引用本文： 楊林, 時林森, 江濤, 吳兆映, 宋軍. PD-L1 和 A2aR 在結直腸癌組織中的表達及其臨床意義. 中國普外基礎與臨床雜志, 2019, 26(4): 423-427. doi: 10.7507/1007-9424.201811025 復制
宿主免疫反應在腫瘤生存、發展及其在對各種治療的反應中扮演著關鍵的角色。在生理學上，免疫負性調節通路的出現是由于需要控制表達抗原部位的炎癥程度，以保護正常組織免受損傷[1]，而腫瘤則通過檢查點免疫調節來維持免疫監測和癌細胞增殖之間的不平衡，實現其生存和發展。有研究表明，細胞程序死亡配體 1（programmed death ligand 1，PD-L1）在許多腫瘤和免疫細胞中均有較高水平分布[2]，能通過與免疫球蛋白家族負性刺激分子 PD-1 結合而組成 PD-1/PD-L1 通路，通過提高 T、B 淋巴細胞線粒體內過氧化氫和活性氧水平抑制其活化及增殖，導致特異性細胞毒性 T 淋巴細胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）凋亡，進而抑制免疫系統對腫瘤的攻擊[3]。腺苷 2a 受體（adenosine 2a receptor，A2aR）在腺苷 4 種受體（A1R、A2aR、A2bR 及 A3R）中親和力最高，與腺苷結合激活效應 T 淋巴細胞、調節性 T 淋巴細胞和自然殺傷（NK）細胞中腺苷酸環化酶，生成環磷酸腺苷（cAMP）[4]，cAMP 可負性調節特異性 CTL 對腫瘤免疫殺傷，加速免疫抑制細胞極化和增殖，增加對腫瘤組織的營養支持，加速其生長[5]。在機體中，阻斷 PD-1/PD-L1 通路可增強 T 淋巴細胞功能，而活化后的 T 淋巴細胞中 A2AR 表達增加，所以腺苷介導的免疫逃避和 PD-1/PD-L1 介導的免疫逃避之間是否具有相關性及是否存在協作抑制關系？本研究通過檢測結直腸癌組織及其對應的癌旁組織中 PD-L1 和 A2aR 蛋白表達情況，分析了兩者表達情況與結直腸癌患者臨床病理學特征的關系，從而初步探討 PD-L1 和 A2aR 蛋白表達與結直腸癌生存、生長之間的聯系。
1 資料與方法
1.1 一般資料
收集 2013 年 8 月至 2015 年 8 月期間于徐州醫科大學附屬醫院行手術治療的 106 例結直腸癌患者的癌組織及其對應的癌旁組織石蠟標本。入組標準：術前未接受放療或化療；術后常規病理學確診為結直腸癌；患者既往身體健康，無胃腸道疾病史；臨床病理資料完整。共有患者 106 例，其中男 61 例，女 45 例；年齡 28～83 歲、（61±13）歲，其中<60歲 44 例，≥60 歲 62 例；腫瘤位置：結腸 51 例，直腸 55 例；腫瘤直徑：<5.0 cm 67 例，≥5.0 cm 39 例；組織學 Broders 分級（分化程度）：Ⅰ 級 15 例，Ⅱ 級 32 例，Ⅲ 級 59 例；TNM 分期：Ⅰ 期 19 例，Ⅱ 期 30 例，Ⅲ 期 45 例，Ⅳ 期 12 例；原發腫瘤的 T 分期：T1 期 11 例，T2 期 12 例，T3 期 51 例，T4 期 32 例；淋巴結轉移：有轉移 34 例，無轉移 72 例；腫瘤指標：癌胚胎抗原（CEA）陽性 46 例，陰性 60 例；糖蛋白抗原 19-9（CA19-9）陽性 24 例，陰性 82 例。
1.2 方法
1.2.1 主要試劑
兔抗人多克隆抗體 anti-A2aR（貨號 ab3461）、兔抗人多克隆抗體 Anti-PD-L1（貨號 ab213524），均購自 Abcam（上海）貿易有限公司，生物素-鏈霉卵白素（SP）免疫組織化學試劑盒購自北京中杉金橋生物公司。
1.2.2 免疫組織化學 SP 法檢測 A2aR 及 PD-L1 蛋白的表達
操作按免疫組織化學 SP 試劑盒說明書進行（陰性和陽性對照由試劑盒提供）。結果判定采取雙盲獨立觀察評估。判斷標準：以細胞膜和細胞質出現黃染顆粒定義為陽性表達。根據陽性細胞所占比例，采用半定量積分法判斷結果：≤25% 記為 1 分，26%～50% 記為 2 分，51%～75% 記為 3 分；≥76% 記為 4 分；再根據細胞顯色強度判斷結果：無顯色記為 0 分，淡黃色記為 1 分，棕黃色記為 2 分，棕褐色記為 3 分。A2aR 染色陽性判斷標準：兩項積分相乘（總分 0～12 分），其中 0 分為（-），1～4 分為（±），5～9 分為（+），>9 分為（++），（-）和（±）定義為陰性表達，（+）和（++）定義為陽性表達[6]。PD-L1 染色陽性判斷標準：兩項積分相乘，其中 0～2 分為陰性表達，≥3 分為陽性表達[7]。
1.3 統計學方法
應用 SPSS 16.0 軟件對數據進行統計分析。計數資料以百分率表示，采用 χ2 檢驗；相關性分析采用 Spearman 分類變量的關聯性分析。檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 A2aR 及 PD-L1 蛋白的表達結果
免疫組織化學染色結果顯示，A2aR 及 PD-L1 蛋白主要表達于細胞質及細胞膜（圖 1）。本組患者結腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白表達陽性率均明顯高于其癌旁組織（P<0.001），見表 1。
圖1
A2aR 及 PD-L1 蛋白在結直腸癌組織及其相應的癌旁組織中的表達（SP ×400）
a–d：結直腸癌組織中A2aR蛋白陽性（a）和陰性（b）表達、PD-L1 蛋白陽性（c）和陰性（d）表達；e–h：癌旁組織中A2aR蛋白陽性（e）和陰性（f）表達、PD-L1 蛋白陽性（g）和陰性（h）表達
表1
A2aR 及 PD-L1 蛋白在 106 例結直腸癌患者的結直腸癌組織及其對應的癌旁組織中的表達結果［例（率）］
2.2 結直腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白表達與其臨床病理學特征間的關系
結果見表 2。從表 2 可見，結直腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白陽性表達均與腫瘤的 Broders 分級（分化程度）、T 分期及 TNM 分期有關（P<0.05），且 A2aR 蛋白陽性表達還與腫瘤直徑和 CEA 陽性有關（P<0.05）而 PD-L1 蛋白陽性表達與此無關（P>0.05）；A2aR 和 PD-L1 蛋白陽性表達均與結直腸癌患者的性別、年齡、腫瘤部位、有無淋巴結轉移及 CA19-9 無關（P>0.05）。
表2
結直腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白陽性表達與結直腸癌患者的臨床病理學特征之間的關系
2.3 結直腸癌組織中 PD-L1 與 A2aR 蛋白表達的相關性
結果見表 3。從表 3 可見，在結直腸癌組織中，PD-L1 與 A2aR 蛋白表達呈正相關（rs=0.237，P=0.027）。
表3
A2aR 與 PD-L1 蛋白在結直腸癌組織中表達的相關性分析結果（例）
3 討論
隨著手術、化療、放療等傳統腫瘤治療手段水平的提高，患者的生存獲益也得到了極大的提升，但也進入了瓶頸。而近些年對免疫檢查點阻滯劑的研究正迅速成為一種極有前途的惡性腫瘤治療新方法[8]。近些年研究人員通過抑制免疫檢查點，重建機體對腫瘤組織的免疫應答體系[9]，對晚期腫瘤的治療取得了較大進步[10]，雖然如此，但其總體治療有效率仍較低。有研究表明，PD-1/PD-L1 免疫檢查點阻滯劑對晚期腎癌治療有效率僅有25%[11]，而同時聯合應用其他免疫抑制抗體可適當提高治療有效率，這均表明腫瘤免疫逃逸機制的復雜性[12]。因此，探索結直腸癌微環境中免疫因素之間的相關性，對尋求聯合抗腫瘤免疫治療方案均具有重要意義。
PD-L1，亦稱 B7-H1，于 1999 年由中國學者[8]首次報道，是 PD-1 兩種配體（PD-L1 和 PD-L2）之一，負責腫瘤免疫調節。癌組織利用表達 PD-L1 與 T 淋巴細胞 PD-1 結合可引發 T 淋巴細胞功能障礙、衰竭以及 IL-10 的生成[13]，保護自身免受 CTL 介導的免疫殺傷。近年來有研究[14]表明，PD-L1 在各種不同腫瘤（乳腺癌、非小細胞肺癌、黑色素瘤、腎癌等）中都有高表達，且可作為評估患者預后的重要預測因子。有臨床研究[15]也指出，PD-L1 的陽性表達與腫瘤直徑、腫瘤分化程度、淋巴結是否有轉移以及總生存率均密切相關。目前針對 PD-1/PD-L1 通路的免疫阻滯劑在對黑色素瘤、非小細胞肺癌及淋巴瘤臨床試驗治療中取得的良好的治療效果，并已進入臨床應用階段[16]。本研究結果表明，雖 PD-L1 在結直腸癌及癌旁組織中均有陽性表達，但其在癌組織中的表達陽性率（53.8%）明顯高于其對應的癌旁組織（26.4%），結果提示，PD-L1 在結直腸癌的形成和成長過程中可能起到關鍵的作用。此外，本研究結果還顯示，PD-L1 表達陽性率與結直腸癌的 TNM 分期、浸潤深度、分化程度均有關聯（P<0.05），即 TNM 分期越高、浸潤深度越深者其蛋白表達陽性率越高，且其陽性率隨腫瘤分化 Broders 分級升高而升高，結果提示，PD-L1 在結直腸癌的惡性進展過程中可能也扮演著重要的角色。因此，通過檢測結直腸癌組織中 PD-L1 的表達水平有助于判斷疾病進展情況。
A2aR 在人體各個器官內廣泛表達，包括肺臟、肝臟、心臟、脾臟、胸腺等[17-18]。在腫瘤及其微環境中，A2aR 與腺苷結合后生成 cAMP，cAMP 可以抑制免疫殺傷細胞的抗腫瘤作用從而減弱抗瘤免疫應答[19]，同時可促進免疫抑制細胞發生極化和增殖，有利于惡性腫瘤的營養支持，從而促進惡性腫瘤的生長[5]。亦有研究[20]指出，免疫細胞內，CD73 和 A2aR 主要損害 CD8+ T 淋巴細胞和 NK 細胞功能，從而使腫瘤逃脫宿主的免疫殺傷。有文獻[21]報道，A2aR 髓系選擇性缺失可明顯增強巨噬細胞活化，增加惡性腫瘤浸潤 T 淋巴細胞和 NK 細胞的數量和活化，可達到抑制腫瘤生長和轉移的效果。也有研究[21]指出，應用腺苷激動劑處理后，顯著增加了 WT 小鼠 B16F10 黑色素瘤細胞的轉移。在乳腺癌等腫瘤的臨床前期試驗[22]中，針對 CD73 和 A2aR 的免疫治療也已取得了良好的成果。本研究結果表明，結直腸癌的癌組織中 A2aR 蛋白表達陽性率（69.8%）顯著高于其相應的癌旁組織（33.0%），A2aR 蛋白表達陽性率與結直腸癌的 TNM 分期、T 分期、腫瘤 Broders 分級、腫瘤直徑及腫瘤指標 CEA 水平均有關聯（P<0.05），提示 A2aR 蛋白表達陽性率與結直腸癌的生長、侵襲、轉移等生物學行為密切關聯，提示 A2aR 可能對結直腸癌的發生和發展產生一定的影響。通過檢測結直腸癌組織中 A2aR 的表達水平有助于判斷腫瘤侵襲性及轉移性，可能成為判斷結直腸癌預后的一個新指標。
有研究者[23]指出，阻斷 A2aR 可以增強抗 PD-1/PD-L1 單克隆抗體對原發性腫瘤的療效，降低復發和轉移風險，值得作為一種聯合治療方案行更深一步探索。在本研究中，利用分類變量的 Spearman 關聯性分析結果顯示，在結直腸癌組織中 PD-L1 及 A2aR 蛋白表達陽性率具有正相關關聯（rs=0.237，P=0.027），且二者的蛋白表達陽性率均與 TNM 分期、T 分期和分化程度密不可分，此結果提示了 PD-L1 及 A2aR 可能在結直腸癌的生長和侵襲中存在協同作用，也支持 A2aR 和 PD-L1 可能通過某種內部連接共同影響腫瘤的發生及發展。
綜上所述，結直腸癌組織中 PD-L1 和 A2aR 蛋白表達水平的異常上調提示它們可能與結直腸癌的生長、侵襲、轉移等密切相關，有可能成為結直腸癌免疫檢查點阻滯治療的新靶點。鑒于目前腫瘤的聯合免疫治療仍處初始階段，它們之間具體相互作用機制還需進一步探究。
宿主免疫反應在腫瘤生存、發展及其在對各種治療的反應中扮演著關鍵的角色。在生理學上，免疫負性調節通路的出現是由于需要控制表達抗原部位的炎癥程度，以保護正常組織免受損傷[1]，而腫瘤則通過檢查點免疫調節來維持免疫監測和癌細胞增殖之間的不平衡，實現其生存和發展。有研究表明，細胞程序死亡配體 1（programmed death ligand 1，PD-L1）在許多腫瘤和免疫細胞中均有較高水平分布[2]，能通過與免疫球蛋白家族負性刺激分子 PD-1 結合而組成 PD-1/PD-L1 通路，通過提高 T、B 淋巴細胞線粒體內過氧化氫和活性氧水平抑制其活化及增殖，導致特異性細胞毒性 T 淋巴細胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）凋亡，進而抑制免疫系統對腫瘤的攻擊[3]。腺苷 2a 受體（adenosine 2a receptor，A2aR）在腺苷 4 種受體（A1R、A2aR、A2bR 及 A3R）中親和力最高，與腺苷結合激活效應 T 淋巴細胞、調節性 T 淋巴細胞和自然殺傷（NK）細胞中腺苷酸環化酶，生成環磷酸腺苷（cAMP）[4]，cAMP 可負性調節特異性 CTL 對腫瘤免疫殺傷，加速免疫抑制細胞極化和增殖，增加對腫瘤組織的營養支持，加速其生長[5]。在機體中，阻斷 PD-1/PD-L1 通路可增強 T 淋巴細胞功能，而活化后的 T 淋巴細胞中 A2AR 表達增加，所以腺苷介導的免疫逃避和 PD-1/PD-L1 介導的免疫逃避之間是否具有相關性及是否存在協作抑制關系？本研究通過檢測結直腸癌組織及其對應的癌旁組織中 PD-L1 和 A2aR 蛋白表達情況，分析了兩者表達情況與結直腸癌患者臨床病理學特征的關系，從而初步探討 PD-L1 和 A2aR 蛋白表達與結直腸癌生存、生長之間的聯系。
1 資料與方法
1.1 一般資料
收集 2013 年 8 月至 2015 年 8 月期間于徐州醫科大學附屬醫院行手術治療的 106 例結直腸癌患者的癌組織及其對應的癌旁組織石蠟標本。入組標準：術前未接受放療或化療；術后常規病理學確診為結直腸癌；患者既往身體健康，無胃腸道疾病史；臨床病理資料完整。共有患者 106 例，其中男 61 例，女 45 例；年齡 28～83 歲、（61±13）歲，其中<60歲 44 例，≥60 歲 62 例；腫瘤位置：結腸 51 例，直腸 55 例；腫瘤直徑：<5.0 cm 67 例，≥5.0 cm 39 例；組織學 Broders 分級（分化程度）：Ⅰ 級 15 例，Ⅱ 級 32 例，Ⅲ 級 59 例；TNM 分期：Ⅰ 期 19 例，Ⅱ 期 30 例，Ⅲ 期 45 例，Ⅳ 期 12 例；原發腫瘤的 T 分期：T1 期 11 例，T2 期 12 例，T3 期 51 例，T4 期 32 例；淋巴結轉移：有轉移 34 例，無轉移 72 例；腫瘤指標：癌胚胎抗原（CEA）陽性 46 例，陰性 60 例；糖蛋白抗原 19-9（CA19-9）陽性 24 例，陰性 82 例。
1.2 方法
1.2.1 主要試劑
兔抗人多克隆抗體 anti-A2aR（貨號 ab3461）、兔抗人多克隆抗體 Anti-PD-L1（貨號 ab213524），均購自 Abcam（上海）貿易有限公司，生物素-鏈霉卵白素（SP）免疫組織化學試劑盒購自北京中杉金橋生物公司。
1.2.2 免疫組織化學 SP 法檢測 A2aR 及 PD-L1 蛋白的表達
操作按免疫組織化學 SP 試劑盒說明書進行（陰性和陽性對照由試劑盒提供）。結果判定采取雙盲獨立觀察評估。判斷標準：以細胞膜和細胞質出現黃染顆粒定義為陽性表達。根據陽性細胞所占比例，采用半定量積分法判斷結果：≤25% 記為 1 分，26%～50% 記為 2 分，51%～75% 記為 3 分；≥76% 記為 4 分；再根據細胞顯色強度判斷結果：無顯色記為 0 分，淡黃色記為 1 分，棕黃色記為 2 分，棕褐色記為 3 分。A2aR 染色陽性判斷標準：兩項積分相乘（總分 0～12 分），其中 0 分為（-），1～4 分為（±），5～9 分為（+），>9 分為（++），（-）和（±）定義為陰性表達，（+）和（++）定義為陽性表達[6]。PD-L1 染色陽性判斷標準：兩項積分相乘，其中 0～2 分為陰性表達，≥3 分為陽性表達[7]。
1.3 統計學方法
應用 SPSS 16.0 軟件對數據進行統計分析。計數資料以百分率表示，采用 χ2 檢驗；相關性分析采用 Spearman 分類變量的關聯性分析。檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 A2aR 及 PD-L1 蛋白的表達結果
免疫組織化學染色結果顯示，A2aR 及 PD-L1 蛋白主要表達于細胞質及細胞膜（圖 1）。本組患者結腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白表達陽性率均明顯高于其癌旁組織（P<0.001），見表 1。
圖1
A2aR 及 PD-L1 蛋白在結直腸癌組織及其相應的癌旁組織中的表達（SP ×400）
a–d：結直腸癌組織中A2aR蛋白陽性（a）和陰性（b）表達、PD-L1 蛋白陽性（c）和陰性（d）表達；e–h：癌旁組織中A2aR蛋白陽性（e）和陰性（f）表達、PD-L1 蛋白陽性（g）和陰性（h）表達
表1
A2aR 及 PD-L1 蛋白在 106 例結直腸癌患者的結直腸癌組織及其對應的癌旁組織中的表達結果［例（率）］
2.2 結直腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白表達與其臨床病理學特征間的關系
結果見表 2。從表 2 可見，結直腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白陽性表達均與腫瘤的 Broders 分級（分化程度）、T 分期及 TNM 分期有關（P<0.05），且 A2aR 蛋白陽性表達還與腫瘤直徑和 CEA 陽性有關（P<0.05）而 PD-L1 蛋白陽性表達與此無關（P>0.05）；A2aR 和 PD-L1 蛋白陽性表達均與結直腸癌患者的性別、年齡、腫瘤部位、有無淋巴結轉移及 CA19-9 無關（P>0.05）。
表2
結直腸癌組織中 A2aR 和 PD-L1 蛋白陽性表達與結直腸癌患者的臨床病理學特征之間的關系
2.3 結直腸癌組織中 PD-L1 與 A2aR 蛋白表達的相關性
結果見表 3。從表 3 可見，在結直腸癌組織中，PD-L1 與 A2aR 蛋白表達呈正相關（rs=0.237，P=0.027）。
表3
A2aR 與 PD-L1 蛋白在結直腸癌組織中表達的相關性分析結果（例）
3 討論
隨著手術、化療、放療等傳統腫瘤治療手段水平的提高，患者的生存獲益也得到了極大的提升，但也進入了瓶頸。而近些年對免疫檢查點阻滯劑的研究正迅速成為一種極有前途的惡性腫瘤治療新方法[8]。近些年研究人員通過抑制免疫檢查點，重建機體對腫瘤組織的免疫應答體系[9]，對晚期腫瘤的治療取得了較大進步[10]，雖然如此，但其總體治療有效率仍較低。有研究表明，PD-1/PD-L1 免疫檢查點阻滯劑對晚期腎癌治療有效率僅有25%[11]，而同時聯合應用其他免疫抑制抗體可適當提高治療有效率，這均表明腫瘤免疫逃逸機制的復雜性[12]。因此，探索結直腸癌微環境中免疫因素之間的相關性，對尋求聯合抗腫瘤免疫治療方案均具有重要意義。
PD-L1，亦稱 B7-H1，于 1999 年由中國學者[8]首次報道，是 PD-1 兩種配體（PD-L1 和 PD-L2）之一，負責腫瘤免疫調節。癌組織利用表達 PD-L1 與 T 淋巴細胞 PD-1 結合可引發 T 淋巴細胞功能障礙、衰竭以及 IL-10 的生成[13]，保護自身免受 CTL 介導的免疫殺傷。近年來有研究[14]表明，PD-L1 在各種不同腫瘤（乳腺癌、非小細胞肺癌、黑色素瘤、腎癌等）中都有高表達，且可作為評估患者預后的重要預測因子。有臨床研究[15]也指出，PD-L1 的陽性表達與腫瘤直徑、腫瘤分化程度、淋巴結是否有轉移以及總生存率均密切相關。目前針對 PD-1/PD-L1 通路的免疫阻滯劑在對黑色素瘤、非小細胞肺癌及淋巴瘤臨床試驗治療中取得的良好的治療效果，并已進入臨床應用階段[16]。本研究結果表明，雖 PD-L1 在結直腸癌及癌旁組織中均有陽性表達，但其在癌組織中的表達陽性率（53.8%）明顯高于其對應的癌旁組織（26.4%），結果提示，PD-L1 在結直腸癌的形成和成長過程中可能起到關鍵的作用。此外，本研究結果還顯示，PD-L1 表達陽性率與結直腸癌的 TNM 分期、浸潤深度、分化程度均有關聯（P<0.05），即 TNM 分期越高、浸潤深度越深者其蛋白表達陽性率越高，且其陽性率隨腫瘤分化 Broders 分級升高而升高，結果提示，PD-L1 在結直腸癌的惡性進展過程中可能也扮演著重要的角色。因此，通過檢測結直腸癌組織中 PD-L1 的表達水平有助于判斷疾病進展情況。
A2aR 在人體各個器官內廣泛表達，包括肺臟、肝臟、心臟、脾臟、胸腺等[17-18]。在腫瘤及其微環境中，A2aR 與腺苷結合后生成 cAMP，cAMP 可以抑制免疫殺傷細胞的抗腫瘤作用從而減弱抗瘤免疫應答[19]，同時可促進免疫抑制細胞發生極化和增殖，有利于惡性腫瘤的營養支持，從而促進惡性腫瘤的生長[5]。亦有研究[20]指出，免疫細胞內，CD73 和 A2aR 主要損害 CD8+ T 淋巴細胞和 NK 細胞功能，從而使腫瘤逃脫宿主的免疫殺傷。有文獻[21]報道，A2aR 髓系選擇性缺失可明顯增強巨噬細胞活化，增加惡性腫瘤浸潤 T 淋巴細胞和 NK 細胞的數量和活化，可達到抑制腫瘤生長和轉移的效果。也有研究[21]指出，應用腺苷激動劑處理后，顯著增加了 WT 小鼠 B16F10 黑色素瘤細胞的轉移。在乳腺癌等腫瘤的臨床前期試驗[22]中，針對 CD73 和 A2aR 的免疫治療也已取得了良好的成果。本研究結果表明，結直腸癌的癌組織中 A2aR 蛋白表達陽性率（69.8%）顯著高于其相應的癌旁組織（33.0%），A2aR 蛋白表達陽性率與結直腸癌的 TNM 分期、T 分期、腫瘤 Broders 分級、腫瘤直徑及腫瘤指標 CEA 水平均有關聯（P<0.05），提示 A2aR 蛋白表達陽性率與結直腸癌的生長、侵襲、轉移等生物學行為密切關聯，提示 A2aR 可能對結直腸癌的發生和發展產生一定的影響。通過檢測結直腸癌組織中 A2aR 的表達水平有助于判斷腫瘤侵襲性及轉移性，可能成為判斷結直腸癌預后的一個新指標。
有研究者[23]指出，阻斷 A2aR 可以增強抗 PD-1/PD-L1 單克隆抗體對原發性腫瘤的療效，降低復發和轉移風險，值得作為一種聯合治療方案行更深一步探索。在本研究中，利用分類變量的 Spearman 關聯性分析結果顯示，在結直腸癌組織中 PD-L1 及 A2aR 蛋白表達陽性率具有正相關關聯（rs=0.237，P=0.027），且二者的蛋白表達陽性率均與 TNM 分期、T 分期和分化程度密不可分，此結果提示了 PD-L1 及 A2aR 可能在結直腸癌的生長和侵襲中存在協同作用，也支持 A2aR 和 PD-L1 可能通過某種內部連接共同影響腫瘤的發生及發展。
綜上所述，結直腸癌組織中 PD-L1 和 A2aR 蛋白表達水平的異常上調提示它們可能與結直腸癌的生長、侵襲、轉移等密切相關，有可能成為結直腸癌免疫檢查點阻滯治療的新靶點。鑒于目前腫瘤的聯合免疫治療仍處初始階段，它們之間具體相互作用機制還需進一步探究。
