引用本文： 趙團結, 蘇悅, 張志亮, 任春成, 劉連成, 齊順利, 陳希琳, 張玉茹. 血漿Septin9甲基化對結直腸癌術后復發/轉移監測的價值. 中國普外基礎與臨床雜志, 2022, 29(6): 743-747. doi: 10.7507/1007-9424.202108093 復制
我國結直腸癌的發病率和病死率均呈上升趨勢，發病率城市地區遠高于農村，且結腸癌的發病率上升顯著，多數患者發現時已屬于中晚期[1]；而術后30% 的Ⅰ ～Ⅲ期患者和高達65%的Ⅳ期結直腸癌患者會出現復發或轉移[2]。因此，有效的早期篩查、診斷以及復發監測是結直腸癌防治的關鍵。結腸鏡檢查和內鏡活檢作為結直腸癌診斷的金標準，具有較高的敏感度和特異度，但很多患者由于恐懼而抵制檢查。血清學腫瘤標志物也是臨床篩查和診斷的常見手段，然而，目前仍缺乏用于結直腸癌術后監測的敏感且特異的腫瘤標志物。血清癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是美國國家癌癥綜合網（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）推薦用于術后監測結直腸癌的唯一標志物，然而，它的敏感度和特異度并不理想[3]。因此，臨床上迫切需要尋找更敏感、更特異的術后監測指標。
目前較為公認的結直腸癌變學說是“腺瘤–異型增生–癌變” ；基因甲基化在結直腸癌的發生發展中發揮重要作用[4]，Septin9基因甲基化（methylated Septin9，mSEPT9）已被證實與結直腸癌的發生、發展密切相關[5]，mSEPT9對于結直腸癌的檢出率與患者性別、年齡[6]和腫瘤部位[7]無關，更具穩定性。研究[5]發現：mSEPT9水平預測結直腸癌患者術后復發時間比CEA提前2.5個月；治療后1年內復發的結直腸癌患者mSEPT9水平明顯增高；低mSEPT9水平患者術后5年無疾病生存率較高。但mSEPT9在監測結直腸癌治療效果、復發/轉移中的作用，目前缺乏大數據的文獻報道。
本研究擬納入術前病理學檢查確診為結直腸腺癌且血漿mSEPT9檢測為陽性的結直腸癌患者，并于術后1周復查mSEPT9，將其中mSEPT9仍為陽性的患者作為觀察對象（定義為mSEPT9陽性組），mSEPT9轉陰患者作為對照（定義為mSEPT9轉陰組），術后隨訪，觀察2組患者的腫瘤復發/轉移情況，以評估mSEPT9在預測腫瘤復發/轉移中的價值。
1 資料和方法
1.1 研究對象和入組標準
1.1.1 病例納入及排除標準
納入標準：① 患者首次治療為手術根治性切除；② 既往未接受過化學治療、放射治療等其他治療；③ 術后病理學檢查診斷為結直腸腺癌；④ 術前mSEPT9檢測為陽性；⑤ 資料完整者。排除標準：① 術前接受過化學治療、放射治療或其他抗腫瘤治療者；② 術后病理學檢查診斷為其他來源腫瘤者；③ 患有其他系統惡性腫瘤或免疫系統疾病者；④ 資料不全者。本研究已通過北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）醫學倫理委員會的審批（批文編號：2020ELLHA-002-01），所有受試者均知情并簽署知情同意書。
1.1.2 研究對象
根據上述納入及排除標準選取2020年1–12月期間于北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）行手術治療的結直腸癌患者，術后1周復查mSEPT9，其中mSEPT9仍為陽性者納入mSEPT9陽性組，mSEPT9轉陰者納入mSEPT9轉陰組。
1.2 檢測指標及方法
1.2.1 mSEPT9水平檢測方法
于術前3 d取空腹靜脈血10 mL，全血離心（2 800 r/min、12 min、r=15 cm），取血漿再次離心（離心速度、時間及離心半徑同上），用Septin9基因甲基化檢測試劑盒 ［博爾誠（北京）科技有限公司］ 及羅氏CObasZ480實時熒光定量PCR儀進行Bis-DNA測定，具體方法參照試劑盒說明。用對照樣品（模擬血漿）驗證PCR反應的有效性。當待檢測樣本內參照ACTB的Ct結果≤32.1，Septin9的Ct≤41.0時，mSEPT9檢測結果判為陽性；當待測樣本ACTB的Ct結果≤32.1，Septin9的Ct>41.0或無法檢出（Ct無顯示）時，mSEPT9檢測結果判為陰性；若ACTB的Ct結果大于32.1，說明本次結果無效[8-9]。
1.2.2 CEA檢測
術前3 d取空腹靜脈血4 mL，離心（3 000 r/min、10 min、r=10 cm）后取血清，由北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）檢驗科采用放射免疫熒光法進行測定。CEA>5 ng/mL判定為陽性。
1.3 手術
所有患者均根據腫瘤具體部位，遵循腹腔鏡結直腸癌根治手術操作指南（2018版）標準[10]，行根治性右半結腸切除、橫結腸切除、左半結腸切除、乙狀結腸切除或直腸全系膜切除術。術后根據患者病理學檢查結果，若需后續治療，則按照NCCN指南[11]進行治療。
1.4 隨訪
術后采用門診或電話隨訪，其中病史和體格檢查及CEA監測，每3個月1次；mSEPT9、結腸鏡、胸腹/盆CT或MRI，每半年1次。主要觀察指標：mSEPT9結果，結直腸癌復發、轉移（肝轉移、肺轉移、骨轉移、神經系統轉移、腹膜轉移或其他部位轉移）；次要觀察指標：術后TNM分期、術前及術后CEA。如術后１年內死亡即結束隨訪。隨訪截止時間為2021年6月31日。
1.5 統計學方法
本研究的所有數據均采用SPSS 20.0軟件進行分析。本研究的計量資料（隨訪時間）采用P-P圖法分析不符合正態分布，故以中位數表示；計數資料采用“例（%）”表示，行成組或配對χ2檢驗（如果所有的理論數T≥5，用Pearson卡方檢驗；如果理論數1≤T<5，用連續性校正的卡方檢驗；如果有理論數T<1，則用Fisher精確檢驗）。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 基本資料
2020年筆者所在醫院共計手術且術后病理學檢查確診為結直腸癌的患者113例，術前mSEPT9陽性者76例，陽性率為67.3%，CEA陽性者31例，其陽性率為27.4%，前者高于后者，其差異有統計學意義（χ2=2.003，P<0.001）。術后1周復查： mSEPT9仍陽性者19例，轉陰者57例，術后mSEPT9轉陰率為75.0%；CEA仍陽性者10例，轉陰者21例，術后轉陰率為67.7%。 兩項指標轉陰率的差異無統計學意義（χ2=0.154，P=0.093）。
2.2 mSEPT9與結直腸癌臨床病理特征的相關性
對2組結直腸癌患者的臨床病理資料與mSEPT9的相關性進行分析，結果見表1。由表1可見，術后mSEPT9陽性組73.7%（14/19）的患者存在淋巴結轉移，而術后mSEPT9轉陰組43.9%（25/57）的患者存在淋巴結轉移，其差異有統計學意義（P=0.024）；在脈管/神經侵犯方面，術后mSEPT9陽性組42.1%（8/19）的患者存在脈管/神經侵犯，術后mSEPT9轉陰組14.0%（8/57）的患者存在脈管/神經侵犯，其差異有統計學意義（P=0.009）；在臨床分期方面，術后mSEPT9陽性組73.7%（14/19）的患者分期較晚（Ⅲ期和Ⅳ期），術后mSEPT9轉陰組35.1%（20/57）分期較晚（Ⅲ期和Ⅳ期），其差異有統計學意義（P=0.007）。但2組患者在年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤分化程度和腫瘤浸潤深度（T分期）方面的差異無統計學意義（P>0.05）。
表1
術后血漿mSEPT9不同狀態與結直腸癌臨床病理特征的相關性分析結果（例）
2.3 術后6個月mSEPT9表達情況
2組患者于術后6個月時復查mSEPT9，其中mSEPT9陽性組有13例患者的mSEPT9轉為了陰性，6例患者仍為陽性，陽性率降低到31.6%，與術后1周比較，其差異有統計學意義（χ2=25.125，P<0.001）。術后mSEPT9轉陰組mSEPT9仍均為陰性，未見轉為陽性者。
2.4 2組患者術后復發/轉移情況
2組患者術后均進行門診或電話隨訪，隨訪時間為6～18個月，中位隨訪時間13個月，未見死亡病例。其中mSEPT9陽性組有2例（10.5%）患者出現肝轉移，1例為術后3個月發現肝臟單發轉移灶，經化學治療后腫瘤縮小，再行射頻消融治療后轉移灶消失；1例患者為術后7個月發現肝臟多發轉移灶，目前正在接收化學治療加靶向治療和隨訪中。該2例患者術后mSEPT9一直持續陽性。mSEPT9陽性組未發現其他部位轉移患者，也未見腫瘤復發患者。mSEPT9轉陰組未見腫瘤復發/轉移。2組患者在術后腫瘤復發/轉移方面比較其差異有統計學意義（χ2=5.710，P=0.017）。
3 討論
結直腸癌的發生發展是一個復雜過程，涉及多個因素的共同作用，多種表觀遺傳學改變參與其中。 研究[4]表明，結直腸癌的發生發展與基因的甲基化密切相關，其中以Septin9基因甲基化最為典型。Septin9基因及其表達產物廣泛參與人體各項生理活動，起到了抑癌基因的作用。在結直腸癌的發生發展過程中，Septin9基因的甲基化抑制了Septin9的正常表達，導致其抑癌功能喪失，最終導致細胞過度分裂進而發生癌變。
在健康人或其他結直腸疾病中，外周血漿mSEPT9表達較低，而在結直腸癌患者中，mSEPT9為高表達[12]。因此，mSEPT9可能成為結直腸癌篩查、診斷和治療監測的候選標志物[5, 13-14]。甲基化的Septin 9測定法是美國FDA批準的第一個基于血液的用于結直腸癌篩查的檢測方法[14-15]。Xie等[16]研究認為，與CEA和糖類抗原199（carbohydrate antigen 199，CA199）相比，mSEPT9在結直腸癌檢測中表現出更佳的診斷能力。
Molnár等[15]研究發現，血漿mSEPT9在結直腸癌診斷中具有一定的意義。本研究結果顯示，結直腸癌患者中mSEPT9陽性者占比達到了67.3%，遠高于CEA的陽性率（27.4%），與相關文獻[16-21]報道結果相一致。此外，mSEPT9水平檢測僅需要抽取外周血，具有簡便、敏感度高等優點，患者依從性好，因此筆者認為mSEPT9可作為輔助診斷結直腸癌的指標。Hu等[22]研究發現，與白人相比，亞洲人的mSEPT9診斷敏感度更高，其表達與腫瘤分期有關，但與腫瘤位置無關。表明其在預測腫瘤惡性程度和病情進展方面具有一定的準確性，可以聯合術前其他輔助檢查，制定更有針對性的治療方案，更加適用于中國人群。Yang等[14]研究了國內300例結直腸癌患者，mSEPT9陽性與腫瘤分期、原發腫瘤的浸潤深度和遠處轉移密切相關。多個研究[5, 13-14, 23]發現，術后mSEPT9水平升高與更高的死亡率和轉移率有關。
常規結直腸癌手術療效多以創傷程度、恢復速度、術后生存時間等加以評價，而利用相關腫瘤標志物評價手術療效的研究很少。Song等[24]發現，結直腸癌患者術后1 d和7 d血漿mSEPT9平均水平分別下降57.6倍和131.1倍。 相比之下，術后1 d和7 d 的CEA平均水平下降了2.51和2.70倍。Fu 等[13]認為，在評估手術效果方面，血漿mSEPT9優于CEA。手術前后血漿mSEPT9水平的變化反映了根治性手術對結直腸癌患者的治療效果，術后（7～14 d內）血漿mSEPT9的持續陽性與即將（1年內）發生的復發/轉移高度相關，敏感度為100％。本研究結果顯示，結直腸癌患者手術根治性切除腫瘤后，血漿mSEPT9由陽性轉變為陰性的比率為75.0%，與其他研究結果[25]一致，提示血漿mSEPT9水平可能與結直腸癌患者的荷瘤狀態具有相關性，根治性切除后，大部分患者的mSEPT9可以下降到無法檢測到的水平，在監測結直腸癌患者術后復發/轉移方面具有與CEA相似的潛力。而且Tham等[5]研究表明，mSEPT9預測腫瘤復發/轉移的時間較CEA可提前2.5個月，但其預測作用及其特異度仍需進一步研究。本研究發現，與術后mSEPT9轉陰組比較， mSEPT9陽性組患者中，有淋巴結轉移者和有脈管/神經侵犯者的占比均較高；隨訪過程中有2例發生了肝轉移，而該2例患者在術后隨訪過程中mSEPT9持續為陽性，不除外2例患者術前即存在目前影像學尚無法發現的轉移灶的可能。祝志強[25]研究發現，術前存在遠處轉移患者姑息性原發腫瘤切除治療后mSEPT9轉陰率為0.0%，亦論證了此點。因此若術后患者的mSEPT9持續陽性，需要考慮該患者的預后較差，術后應加強監測，必要時應縮短檢查間隔時間，發現問題積極治療。
本研究以術前mSEPT9為陽性的患者為研究對象，對比術后mSEPT9轉陰與否2組患者術后腫瘤復發/轉移的發生率有無差異，結果表明，術后mSEPT9持續陽性的患者，復發/轉移的發生風險要高于mSEPT9轉陰的患者。但是本研究存在病例數量較少、隨訪時間偏短等問題，結論的說服力不足，需要后續研究中繼續增加病例數，延長隨訪時間，以得到更準確的結論。
綜上所述，血漿mSEPT9的檢測有可能成為結直腸癌的診斷和術后治療效果監測的指標，術后mSEPT9不轉陰的患者，發生復發/轉移的概率要遠高于mSEPT9轉陰的患者。對于術后mSEPT9仍為陽性的患者要予以重視，應加強監測，及時發現復發/轉移跡象并予以處理，以取得最佳的治療效果。
重要聲明
利益沖突聲明：本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明，我們沒有相互競爭的利益。
作者貢獻聲明：趙團結負責臨床試驗設計、觀察病例、收集數據、統計分析、論文撰寫與修改；蘇悅、任春成和張志亮負責組織標本及數據收集、統計分析；劉連成負責指導臨床試驗設計、論文修改；齊順利和陳希琳負責臨床試驗設計指導、mSEPT9檢測及數據收集；張玉茹負責臨床試驗設計指導、數據及統計分析結果審核、論文修改。
倫理聲明：本研究通過了北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）醫學倫理委員會的審批（批文編號：2020ELLHA-002-01）。
我國結直腸癌的發病率和病死率均呈上升趨勢，發病率城市地區遠高于農村，且結腸癌的發病率上升顯著，多數患者發現時已屬于中晚期[1]；而術后30% 的Ⅰ ～Ⅲ期患者和高達65%的Ⅳ期結直腸癌患者會出現復發或轉移[2]。因此，有效的早期篩查、診斷以及復發監測是結直腸癌防治的關鍵。結腸鏡檢查和內鏡活檢作為結直腸癌診斷的金標準，具有較高的敏感度和特異度，但很多患者由于恐懼而抵制檢查。血清學腫瘤標志物也是臨床篩查和診斷的常見手段，然而，目前仍缺乏用于結直腸癌術后監測的敏感且特異的腫瘤標志物。血清癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是美國國家癌癥綜合網（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）推薦用于術后監測結直腸癌的唯一標志物，然而，它的敏感度和特異度并不理想[3]。因此，臨床上迫切需要尋找更敏感、更特異的術后監測指標。
目前較為公認的結直腸癌變學說是“腺瘤–異型增生–癌變” ；基因甲基化在結直腸癌的發生發展中發揮重要作用[4]，Septin9基因甲基化（methylated Septin9，mSEPT9）已被證實與結直腸癌的發生、發展密切相關[5]，mSEPT9對于結直腸癌的檢出率與患者性別、年齡[6]和腫瘤部位[7]無關，更具穩定性。研究[5]發現：mSEPT9水平預測結直腸癌患者術后復發時間比CEA提前2.5個月；治療后1年內復發的結直腸癌患者mSEPT9水平明顯增高；低mSEPT9水平患者術后5年無疾病生存率較高。但mSEPT9在監測結直腸癌治療效果、復發/轉移中的作用，目前缺乏大數據的文獻報道。
本研究擬納入術前病理學檢查確診為結直腸腺癌且血漿mSEPT9檢測為陽性的結直腸癌患者，并于術后1周復查mSEPT9，將其中mSEPT9仍為陽性的患者作為觀察對象（定義為mSEPT9陽性組），mSEPT9轉陰患者作為對照（定義為mSEPT9轉陰組），術后隨訪，觀察2組患者的腫瘤復發/轉移情況，以評估mSEPT9在預測腫瘤復發/轉移中的價值。
1 資料和方法
1.1 研究對象和入組標準
1.1.1 病例納入及排除標準
納入標準：① 患者首次治療為手術根治性切除；② 既往未接受過化學治療、放射治療等其他治療；③ 術后病理學檢查診斷為結直腸腺癌；④ 術前mSEPT9檢測為陽性；⑤ 資料完整者。排除標準：① 術前接受過化學治療、放射治療或其他抗腫瘤治療者；② 術后病理學檢查診斷為其他來源腫瘤者；③ 患有其他系統惡性腫瘤或免疫系統疾病者；④ 資料不全者。本研究已通過北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）醫學倫理委員會的審批（批文編號：2020ELLHA-002-01），所有受試者均知情并簽署知情同意書。
1.1.2 研究對象
根據上述納入及排除標準選取2020年1–12月期間于北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）行手術治療的結直腸癌患者，術后1周復查mSEPT9，其中mSEPT9仍為陽性者納入mSEPT9陽性組，mSEPT9轉陰者納入mSEPT9轉陰組。
1.2 檢測指標及方法
1.2.1 mSEPT9水平檢測方法
于術前3 d取空腹靜脈血10 mL，全血離心（2 800 r/min、12 min、r=15 cm），取血漿再次離心（離心速度、時間及離心半徑同上），用Septin9基因甲基化檢測試劑盒 ［博爾誠（北京）科技有限公司］ 及羅氏CObasZ480實時熒光定量PCR儀進行Bis-DNA測定，具體方法參照試劑盒說明。用對照樣品（模擬血漿）驗證PCR反應的有效性。當待檢測樣本內參照ACTB的Ct結果≤32.1，Septin9的Ct≤41.0時，mSEPT9檢測結果判為陽性；當待測樣本ACTB的Ct結果≤32.1，Septin9的Ct>41.0或無法檢出（Ct無顯示）時，mSEPT9檢測結果判為陰性；若ACTB的Ct結果大于32.1，說明本次結果無效[8-9]。
1.2.2 CEA檢測
術前3 d取空腹靜脈血4 mL，離心（3 000 r/min、10 min、r=10 cm）后取血清，由北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）檢驗科采用放射免疫熒光法進行測定。CEA>5 ng/mL判定為陽性。
1.3 手術
所有患者均根據腫瘤具體部位，遵循腹腔鏡結直腸癌根治手術操作指南（2018版）標準[10]，行根治性右半結腸切除、橫結腸切除、左半結腸切除、乙狀結腸切除或直腸全系膜切除術。術后根據患者病理學檢查結果，若需后續治療，則按照NCCN指南[11]進行治療。
1.4 隨訪
術后采用門診或電話隨訪，其中病史和體格檢查及CEA監測，每3個月1次；mSEPT9、結腸鏡、胸腹/盆CT或MRI，每半年1次。主要觀察指標：mSEPT9結果，結直腸癌復發、轉移（肝轉移、肺轉移、骨轉移、神經系統轉移、腹膜轉移或其他部位轉移）；次要觀察指標：術后TNM分期、術前及術后CEA。如術后１年內死亡即結束隨訪。隨訪截止時間為2021年6月31日。
1.5 統計學方法
本研究的所有數據均采用SPSS 20.0軟件進行分析。本研究的計量資料（隨訪時間）采用P-P圖法分析不符合正態分布，故以中位數表示；計數資料采用“例（%）”表示，行成組或配對χ2檢驗（如果所有的理論數T≥5，用Pearson卡方檢驗；如果理論數1≤T<5，用連續性校正的卡方檢驗；如果有理論數T<1，則用Fisher精確檢驗）。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 基本資料
2020年筆者所在醫院共計手術且術后病理學檢查確診為結直腸癌的患者113例，術前mSEPT9陽性者76例，陽性率為67.3%，CEA陽性者31例，其陽性率為27.4%，前者高于后者，其差異有統計學意義（χ2=2.003，P<0.001）。術后1周復查： mSEPT9仍陽性者19例，轉陰者57例，術后mSEPT9轉陰率為75.0%；CEA仍陽性者10例，轉陰者21例，術后轉陰率為67.7%。 兩項指標轉陰率的差異無統計學意義（χ2=0.154，P=0.093）。
2.2 mSEPT9與結直腸癌臨床病理特征的相關性
對2組結直腸癌患者的臨床病理資料與mSEPT9的相關性進行分析，結果見表1。由表1可見，術后mSEPT9陽性組73.7%（14/19）的患者存在淋巴結轉移，而術后mSEPT9轉陰組43.9%（25/57）的患者存在淋巴結轉移，其差異有統計學意義（P=0.024）；在脈管/神經侵犯方面，術后mSEPT9陽性組42.1%（8/19）的患者存在脈管/神經侵犯，術后mSEPT9轉陰組14.0%（8/57）的患者存在脈管/神經侵犯，其差異有統計學意義（P=0.009）；在臨床分期方面，術后mSEPT9陽性組73.7%（14/19）的患者分期較晚（Ⅲ期和Ⅳ期），術后mSEPT9轉陰組35.1%（20/57）分期較晚（Ⅲ期和Ⅳ期），其差異有統計學意義（P=0.007）。但2組患者在年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤分化程度和腫瘤浸潤深度（T分期）方面的差異無統計學意義（P>0.05）。
表1
術后血漿mSEPT9不同狀態與結直腸癌臨床病理特征的相關性分析結果（例）
2.3 術后6個月mSEPT9表達情況
2組患者于術后6個月時復查mSEPT9，其中mSEPT9陽性組有13例患者的mSEPT9轉為了陰性，6例患者仍為陽性，陽性率降低到31.6%，與術后1周比較，其差異有統計學意義（χ2=25.125，P<0.001）。術后mSEPT9轉陰組mSEPT9仍均為陰性，未見轉為陽性者。
2.4 2組患者術后復發/轉移情況
2組患者術后均進行門診或電話隨訪，隨訪時間為6～18個月，中位隨訪時間13個月，未見死亡病例。其中mSEPT9陽性組有2例（10.5%）患者出現肝轉移，1例為術后3個月發現肝臟單發轉移灶，經化學治療后腫瘤縮小，再行射頻消融治療后轉移灶消失；1例患者為術后7個月發現肝臟多發轉移灶，目前正在接收化學治療加靶向治療和隨訪中。該2例患者術后mSEPT9一直持續陽性。mSEPT9陽性組未發現其他部位轉移患者，也未見腫瘤復發患者。mSEPT9轉陰組未見腫瘤復發/轉移。2組患者在術后腫瘤復發/轉移方面比較其差異有統計學意義（χ2=5.710，P=0.017）。
3 討論
結直腸癌的發生發展是一個復雜過程，涉及多個因素的共同作用，多種表觀遺傳學改變參與其中。 研究[4]表明，結直腸癌的發生發展與基因的甲基化密切相關，其中以Septin9基因甲基化最為典型。Septin9基因及其表達產物廣泛參與人體各項生理活動，起到了抑癌基因的作用。在結直腸癌的發生發展過程中，Septin9基因的甲基化抑制了Septin9的正常表達，導致其抑癌功能喪失，最終導致細胞過度分裂進而發生癌變。
在健康人或其他結直腸疾病中，外周血漿mSEPT9表達較低，而在結直腸癌患者中，mSEPT9為高表達[12]。因此，mSEPT9可能成為結直腸癌篩查、診斷和治療監測的候選標志物[5, 13-14]。甲基化的Septin 9測定法是美國FDA批準的第一個基于血液的用于結直腸癌篩查的檢測方法[14-15]。Xie等[16]研究認為，與CEA和糖類抗原199（carbohydrate antigen 199，CA199）相比，mSEPT9在結直腸癌檢測中表現出更佳的診斷能力。
Molnár等[15]研究發現，血漿mSEPT9在結直腸癌診斷中具有一定的意義。本研究結果顯示，結直腸癌患者中mSEPT9陽性者占比達到了67.3%，遠高于CEA的陽性率（27.4%），與相關文獻[16-21]報道結果相一致。此外，mSEPT9水平檢測僅需要抽取外周血，具有簡便、敏感度高等優點，患者依從性好，因此筆者認為mSEPT9可作為輔助診斷結直腸癌的指標。Hu等[22]研究發現，與白人相比，亞洲人的mSEPT9診斷敏感度更高，其表達與腫瘤分期有關，但與腫瘤位置無關。表明其在預測腫瘤惡性程度和病情進展方面具有一定的準確性，可以聯合術前其他輔助檢查，制定更有針對性的治療方案，更加適用于中國人群。Yang等[14]研究了國內300例結直腸癌患者，mSEPT9陽性與腫瘤分期、原發腫瘤的浸潤深度和遠處轉移密切相關。多個研究[5, 13-14, 23]發現，術后mSEPT9水平升高與更高的死亡率和轉移率有關。
常規結直腸癌手術療效多以創傷程度、恢復速度、術后生存時間等加以評價，而利用相關腫瘤標志物評價手術療效的研究很少。Song等[24]發現，結直腸癌患者術后1 d和7 d血漿mSEPT9平均水平分別下降57.6倍和131.1倍。 相比之下，術后1 d和7 d 的CEA平均水平下降了2.51和2.70倍。Fu 等[13]認為，在評估手術效果方面，血漿mSEPT9優于CEA。手術前后血漿mSEPT9水平的變化反映了根治性手術對結直腸癌患者的治療效果，術后（7～14 d內）血漿mSEPT9的持續陽性與即將（1年內）發生的復發/轉移高度相關，敏感度為100％。本研究結果顯示，結直腸癌患者手術根治性切除腫瘤后，血漿mSEPT9由陽性轉變為陰性的比率為75.0%，與其他研究結果[25]一致，提示血漿mSEPT9水平可能與結直腸癌患者的荷瘤狀態具有相關性，根治性切除后，大部分患者的mSEPT9可以下降到無法檢測到的水平，在監測結直腸癌患者術后復發/轉移方面具有與CEA相似的潛力。而且Tham等[5]研究表明，mSEPT9預測腫瘤復發/轉移的時間較CEA可提前2.5個月，但其預測作用及其特異度仍需進一步研究。本研究發現，與術后mSEPT9轉陰組比較， mSEPT9陽性組患者中，有淋巴結轉移者和有脈管/神經侵犯者的占比均較高；隨訪過程中有2例發生了肝轉移，而該2例患者在術后隨訪過程中mSEPT9持續為陽性，不除外2例患者術前即存在目前影像學尚無法發現的轉移灶的可能。祝志強[25]研究發現，術前存在遠處轉移患者姑息性原發腫瘤切除治療后mSEPT9轉陰率為0.0%，亦論證了此點。因此若術后患者的mSEPT9持續陽性，需要考慮該患者的預后較差，術后應加強監測，必要時應縮短檢查間隔時間，發現問題積極治療。
本研究以術前mSEPT9為陽性的患者為研究對象，對比術后mSEPT9轉陰與否2組患者術后腫瘤復發/轉移的發生率有無差異，結果表明，術后mSEPT9持續陽性的患者，復發/轉移的發生風險要高于mSEPT9轉陰的患者。但是本研究存在病例數量較少、隨訪時間偏短等問題，結論的說服力不足，需要后續研究中繼續增加病例數，延長隨訪時間，以得到更準確的結論。
綜上所述，血漿mSEPT9的檢測有可能成為結直腸癌的診斷和術后治療效果監測的指標，術后mSEPT9不轉陰的患者，發生復發/轉移的概率要遠高于mSEPT9轉陰的患者。對于術后mSEPT9仍為陽性的患者要予以重視，應加強監測，及時發現復發/轉移跡象并予以處理，以取得最佳的治療效果。
重要聲明
利益沖突聲明：本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明，我們沒有相互競爭的利益。
作者貢獻聲明：趙團結負責臨床試驗設計、觀察病例、收集數據、統計分析、論文撰寫與修改；蘇悅、任春成和張志亮負責組織標本及數據收集、統計分析；劉連成負責指導臨床試驗設計、論文修改；齊順利和陳希琳負責臨床試驗設計指導、mSEPT9檢測及數據收集；張玉茹負責臨床試驗設計指導、數據及統計分析結果審核、論文修改。
倫理聲明：本研究通過了北京市肛腸醫院（北京市二龍路醫院）醫學倫理委員會的審批（批文編號：2020ELLHA-002-01）。
