺泡中性粒細胞浸潤是肺損傷的重要特征[11]；IL-6 被認為是肺損傷時激活 Rho 信號通路導致炎癥性二次損傷的主要因素[12]。TNF-α 和 IL-6 主要通過 NF-κβ、p38、MAPK、JAK/STAT 及 JNK 等信號通路介導炎性細胞和炎性介質強化炎性反應，是評估早期肺損傷程度的重要指標[13]，本研究中 T1 時刻 S0 至 S2.5 組大鼠血清 TNF-α、IL-8 及 IL-6 較 C 組升高也印證了上述觀點。
七氟烷因具有誘導快、蘇醒迅速、呼吸道刺激小等優點已廣泛應用于臨床麻醉，其可以通過抗炎、抗氧化作用發揮重要器官的保護作用，Ferrando 等[2]的研究表明七氟烷對急性呼吸窘迫綜合征中肺的保護作用與炎癥得到抑制有關；Yang 等[14]的研究表明七氟烷可以通過調節 c-PLA2 的表達減輕機械通氣相關肺損傷；Luo 等[3]的研究證實七氟烷可以減輕腸缺血再灌注導致的肺損傷；然而七氟烷對高氧導致的肺損傷是否具有保護效應還研究尚少。本研究發現七氟烷能有效地減輕高氧導致的肺損傷，由此降低了肺組織的通透性、改善了肺組的通氣與換氣功能、降低炎癥反應強度，產生這種結果的原因可能與七氟烷能降低炎癥反應以及抑制肺損傷后低氧性肺血管收縮有關[15-16]，Toll-NF-κB 是生物體內廣泛存在的炎癥信號通路，活化的 NF-κB 進入細胞核調節炎性因子的表達，研究已經證實七氟烷的器官保護作用與抑制該信號通活性有關[17-18]，因此，本實驗中七氟烷是否也是通過此信號通路發揮保護作用，也是我們下步實驗需要驗證的。同時我們還觀察到隨著七氟烷吸入濃度的升高，其肺保護效應也逐漸增強，且肺保護效應在七氟烷濃度為 2.0% 時達到頂峰，隨后逐漸下降。這與 Wang 等[19]的實驗結果不一致，他們發現經過濃度為 2.5% 七氟烷治療 30 min 可以減輕大鼠內毒素導致的肺損傷。分析差異的可能原因是七氟烷治療的時間不同以及大鼠的周齡不一致。
綜上表明，七氟烷吸入能通過抗炎作用改善大鼠高氧造成的肺損傷，這將為臨床上治療 HALI 提供新的思路和策略，其中以 2.0% 濃度效果最佳，此后七氟烷濃度增加也并未提高肺保護作用，但其具體機制有待進一步研究。
利益沖突：本研究不涉及任何利益沖突。
