引用本文: 呼秀峰, 曲智鋒, 王玉峰, 朱小娟. 長鏈非編碼RNA DSCR8在胃癌中的表達及其與臨床病理特征和預后的關系. 中國普外基礎與臨床雜志, 2021, 28(10): 1314-1319. doi: 10.7507/1007-9424.202101027 復制
胃癌是消化系統最常見的惡性腫瘤之一,也是世界上導致腫瘤相關死亡的重要疾病[1]。胃癌發病率較高,腫瘤生長速度快,晚期患者預后較差,而腫瘤組織分化程度、淋巴結轉移等情況與患者疾病進展及預后密切相關[2-3]。胃癌的早期診斷、腫瘤生物學行為的明確及預后的正確判斷對患者選擇最佳治療方案十分重要。長鏈非編碼 RNA(long non-coding RNA,LncRNA)有方便快捷、敏感度、特異度高等優點,是各種腫瘤潛在的生物標志物[4]。唐氏綜合征關鍵區域 8(Down’s syndrome critical region 8,DSCR8)是唐氏綜合征關鍵區域轉錄的 lncRNA,在卵巢癌中表達失調,其可能是潛在的卵巢癌預后指標和治療靶標[5]。Ualcan 數據庫可檢索到 LncRNA DSCR8 在胃癌患者中異常表達,但目前關于其研究的相關文獻較少。故本研究擬通過檢測胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 表達情況,探討其與胃癌患者臨床病理特征及預后的相關性,以期為胃癌的病情評價和預后評估提供一定的理論依據。
1 資料與方法
1.1 研究對象
選取 2014 年 8 月至 2015 年 8 月期間在筆者所在醫院住院治療的 86 例胃癌患者作為研究對象,患者年齡 47~86 歲,中位年齡 60.5 歲;男 38 例,女 48 例。研究病例納入標準:① 符合 2018 年國家衛生健康委員會發布且實施的胃癌診療規范[6],經胃鏡及組織病理學檢查確診,并行腹腔鏡胃癌根治術治療;② 患者臨床資料齊全,通過了河南科技大學第一附屬醫院科學研究倫理委員會的審批,患者或家屬自愿參加;③ 此前未進行化療、放療及其他抗腫瘤治療者;④ 無其他消化系統疾病者。排除標準:① 有胃鏡檢查禁忌者;② 有全身感染性疾病史者;③ 伴有其他嚴重臟器病變或其他惡性腫瘤者;④ 哺乳、妊娠期婦女。
1.2 主要試劑與儀器
RNA 提取試劑盒(貨號:AR1200-50T)購自上海吉至生化科技有限公司;反轉錄試劑盒(貨號:RP1105)購自上海振譽生物科技有限公司;熒光定量 PCR 反應預混液(貨號:218076)購自德國 QIAGEN 公司;熒光定量 PCR 參比染料(貨號:XY-JBS-PCR-323S)購自上海熹垣生物科技有限公司;實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)儀(型號:7700)購自美國 Applied Biosystems 公司。
1.3 方法
1.3.1 組織樣本采集及保存
采集納入本研究的胃癌患者手術時的癌組織及其對應的癌旁組織,所取的組織標本切成直徑約 3 mm 的小碎塊后裝入無菌無 RNA 酶的 EP 管,之后立即置于液氮罐中,轉入?80 ℃ 保存待測。
1.3.2 qRT-PCR 法檢測胃癌組織及其癌旁組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 的表達水平
采用 RNA 提取試劑盒提取組織總 RNA,反轉錄試劑盒將 RNA 反轉錄得到 cDNA。采用 qRT-PCR 儀對 LncRNA DSCR8 和內參 GAPDH 進行擴增,引物由上海生工生物工程股份有限公司設計并合成,引物序列見表 1。反應體系共 10 μL:cDNA 模板(50 ng/μL)1 μL,正反向引物(10 μmol/L 各 0.4 μL,熒光定量 PCR 反應預混液(2 倍的標準濃度)5 μL,ddH2O 3.0 μL,熒光定量 PCR 參比染料(50 倍的標準濃度)0.2 μL。反應條件:95 ℃ 預變性 5 min;95 ℃ 30 s,60 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,40 個循環。樣品重復 3 次,采用 2???CT法計算胃癌患者癌組織及其癌旁組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量。

1.3.3 隨訪
所有患者均于手術后 5 年內采用電話、入戶或患者入院復查等方式進行隨訪,術后第 1~3 年每 3~6 個月隨訪 1 次,4~5 年則每半年隨訪 1 次。檢查內容:血清生化指標、血常規、內鏡或影像學檢查。其生存期從手術之日起計算,隨訪截止時間為 2020 年 8 月 1 日。
1.4 統計學方法
采用 SPSS 23.0 軟件對數據進行統計學分析。計量資料采用 K-S 進行正態性檢驗,符合正態分布的計量資料以均數±標準差(±s)表示,2 組間比較行獨立樣本t檢驗,胃癌組織和癌旁組織的比較采用配對t檢驗;計數資料以例(%)表示,組間比較采用成組 χ2 檢驗;采用 Kaplan-Meier 法分析胃癌組織 LncRNA DSCR8 mRNA 表達與胃癌患者生存率的關系,行 log-rank 檢驗;采用多因素 Cox 比例風險回歸分析影響胃癌患者預后的因素。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 胃癌組織及其癌旁組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 表達水平檢測結果
胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量為 1.49±0.31,高于癌旁組織的 0.99±0.24,其差異有統計學意義(配對t 檢驗,t=11.827,P<0.001)。
2.2 胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 表達水平與患者臨床病理特征的關系
結果見表 2。由表 2 可見,不同年齡、性別、腫瘤直徑和腫瘤位置胃癌患者 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量比較其差異無統計學意義(P>0.05),組織低分化、TNM 分期 為Ⅲ~Ⅳ期和有淋巴結轉移的胃癌組織中的 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量高于組織高/中分化、TNM 分期為Ⅰ~Ⅱ期和無淋巴結轉移患者,差異有統計學意義(P<0.05)。


2.3 胃癌患者 Kaplan-Meier 生存分析結果
本研究以胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量平均值 1.49 為界,結果 86 例患者中 44 例的 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量高于平均值,歸為 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達組,42 例的 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量低于平均值,歸為 LncRNA DSCR8 mRNA 低表達組。采用 Kaplan-Meier 法分析胃癌組織中的 LncRNA DSCR8 mRNA 表達與患者生存率的關系。其結果顯示,LncRNA DSCR8 mRNA 低表達胃癌患者的 1、3、5 年生存率均高于 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達患者,其差異有統計學意義(P<0.05),具體見表 3 和 圖 1。


2.4 影響胃癌患者預后的單因素及多因素 Cox 比例風險回歸分析結果
以年齡(≥60 歲=1,<60 歲=0)、性別(女性=1,男性=0)、腫瘤直徑(≥5.0 cm=1,<5.0 cm=0)、腫瘤位置(胃體=1,胃底=0)、LncRNA DSCR8 mRNA 表達(高表達=1,低表達=0)、腫瘤組織學分化程度(低分化=1,高/中分化=0)、TNM 分期(Ⅲ~Ⅳ期=1,Ⅰ~Ⅱ期=0)以及淋巴結轉移(有=1,無=0)為自變量并以賦值為 0 的作為對照進行單因素以及多因素 Cox 比例風險回歸分析,其結果顯示(表 4 和表 5),LncRNA DSCR8 mRNA 表達和 TNM 分期是影響胃癌患者預后的獨立影響因素(P<0.05)。


3 討論
胃癌主要伴隨惡心、厭食、腹痛、身體質量下降、消化性潰瘍等癥狀,主要起源于胃黏膜上皮細胞,目前其病因和發病機制尚未完全明確[7-8]。根治性手術切除可治愈胃癌,但因其早期癥狀不具有特異性,大多數患者就診時已屬中晚期,導致錯失手術最佳時期,且術后也易復發和轉移[9]。胃癌細胞的轉移涉及多種基因、酶類、細胞因子等的參與調控,而癌細胞的轉移不利于患者預后,易增加患者病死率[10-11]。因此,確定早期診斷及預后判斷的新型生物標志物并闡明胃癌發病機制,對優化治療策略、延長患者生存期具有重要意義。
研究[12]表明,有唐氏綜合征的成年患者,其腫瘤發病率明顯低于同齡健康人群。因此,人們猜想唐氏綜合征多余的染色體基因對腫瘤的發生發展可能有重要作用。LncRNA DSCR1、LncRNA DSCR8 和 LncRNA DSCR9 即是其中的重要基因[13-14]。Zheng 等[15]研究表明,LncRNA DSCR1 的異常表達對小細胞肺癌的轉移有重要影響。LncRNA DSCR8 是肝細胞癌的癌基因,上調 LncRNA DSCR8 表達可促進細胞增殖和細胞周期進入 S 期[16],且研究[17]表明,LncRNA DSCR8 在卵巢癌的發生發展中也起重要作用。本研究結果顯示,LncRNA DSCR8 mRNA 在胃癌患者癌組織中高表達,提示 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達可能與胃癌的發生發展有關,且可能是胃癌的潛在致癌基因。Wang 等[16]研究中,通過 LncRNA DSCR8/miR-485-5P/FZD7 軸可激活 Wnt/β-catenin 信號通路,進而促進肝癌進展,且 LncRNA DSCR8 與肝癌患者的某些惡性臨床病理特征和 5 年生存率密切相關。本研究僅初步探討了 LncRNA DSCR8 與胃癌的相關性及其在預后中的價值,今后可通過細胞或動物實驗進一步探索其具體作用機制。此外,本研究結果顯示,胃癌組織中的 LncRNA DSCR8 mRNA 表達與胃癌患者年齡、性別、腫瘤大小和腫瘤位置無關,但組織低分化、TNM 分期為Ⅲ~Ⅳ期和有淋巴結轉移的胃癌患 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量高于組織高/中分化、TNM 分期為Ⅰ~Ⅱ期和無淋巴結轉移患者。這些結果提示 LncRNA DSCR8 可能成為判斷腫瘤分期、淋巴結轉移等的分子標志物。本研究進一步行 Kaplan-Meier 生存分析發現,LncRNA DSCR8 mRNA 高表達與胃癌患者生存率低有關,且是影響胃癌患者死亡的獨立危險因素。提示 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達可能增強了胃癌細胞的侵襲、遷移能力,易促進胃癌的惡性進展,進而縮短患者存活時間,增加死亡發生率。目前研究[18]表明,日本、韓國的胃癌患者 5 年生存率可達 60%~70%,而我國僅為 35.9%,近 15 年來,我國胃癌 5 年生存率提高了 8.7%。而本研究中胃癌患者 5 年總生存率為 56.98%(49/86),明顯高于既往研究,分析其可能原因是本研究為單中心回顧性研究,納入病例數較少,因此本研究僅初步探究 LncRNA DSCR8 高/低表達與預后的關系,而結果中 5 年生存率可能在總體中不具有代表性,目前無法推廣到所有地區的所有患者,有待進一步驗證。
綜上所述,LncRNA DSCR8 在胃癌患者癌組織中高表達,且 LncRNA DSCR8 的表達與患者臨床病理特征及預后相關,其可能通過高表達參與疾病的發生發展。LncRNA DSCR8 可能是胃癌診斷、治療中潛在的生物學靶點,對其進行進一步深入研究可能為胃癌發生發展病理機制的明確提供重要理論依據。但本研究隨訪時間相對較短、樣本量相對較少、納入的影響因素不夠全面,結果可能有一定偏倚,今后需納入更多影響因素進一步深入研究其臨床應用價值。
重要聲明
利益沖突聲明:本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明,我們無相互競爭的利益。
作者貢獻聲明:呼秀峰負責試驗設計、書寫論文;曲智鋒負責實施研究、收集數據;王玉峰負責統計分析,書寫論文;朱小娟負責科研指導支持。
倫理聲明:本研究通過了河南科技大學第一附屬醫院科學研究倫理委員會的審批[批文編號:2014 年科研倫審第(7)號]。
胃癌是消化系統最常見的惡性腫瘤之一,也是世界上導致腫瘤相關死亡的重要疾病[1]。胃癌發病率較高,腫瘤生長速度快,晚期患者預后較差,而腫瘤組織分化程度、淋巴結轉移等情況與患者疾病進展及預后密切相關[2-3]。胃癌的早期診斷、腫瘤生物學行為的明確及預后的正確判斷對患者選擇最佳治療方案十分重要。長鏈非編碼 RNA(long non-coding RNA,LncRNA)有方便快捷、敏感度、特異度高等優點,是各種腫瘤潛在的生物標志物[4]。唐氏綜合征關鍵區域 8(Down’s syndrome critical region 8,DSCR8)是唐氏綜合征關鍵區域轉錄的 lncRNA,在卵巢癌中表達失調,其可能是潛在的卵巢癌預后指標和治療靶標[5]。Ualcan 數據庫可檢索到 LncRNA DSCR8 在胃癌患者中異常表達,但目前關于其研究的相關文獻較少。故本研究擬通過檢測胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 表達情況,探討其與胃癌患者臨床病理特征及預后的相關性,以期為胃癌的病情評價和預后評估提供一定的理論依據。
1 資料與方法
1.1 研究對象
選取 2014 年 8 月至 2015 年 8 月期間在筆者所在醫院住院治療的 86 例胃癌患者作為研究對象,患者年齡 47~86 歲,中位年齡 60.5 歲;男 38 例,女 48 例。研究病例納入標準:① 符合 2018 年國家衛生健康委員會發布且實施的胃癌診療規范[6],經胃鏡及組織病理學檢查確診,并行腹腔鏡胃癌根治術治療;② 患者臨床資料齊全,通過了河南科技大學第一附屬醫院科學研究倫理委員會的審批,患者或家屬自愿參加;③ 此前未進行化療、放療及其他抗腫瘤治療者;④ 無其他消化系統疾病者。排除標準:① 有胃鏡檢查禁忌者;② 有全身感染性疾病史者;③ 伴有其他嚴重臟器病變或其他惡性腫瘤者;④ 哺乳、妊娠期婦女。
1.2 主要試劑與儀器
RNA 提取試劑盒(貨號:AR1200-50T)購自上海吉至生化科技有限公司;反轉錄試劑盒(貨號:RP1105)購自上海振譽生物科技有限公司;熒光定量 PCR 反應預混液(貨號:218076)購自德國 QIAGEN 公司;熒光定量 PCR 參比染料(貨號:XY-JBS-PCR-323S)購自上海熹垣生物科技有限公司;實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)儀(型號:7700)購自美國 Applied Biosystems 公司。
1.3 方法
1.3.1 組織樣本采集及保存
采集納入本研究的胃癌患者手術時的癌組織及其對應的癌旁組織,所取的組織標本切成直徑約 3 mm 的小碎塊后裝入無菌無 RNA 酶的 EP 管,之后立即置于液氮罐中,轉入?80 ℃ 保存待測。
1.3.2 qRT-PCR 法檢測胃癌組織及其癌旁組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 的表達水平
采用 RNA 提取試劑盒提取組織總 RNA,反轉錄試劑盒將 RNA 反轉錄得到 cDNA。采用 qRT-PCR 儀對 LncRNA DSCR8 和內參 GAPDH 進行擴增,引物由上海生工生物工程股份有限公司設計并合成,引物序列見表 1。反應體系共 10 μL:cDNA 模板(50 ng/μL)1 μL,正反向引物(10 μmol/L 各 0.4 μL,熒光定量 PCR 反應預混液(2 倍的標準濃度)5 μL,ddH2O 3.0 μL,熒光定量 PCR 參比染料(50 倍的標準濃度)0.2 μL。反應條件:95 ℃ 預變性 5 min;95 ℃ 30 s,60 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,40 個循環。樣品重復 3 次,采用 2???CT法計算胃癌患者癌組織及其癌旁組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量。

1.3.3 隨訪
所有患者均于手術后 5 年內采用電話、入戶或患者入院復查等方式進行隨訪,術后第 1~3 年每 3~6 個月隨訪 1 次,4~5 年則每半年隨訪 1 次。檢查內容:血清生化指標、血常規、內鏡或影像學檢查。其生存期從手術之日起計算,隨訪截止時間為 2020 年 8 月 1 日。
1.4 統計學方法
采用 SPSS 23.0 軟件對數據進行統計學分析。計量資料采用 K-S 進行正態性檢驗,符合正態分布的計量資料以均數±標準差(±s)表示,2 組間比較行獨立樣本t檢驗,胃癌組織和癌旁組織的比較采用配對t檢驗;計數資料以例(%)表示,組間比較采用成組 χ2 檢驗;采用 Kaplan-Meier 法分析胃癌組織 LncRNA DSCR8 mRNA 表達與胃癌患者生存率的關系,行 log-rank 檢驗;采用多因素 Cox 比例風險回歸分析影響胃癌患者預后的因素。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 胃癌組織及其癌旁組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 表達水平檢測結果
胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量為 1.49±0.31,高于癌旁組織的 0.99±0.24,其差異有統計學意義(配對t 檢驗,t=11.827,P<0.001)。
2.2 胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 表達水平與患者臨床病理特征的關系
結果見表 2。由表 2 可見,不同年齡、性別、腫瘤直徑和腫瘤位置胃癌患者 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量比較其差異無統計學意義(P>0.05),組織低分化、TNM 分期 為Ⅲ~Ⅳ期和有淋巴結轉移的胃癌組織中的 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量高于組織高/中分化、TNM 分期為Ⅰ~Ⅱ期和無淋巴結轉移患者,差異有統計學意義(P<0.05)。


2.3 胃癌患者 Kaplan-Meier 生存分析結果
本研究以胃癌組織中 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量平均值 1.49 為界,結果 86 例患者中 44 例的 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量高于平均值,歸為 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達組,42 例的 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量低于平均值,歸為 LncRNA DSCR8 mRNA 低表達組。采用 Kaplan-Meier 法分析胃癌組織中的 LncRNA DSCR8 mRNA 表達與患者生存率的關系。其結果顯示,LncRNA DSCR8 mRNA 低表達胃癌患者的 1、3、5 年生存率均高于 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達患者,其差異有統計學意義(P<0.05),具體見表 3 和 圖 1。


2.4 影響胃癌患者預后的單因素及多因素 Cox 比例風險回歸分析結果
以年齡(≥60 歲=1,<60 歲=0)、性別(女性=1,男性=0)、腫瘤直徑(≥5.0 cm=1,<5.0 cm=0)、腫瘤位置(胃體=1,胃底=0)、LncRNA DSCR8 mRNA 表達(高表達=1,低表達=0)、腫瘤組織學分化程度(低分化=1,高/中分化=0)、TNM 分期(Ⅲ~Ⅳ期=1,Ⅰ~Ⅱ期=0)以及淋巴結轉移(有=1,無=0)為自變量并以賦值為 0 的作為對照進行單因素以及多因素 Cox 比例風險回歸分析,其結果顯示(表 4 和表 5),LncRNA DSCR8 mRNA 表達和 TNM 分期是影響胃癌患者預后的獨立影響因素(P<0.05)。


3 討論
胃癌主要伴隨惡心、厭食、腹痛、身體質量下降、消化性潰瘍等癥狀,主要起源于胃黏膜上皮細胞,目前其病因和發病機制尚未完全明確[7-8]。根治性手術切除可治愈胃癌,但因其早期癥狀不具有特異性,大多數患者就診時已屬中晚期,導致錯失手術最佳時期,且術后也易復發和轉移[9]。胃癌細胞的轉移涉及多種基因、酶類、細胞因子等的參與調控,而癌細胞的轉移不利于患者預后,易增加患者病死率[10-11]。因此,確定早期診斷及預后判斷的新型生物標志物并闡明胃癌發病機制,對優化治療策略、延長患者生存期具有重要意義。
研究[12]表明,有唐氏綜合征的成年患者,其腫瘤發病率明顯低于同齡健康人群。因此,人們猜想唐氏綜合征多余的染色體基因對腫瘤的發生發展可能有重要作用。LncRNA DSCR1、LncRNA DSCR8 和 LncRNA DSCR9 即是其中的重要基因[13-14]。Zheng 等[15]研究表明,LncRNA DSCR1 的異常表達對小細胞肺癌的轉移有重要影響。LncRNA DSCR8 是肝細胞癌的癌基因,上調 LncRNA DSCR8 表達可促進細胞增殖和細胞周期進入 S 期[16],且研究[17]表明,LncRNA DSCR8 在卵巢癌的發生發展中也起重要作用。本研究結果顯示,LncRNA DSCR8 mRNA 在胃癌患者癌組織中高表達,提示 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達可能與胃癌的發生發展有關,且可能是胃癌的潛在致癌基因。Wang 等[16]研究中,通過 LncRNA DSCR8/miR-485-5P/FZD7 軸可激活 Wnt/β-catenin 信號通路,進而促進肝癌進展,且 LncRNA DSCR8 與肝癌患者的某些惡性臨床病理特征和 5 年生存率密切相關。本研究僅初步探討了 LncRNA DSCR8 與胃癌的相關性及其在預后中的價值,今后可通過細胞或動物實驗進一步探索其具體作用機制。此外,本研究結果顯示,胃癌組織中的 LncRNA DSCR8 mRNA 表達與胃癌患者年齡、性別、腫瘤大小和腫瘤位置無關,但組織低分化、TNM 分期為Ⅲ~Ⅳ期和有淋巴結轉移的胃癌患 LncRNA DSCR8 mRNA 相對表達量高于組織高/中分化、TNM 分期為Ⅰ~Ⅱ期和無淋巴結轉移患者。這些結果提示 LncRNA DSCR8 可能成為判斷腫瘤分期、淋巴結轉移等的分子標志物。本研究進一步行 Kaplan-Meier 生存分析發現,LncRNA DSCR8 mRNA 高表達與胃癌患者生存率低有關,且是影響胃癌患者死亡的獨立危險因素。提示 LncRNA DSCR8 mRNA 高表達可能增強了胃癌細胞的侵襲、遷移能力,易促進胃癌的惡性進展,進而縮短患者存活時間,增加死亡發生率。目前研究[18]表明,日本、韓國的胃癌患者 5 年生存率可達 60%~70%,而我國僅為 35.9%,近 15 年來,我國胃癌 5 年生存率提高了 8.7%。而本研究中胃癌患者 5 年總生存率為 56.98%(49/86),明顯高于既往研究,分析其可能原因是本研究為單中心回顧性研究,納入病例數較少,因此本研究僅初步探究 LncRNA DSCR8 高/低表達與預后的關系,而結果中 5 年生存率可能在總體中不具有代表性,目前無法推廣到所有地區的所有患者,有待進一步驗證。
綜上所述,LncRNA DSCR8 在胃癌患者癌組織中高表達,且 LncRNA DSCR8 的表達與患者臨床病理特征及預后相關,其可能通過高表達參與疾病的發生發展。LncRNA DSCR8 可能是胃癌診斷、治療中潛在的生物學靶點,對其進行進一步深入研究可能為胃癌發生發展病理機制的明確提供重要理論依據。但本研究隨訪時間相對較短、樣本量相對較少、納入的影響因素不夠全面,結果可能有一定偏倚,今后需納入更多影響因素進一步深入研究其臨床應用價值。
重要聲明
利益沖突聲明:本文全體作者閱讀并理解了《中國普外基礎與臨床雜志》的政策聲明,我們無相互競爭的利益。
作者貢獻聲明:呼秀峰負責試驗設計、書寫論文;曲智鋒負責實施研究、收集數據;王玉峰負責統計分析,書寫論文;朱小娟負責科研指導支持。
倫理聲明:本研究通過了河南科技大學第一附屬醫院科學研究倫理委員會的審批[批文編號:2014 年科研倫審第(7)號]。