引用本文： 潘新月, 張浩, 王征. ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中的表達及其臨床意義. 中國普外基礎與臨床雜志, 2023, 30(7): 802-807. doi: 10.7507/1007-9424.202303044 復制
目前乳腺癌為女性惡性腫瘤發病率第1位[1]，相關腫瘤生物學標志物、鉬靶、超聲、乳腺MRI等輔助檢查的應用，以及化療、放療、靶向治療、內分泌治療等輔助治療的應用，雖然極大地提高了乳腺癌患者的存活率，但治療后患者的復發率及死亡率依然較高[2]。乳腺癌在女性中占1/6的癌癥死亡病例，乳腺癌已經成為女性惡性腫瘤的主要死因[3]。乙醛脫氫酶1（aldehyde dehydrogenase 1，ALDH1）是胰腺癌、結腸癌、膀胱癌等多種腫瘤干細胞標志物[4]，ALDH1高表達與患者的不良預后顯著相關[5]。性別決定區Y框蛋白2（sex determining region Y-box 2，SOX2）作為SOX家族成員之一，能維持胚胎干細胞多能性，在腫瘤發生發展過程中發揮重要作用[6]。但是目前國內外關于ALDH1及SOX2在乳腺癌發生發展中的作用機制尚不清楚，兩者在乳腺癌組織中表達相關性的相關研究較少。本研究應用免疫組織化學（以下簡稱“免疫組化”）方法檢測ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中的表達情況，分析兩者的表達與乳腺癌患者臨床病理特征的相關性以及與患者預后的關系。
1 資料與方法
1.1 研究對象
收集2017年9月至2019年9月期間南陽市中心醫院收治的80例乳腺癌患者。入組標準：① 病理確診為乳腺惡性腫瘤；② 術前未接受輔助化療、內分泌治療等；③ 臨床資料完整；④ 年齡 >18歲。排除標準：① 患其他乳腺疾病如乳腺增生；② 合并其他系統惡性腫瘤如肺癌、卵巢癌；③ 合并心、肝、腎等嚴重原發疾病；④ 有遠處轉移。本研究經南陽市中心醫院醫學倫理委員會批準，受試者均簽署知情同意書。80例乳腺癌患者均為女性，年齡30～77歲，中位年齡51歲；組織學分級：Ⅰ ～ Ⅱ級34 例， Ⅲ級 46 例；TNM分期：Ⅰ ～ Ⅱ期 24例，Ⅲ ～ Ⅳ期56例；有淋巴結轉移57例。
1.2 檢測指標及方法
免疫組化方法檢測乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1及SOX2蛋白表達情況。取80例乳腺癌患者的癌組織及其癌旁組織標本，常規經10%中性甲醛液固定，石蠟包埋、連續切片，厚為3 μm。 常規脫蠟，高壓修復，磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）沖洗后滴加一抗（即用型兔抗人SOX2單克隆抗體、ALDH1單抗），4 ℃過夜后PBS沖洗，滴加二抗（酶標羊抗鼠/兔聚合物），行二氨基聯苯胺顯色，蘇木精復染，脫水、透明后中性樹膠封片，顯微鏡下觀察著色情況。陽性對照為已知陽性病理組織切片，陰性對照為PBS代替一抗。 抗-ALDH1抗體和抗-SOX2抗體分別購自Bioss生物科技有限公司及鄭州賽諾特生物技術有限公司，抗-SOX2抗體采用即用型工作液，抗-ALDH1抗體采用濃縮型抗體1∶300倍稀釋。
1.3 結果判讀
① 年齡根據中位年齡結合多項研究中的報道，將50歲作為年齡的截斷值；② 腫瘤大小指腫瘤最大徑，根據美國腫瘤聯合會乳腺癌T分期標準及多項研究，將2 cm作為腫瘤大小的截斷值；③ Ki-67表達狀態采用免疫組化方法評估，Ki-67 增殖指數 ≤30%為低表達，反之為高表達。ALDH1和 SOX2蛋白主要表達于細胞質[7-8]，以細胞質中出現棕黃色或黃色顆粒為陽性表達。采用半定量積分法，根據染色強度（未著色0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分）及陽性細胞所占比例（陰性為0分，陽性細胞占比 ≤25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，≥76%為4分）綜合評分，兩項評分相加，<3分為陰性，≥3分為陽性。
1.4 隨訪方法
從患者確診當日起，通過電話隨訪及門診復診，以隨訪結束是否系無病生存（disease free survival，DFS）為結局指標。終點事件為患者出現復發、轉移或死亡。隨訪截止時間為2022年8月31日。中位隨訪時間為37.0個月，無失訪病例。
1.5 統計學方法
應用SPSS 26.0行統計學分析。計數資料以例數表示，組間比較用成組卡方或配對卡方檢驗，等級資料組間比較用秩和檢驗。通過二分類 logistic 回歸分析隨訪后達到DFS的影響因素。采用Spearman秩相關性分析ALDH1與SOX2蛋白表達的相關性。采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線 ，log-rank檢驗分析生存曲線差異。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1和SOX2蛋白表達檢測結果
乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1和SOX2蛋白表達的免疫組化檢測結果見圖1。ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中的表達陽性率均高于其在癌旁組織中的表達陽性率（P<0.05），具體見表1。
圖1
示乳腺癌組織中ALDH1（a）和SOX2（b）蛋白陽性表達及癌旁組織中ALDH1（c）和SOX2（d）蛋白陽性表達（免疫組化染色 ×40）
表1
乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1和SOX2蛋白表達檢測結果［例（%） ］
2.2 乳腺癌組織中ALDH1和SOX2蛋白表達與患者臨床病理特征的關系
乳腺癌組織中ALDH1和SOX2蛋白的表達與患者的年齡、腫瘤大小、人表皮生長因子激素受體2（human epidermal growth factor hormone receptor 2，HER2）、Ki-67、雌激素受體（estrogen receptor，ER）及孕激素受體（progesterone receptor，PR）狀態均無關（P>0.05），與腫瘤組織學分級、TNM分期及腋窩淋巴結狀態有關（P<0.05）。具體見表2。
表2
乳腺癌組織中ALDH1和SOX2蛋白表達與患者臨床病理特征的關系［例（%） ］
2.3 乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達與SOX2蛋白表達的相關性
乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達與SOX2蛋白表達呈正相關（rs=0.507，P<0.001）。具體見表3。
表3
乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達與SOX2蛋白表達的相關性（例）
2.4 隨訪結束為DFS與非DFS患者的臨床病理特征比較結果
本研究80例患者均獲隨訪，隨訪時間4～57個月，中位隨訪時間為37.0個月，末次隨訪時間為2022年8月31日，隨訪結束達到DFS者42例，出現復發、轉移28例，死亡10例，將復發、轉移和死亡者歸為非DFS患者。隨訪結束為DFS與非DFS患者的臨床病理特征比較結果見表4。由表4可見：2組患者在組織學分級、TNM分期、腋窩淋巴結狀態、ALDH1蛋白及SOX2蛋白表達方面比較差異均有統計學意義（P<0.05）。將單因素分析有統計學意義的指標以及與臨床有關的特征指標納入logistic 回歸多因素分析，結果顯示，乳腺癌的腫瘤大小、組織學分級、TNM分期、腋窩淋巴結狀態以及ALDH1蛋白和SOX2蛋白的表達均與隨訪后達到DFS無關（P>0.05，這有可能受樣本數少及發生終點事件例數較少的影響所致）。具體見表5。
表4
DFS與非DFS患者臨床病理學特征比較結果［例（%） ］
表5
影響乳腺癌DFS的多因素logistic回歸分析結果
2.5 Kaplan-Meier生存分析
以ALDH1蛋白及SOX2蛋白是否陽性表達將乳腺癌患者分組，繪制Kaplan-Meier生存曲線，比較陽性表達和陰性表達患者的DFS率的差異。log-rank檢驗結果顯示：ALDH1蛋白陽性表達乳腺癌患者的累積DFS率低于陰性表達者，差異有統計學意義（χ2=15.637，P<0.05）；SOX2蛋白陽性表達乳腺癌患者的累積DFS率低于陰性表達者，差異有統計學意義（χ2=27.198，P<0.05）。具體見圖2。
圖2
示ALDH1（a）和SOX2（b）蛋白不同表達狀態乳腺癌患者的DFS曲線
3 討論
乳腺癌給女性的身心健康帶來嚴重危害[9]。誘發乳腺癌發生發展的因素有很多，包括遺傳因素、物理因素、不合理生活方式等[10]。ER、PR、HER2和Ki-67都是乳腺癌患者預測療效的重要臨床分子生物學標志物，隨著分子生物學技術的發展，乳腺癌的診治逐漸步入以分子分型為基礎的個體化治療模式[11]。盡管乳腺癌的治療方式多種多樣[12]，但其在全球范圍內的發生率及致死率仍逐年升高。因此，尋找乳腺癌治療新靶點及評估病情發展及預后標志物是至關重要的。
ALDH 超家族有19種同工酶，在不同組織中分布廣泛，在醛代謝中發揮關鍵的作用[13-14]，ALDH1作為ALDH家族之一，幾乎存在于所有哺乳動物組織，其負責將視黃醇氧化為視黃酸，從而參與調節細胞分化[15]。ALDH1被證實在多種腫瘤組織中均有不同程度的表達[16]， Yao等[17]的研究發現，ALDH1高表達與宮頸癌的不良預后密切相關； Wakamatsu等[18]的研究發現，在胃癌中ALDH1表達的增加與腫瘤浸潤深度及臨床分期呈正相關性，其表達在反映胃癌惡性程度及預后方面有一定的指導意義。最新研究[19]發現，ALDH1可通過調節乳腺腫瘤中的pH值，從而抑制免疫細胞應答，參與乳腺癌的不良生物學行為。 本研究對2017年9月至2019年9月期間南陽市中心醫院收治的乳腺癌患者的臨床病理資料進行分析，結果顯示，乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達陽性率為75.0%，高于癌旁組織的30.0%（P<0.05），其陽性表達與組織學分級、臨床分期及腋窩淋巴結狀態有關，與徐晶晶等[20]的研究結果一致，表明ALDH1的表達可能在乳腺癌發生發展中發揮重要作用，參與了癌變過程。
SOX2是SOX 家族中一個關鍵轉錄因子，屬于B1組，基因編碼 317個氨基酸的蛋白質[21]。有研究[22–24]表明，SOX2與多種腫瘤治療耐藥性和不良預后有關，沉默SOX2可以顯著抑制腫瘤細胞的生長和遷移[25]。 本研究結果顯示，SOX2蛋白在乳腺癌組織中呈現高表達，在乳腺癌組織及癌旁組織中的表達陽性率分別是62.5%及21.3%，差異具有統計學意義（P<0.05）；其陽性表達與臨床分期、組織學分級及腋窩淋巴結狀態相關，這與Yang等[26]的研究結果相符合，提示SOX2可能影響乳腺癌的發展進程。
本研究以ALDH1及SOX2是否陽性表達將乳腺癌患者分組，預后指標為DFS率，中位隨訪37.0個月。雖然多因素分析隨訪結束后ALDH1和SOX2蛋白表達陽性與陰性者DFS率差異無統計學意義，但生存分析log-rank檢驗結果顯示ALDH1和SOX2蛋白表達陰性患者的累積DFS率高于ALDH1和SOX2蛋白表達陽性患者（P<0.05），ALDH1和SOX2蛋白陰性表達者發生終點事件的時間更晚，而陽性者發生終點事件的時間更早。提示ALDH1和SOX2蛋白表達陽性乳腺癌患者預后較差。
乳腺癌干細胞（breast cancer stem cell，BCSCs）類似于胚胎干細胞，具有自我更新及多向分化的能力。 Ginestier等[27]在2007年首次鑒定ALDH1陽性表達乳腺癌細胞表現出腫瘤干細胞特性；而SOX2是BCSCs發展的關鍵轉錄因子[28]。大量研究[29–32]發現，SOX2通過多種信號通路參與乳腺癌細胞的增殖、侵襲、轉移。ALDH1及SOX2均作為BCSCs表達基因，在本研究中進一步分析發現ALDH1與SOX2表達成正相關性，這表明ALDH1及SOX2或許通過某種機制共同在乳腺癌的發生發展過程中發揮作用并影響預后。在臨床工作中，對于ALDH1和SOX2蛋白高表達患者應給予相應的關注。
綜上，ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中表達陽性率高，二者陽性表達與腫瘤組織學分級、臨床分期和腋窩淋巴結狀態有關。ALDH1與SOX2蛋白陽性表達呈正相關，表明二者可能共同在乳腺癌發生發展過程中發揮作用。多因素分析結果雖然表明ADH1和SOX2蛋白與乳腺癌預后無關，但生存曲線比較提示ALDH1和SOX2蛋白表達陽性乳腺癌患者預后較差。提示檢測乳腺癌患者中的ALDH1和SOX2蛋白表達對預后評估和治療有一定參考價值。
重要聲明
利益沖突聲明：本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明，我們沒有相互競爭的利益。
作者貢獻聲明：潘新月負責文獻收集和資料與數據的提取、分析及論文撰寫；張浩及王征負責論文選題、對文章的設計、撰寫和修改給予指導。
倫理聲明：本研究通過了南陽市中心醫院醫學倫理委員會的審批（批文編號：SDP-IRB-KYLW-031）。
目前乳腺癌為女性惡性腫瘤發病率第1位[1]，相關腫瘤生物學標志物、鉬靶、超聲、乳腺MRI等輔助檢查的應用，以及化療、放療、靶向治療、內分泌治療等輔助治療的應用，雖然極大地提高了乳腺癌患者的存活率，但治療后患者的復發率及死亡率依然較高[2]。乳腺癌在女性中占1/6的癌癥死亡病例，乳腺癌已經成為女性惡性腫瘤的主要死因[3]。乙醛脫氫酶1（aldehyde dehydrogenase 1，ALDH1）是胰腺癌、結腸癌、膀胱癌等多種腫瘤干細胞標志物[4]，ALDH1高表達與患者的不良預后顯著相關[5]。性別決定區Y框蛋白2（sex determining region Y-box 2，SOX2）作為SOX家族成員之一，能維持胚胎干細胞多能性，在腫瘤發生發展過程中發揮重要作用[6]。但是目前國內外關于ALDH1及SOX2在乳腺癌發生發展中的作用機制尚不清楚，兩者在乳腺癌組織中表達相關性的相關研究較少。本研究應用免疫組織化學（以下簡稱“免疫組化”）方法檢測ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中的表達情況，分析兩者的表達與乳腺癌患者臨床病理特征的相關性以及與患者預后的關系。
1 資料與方法
1.1 研究對象
收集2017年9月至2019年9月期間南陽市中心醫院收治的80例乳腺癌患者。入組標準：① 病理確診為乳腺惡性腫瘤；② 術前未接受輔助化療、內分泌治療等；③ 臨床資料完整；④ 年齡 >18歲。排除標準：① 患其他乳腺疾病如乳腺增生；② 合并其他系統惡性腫瘤如肺癌、卵巢癌；③ 合并心、肝、腎等嚴重原發疾病；④ 有遠處轉移。本研究經南陽市中心醫院醫學倫理委員會批準，受試者均簽署知情同意書。80例乳腺癌患者均為女性，年齡30～77歲，中位年齡51歲；組織學分級：Ⅰ ～ Ⅱ級34 例， Ⅲ級 46 例；TNM分期：Ⅰ ～ Ⅱ期 24例，Ⅲ ～ Ⅳ期56例；有淋巴結轉移57例。
1.2 檢測指標及方法
免疫組化方法檢測乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1及SOX2蛋白表達情況。取80例乳腺癌患者的癌組織及其癌旁組織標本，常規經10%中性甲醛液固定，石蠟包埋、連續切片，厚為3 μm。 常規脫蠟，高壓修復，磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）沖洗后滴加一抗（即用型兔抗人SOX2單克隆抗體、ALDH1單抗），4 ℃過夜后PBS沖洗，滴加二抗（酶標羊抗鼠/兔聚合物），行二氨基聯苯胺顯色，蘇木精復染，脫水、透明后中性樹膠封片，顯微鏡下觀察著色情況。陽性對照為已知陽性病理組織切片，陰性對照為PBS代替一抗。 抗-ALDH1抗體和抗-SOX2抗體分別購自Bioss生物科技有限公司及鄭州賽諾特生物技術有限公司，抗-SOX2抗體采用即用型工作液，抗-ALDH1抗體采用濃縮型抗體1∶300倍稀釋。
1.3 結果判讀
① 年齡根據中位年齡結合多項研究中的報道，將50歲作為年齡的截斷值；② 腫瘤大小指腫瘤最大徑，根據美國腫瘤聯合會乳腺癌T分期標準及多項研究，將2 cm作為腫瘤大小的截斷值；③ Ki-67表達狀態采用免疫組化方法評估，Ki-67 增殖指數 ≤30%為低表達，反之為高表達。ALDH1和 SOX2蛋白主要表達于細胞質[7-8]，以細胞質中出現棕黃色或黃色顆粒為陽性表達。采用半定量積分法，根據染色強度（未著色0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分）及陽性細胞所占比例（陰性為0分，陽性細胞占比 ≤25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，≥76%為4分）綜合評分，兩項評分相加，<3分為陰性，≥3分為陽性。
1.4 隨訪方法
從患者確診當日起，通過電話隨訪及門診復診，以隨訪結束是否系無病生存（disease free survival，DFS）為結局指標。終點事件為患者出現復發、轉移或死亡。隨訪截止時間為2022年8月31日。中位隨訪時間為37.0個月，無失訪病例。
1.5 統計學方法
應用SPSS 26.0行統計學分析。計數資料以例數表示，組間比較用成組卡方或配對卡方檢驗，等級資料組間比較用秩和檢驗。通過二分類 logistic 回歸分析隨訪后達到DFS的影響因素。采用Spearman秩相關性分析ALDH1與SOX2蛋白表達的相關性。采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線 ，log-rank檢驗分析生存曲線差異。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1和SOX2蛋白表達檢測結果
乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1和SOX2蛋白表達的免疫組化檢測結果見圖1。ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中的表達陽性率均高于其在癌旁組織中的表達陽性率（P<0.05），具體見表1。
圖1
示乳腺癌組織中ALDH1（a）和SOX2（b）蛋白陽性表達及癌旁組織中ALDH1（c）和SOX2（d）蛋白陽性表達（免疫組化染色 ×40）
表1
乳腺癌組織及其癌旁組織中ALDH1和SOX2蛋白表達檢測結果［例（%） ］
2.2 乳腺癌組織中ALDH1和SOX2蛋白表達與患者臨床病理特征的關系
乳腺癌組織中ALDH1和SOX2蛋白的表達與患者的年齡、腫瘤大小、人表皮生長因子激素受體2（human epidermal growth factor hormone receptor 2，HER2）、Ki-67、雌激素受體（estrogen receptor，ER）及孕激素受體（progesterone receptor，PR）狀態均無關（P>0.05），與腫瘤組織學分級、TNM分期及腋窩淋巴結狀態有關（P<0.05）。具體見表2。
表2
乳腺癌組織中ALDH1和SOX2蛋白表達與患者臨床病理特征的關系［例（%） ］
2.3 乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達與SOX2蛋白表達的相關性
乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達與SOX2蛋白表達呈正相關（rs=0.507，P<0.001）。具體見表3。
表3
乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達與SOX2蛋白表達的相關性（例）
2.4 隨訪結束為DFS與非DFS患者的臨床病理特征比較結果
本研究80例患者均獲隨訪，隨訪時間4～57個月，中位隨訪時間為37.0個月，末次隨訪時間為2022年8月31日，隨訪結束達到DFS者42例，出現復發、轉移28例，死亡10例，將復發、轉移和死亡者歸為非DFS患者。隨訪結束為DFS與非DFS患者的臨床病理特征比較結果見表4。由表4可見：2組患者在組織學分級、TNM分期、腋窩淋巴結狀態、ALDH1蛋白及SOX2蛋白表達方面比較差異均有統計學意義（P<0.05）。將單因素分析有統計學意義的指標以及與臨床有關的特征指標納入logistic 回歸多因素分析，結果顯示，乳腺癌的腫瘤大小、組織學分級、TNM分期、腋窩淋巴結狀態以及ALDH1蛋白和SOX2蛋白的表達均與隨訪后達到DFS無關（P>0.05，這有可能受樣本數少及發生終點事件例數較少的影響所致）。具體見表5。
表4
DFS與非DFS患者臨床病理學特征比較結果［例（%） ］
表5
影響乳腺癌DFS的多因素logistic回歸分析結果
2.5 Kaplan-Meier生存分析
以ALDH1蛋白及SOX2蛋白是否陽性表達將乳腺癌患者分組，繪制Kaplan-Meier生存曲線，比較陽性表達和陰性表達患者的DFS率的差異。log-rank檢驗結果顯示：ALDH1蛋白陽性表達乳腺癌患者的累積DFS率低于陰性表達者，差異有統計學意義（χ2=15.637，P<0.05）；SOX2蛋白陽性表達乳腺癌患者的累積DFS率低于陰性表達者，差異有統計學意義（χ2=27.198，P<0.05）。具體見圖2。
圖2
示ALDH1（a）和SOX2（b）蛋白不同表達狀態乳腺癌患者的DFS曲線
3 討論
乳腺癌給女性的身心健康帶來嚴重危害[9]。誘發乳腺癌發生發展的因素有很多，包括遺傳因素、物理因素、不合理生活方式等[10]。ER、PR、HER2和Ki-67都是乳腺癌患者預測療效的重要臨床分子生物學標志物，隨著分子生物學技術的發展，乳腺癌的診治逐漸步入以分子分型為基礎的個體化治療模式[11]。盡管乳腺癌的治療方式多種多樣[12]，但其在全球范圍內的發生率及致死率仍逐年升高。因此，尋找乳腺癌治療新靶點及評估病情發展及預后標志物是至關重要的。
ALDH 超家族有19種同工酶，在不同組織中分布廣泛，在醛代謝中發揮關鍵的作用[13-14]，ALDH1作為ALDH家族之一，幾乎存在于所有哺乳動物組織，其負責將視黃醇氧化為視黃酸，從而參與調節細胞分化[15]。ALDH1被證實在多種腫瘤組織中均有不同程度的表達[16]， Yao等[17]的研究發現，ALDH1高表達與宮頸癌的不良預后密切相關； Wakamatsu等[18]的研究發現，在胃癌中ALDH1表達的增加與腫瘤浸潤深度及臨床分期呈正相關性，其表達在反映胃癌惡性程度及預后方面有一定的指導意義。最新研究[19]發現，ALDH1可通過調節乳腺腫瘤中的pH值，從而抑制免疫細胞應答，參與乳腺癌的不良生物學行為。 本研究對2017年9月至2019年9月期間南陽市中心醫院收治的乳腺癌患者的臨床病理資料進行分析，結果顯示，乳腺癌組織中ALDH1蛋白表達陽性率為75.0%，高于癌旁組織的30.0%（P<0.05），其陽性表達與組織學分級、臨床分期及腋窩淋巴結狀態有關，與徐晶晶等[20]的研究結果一致，表明ALDH1的表達可能在乳腺癌發生發展中發揮重要作用，參與了癌變過程。
SOX2是SOX 家族中一個關鍵轉錄因子，屬于B1組，基因編碼 317個氨基酸的蛋白質[21]。有研究[22–24]表明，SOX2與多種腫瘤治療耐藥性和不良預后有關，沉默SOX2可以顯著抑制腫瘤細胞的生長和遷移[25]。 本研究結果顯示，SOX2蛋白在乳腺癌組織中呈現高表達，在乳腺癌組織及癌旁組織中的表達陽性率分別是62.5%及21.3%，差異具有統計學意義（P<0.05）；其陽性表達與臨床分期、組織學分級及腋窩淋巴結狀態相關，這與Yang等[26]的研究結果相符合，提示SOX2可能影響乳腺癌的發展進程。
本研究以ALDH1及SOX2是否陽性表達將乳腺癌患者分組，預后指標為DFS率，中位隨訪37.0個月。雖然多因素分析隨訪結束后ALDH1和SOX2蛋白表達陽性與陰性者DFS率差異無統計學意義，但生存分析log-rank檢驗結果顯示ALDH1和SOX2蛋白表達陰性患者的累積DFS率高于ALDH1和SOX2蛋白表達陽性患者（P<0.05），ALDH1和SOX2蛋白陰性表達者發生終點事件的時間更晚，而陽性者發生終點事件的時間更早。提示ALDH1和SOX2蛋白表達陽性乳腺癌患者預后較差。
乳腺癌干細胞（breast cancer stem cell，BCSCs）類似于胚胎干細胞，具有自我更新及多向分化的能力。 Ginestier等[27]在2007年首次鑒定ALDH1陽性表達乳腺癌細胞表現出腫瘤干細胞特性；而SOX2是BCSCs發展的關鍵轉錄因子[28]。大量研究[29–32]發現，SOX2通過多種信號通路參與乳腺癌細胞的增殖、侵襲、轉移。ALDH1及SOX2均作為BCSCs表達基因，在本研究中進一步分析發現ALDH1與SOX2表達成正相關性，這表明ALDH1及SOX2或許通過某種機制共同在乳腺癌的發生發展過程中發揮作用并影響預后。在臨床工作中，對于ALDH1和SOX2蛋白高表達患者應給予相應的關注。
綜上，ALDH1和SOX2蛋白在乳腺癌組織中表達陽性率高，二者陽性表達與腫瘤組織學分級、臨床分期和腋窩淋巴結狀態有關。ALDH1與SOX2蛋白陽性表達呈正相關，表明二者可能共同在乳腺癌發生發展過程中發揮作用。多因素分析結果雖然表明ADH1和SOX2蛋白與乳腺癌預后無關，但生存曲線比較提示ALDH1和SOX2蛋白表達陽性乳腺癌患者預后較差。提示檢測乳腺癌患者中的ALDH1和SOX2蛋白表達對預后評估和治療有一定參考價值。
重要聲明
利益沖突聲明：本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明，我們沒有相互競爭的利益。
作者貢獻聲明：潘新月負責文獻收集和資料與數據的提取、分析及論文撰寫；張浩及王征負責論文選題、對文章的設計、撰寫和修改給予指導。
倫理聲明：本研究通過了南陽市中心醫院醫學倫理委員會的審批（批文編號：SDP-IRB-KYLW-031）。
