引用本文： 陳超, 白松, 陳占旗. ARDl抗結直腸癌細胞機理研究進展. 中國普外基礎與臨床雜志, 2016, 23(4): 507-510. doi: 10.7507/1007-9424.20160134 復制
停滯缺陷蛋白1 (arrest defective 1，ARD1)蛋白是一種乙酰基轉移酶（acetyl transferase），人ARD1(hARD1)與酵母N-乙酰基轉移酶基因ARDl是同源基因。ARD1與多種腫瘤的發生發展有著密切的關系，比如參與腫瘤細胞和組織的增殖、分化、凋亡、耐藥等。現擬對ARD1抗結直腸癌作用機理的研究進展作一綜述。
1 ARD1的生物化學特性
hARD1是一種乙酰基轉移酶，它定位于人染色體xq28，有7個外顯子，編碼氨基酸235個，全長5 019 bp [1]。在過去的50年中，其功能已經開始慢慢地被闡明，主要包括調節蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白的穩定性、蛋白質的功能、蛋白質定位到特定的細胞器等[2-3]。ARD1最初在酵母中被發現，酵母ARD1是組成N2乙酰基轉移酶NatA（NAT1、ARD1、NAT5）3個亞基中的1個亞基。ARD1主要發揮N-α-乙酰轉移酶的作用，其可以將乙酰coA的乙酰基（-CO-CH3）轉移到新生多肽N端，從而影響蛋白的功能、穩定性及與其他蛋白分子的聯系和進一步修飾，也在細胞周期的調節中發揮重要作用[4-5]。在哺乳動物中ARD1存在兩種活性：賴氨酸殘基的ε氨基和N端的α氨基乙酰化的活性[6]，ARD1所介導的乙酰化普遍存在于真核細胞多種組織的蛋白成分中，它在許多生物過程中起翻譯后修飾的作用，如DNA修復，蛋白質的穩定性和核轉位，蛋白質間的相互作用以及細胞增殖、凋亡, 細胞自噬和神經發展等；此外，在腫瘤的發展中也起著至關重要的作用。近年來，有研究[7-8]發現，人類N-乙酰基轉移酶ARD1（hARD1）與腫瘤存在高度相關性，并在諸多腫瘤組織和細胞中呈現高表達狀態。
2 hARD1與結直腸癌的相關性
腫瘤的發生是一個多因素、多階段緩慢發展的過程，在這個過程中癌細胞逐漸獲取如抗凋亡、永生化復制能力、侵犯鄰近組織、向其他組織轉移、破壞免疫系統功能等異于正常組織細胞的功能[9]。
近年來諸多研究[10-12]均證實hARD1與諸如肺癌、乳腺癌、結直腸癌、前列腺癌、甲狀腺癌等多種腫瘤的發生高度相關。早在2005年，Arnesen等[13]研究發現，相比于癌旁組織，hARD1在癌組織中呈現高表達狀態。隨后，Ren等[14]在mRNA和蛋白質水平證實hARD1在結直腸癌組織中呈高表達，并提出將其作為結直腸癌潛在標志物。此外，在SW620、HCT-8等結直腸腺癌細胞株中，hARD1也呈現高表達狀態[11]。值得一提的是，hARD1還與結直腸癌癌前病變也存在一定的相關性。Crabtree等[15]的研究表明，人體結腸家族性腺瘤性息肉病（familial adenomatous polyposis，FAP）的嚴重程度在一定程度上與修飾基因端乙酰轉移酶（N-terminalacetyltransfe-rases，NATs）的作用有著密切的關聯，在151例FAP中NAT1*10基因存在缺失，晚期接近癌變的患者NAT2等位基因存在“突變密集區”并與高結直腸癌風險相關。雖然NATs可能不是FAP發生的決定性因素，但NAT1和NAT2變異者FAP患病風險增加了2倍以上，在一定程度上揭示了NATs（ARD1）在結直腸癌發生發展中發揮了重要的作用。另外，Xu等[16]研究發現，N-乙酰基轉移酶的催化亞基ARD1可以正向調控粒細胞白血病1（myeloid cell leukemia-1，MCL1）的表達，同時MCL1表達量與結腸癌的病灶大小呈正相關關系。ARD1不光與結直腸癌的病灶大小相關，也與結直腸癌的診斷及療效的檢測存在一定的關聯。余敏等[17]通過對共計115例不同腫瘤觀察對象采用自制人體hARD1抗血清處理后，顯示其在結直腸癌中呈高表達，接受5-FU處理后其表達降低，由此可見，hARDl有成為結直腸癌潛在標志物的可能性及其治療后療效監測指標理論上的可行性。最近還有觀點[18]認為，ARD1在細胞的氧化應激反應中同樣扮演了重要角色，是改善癌細胞的氧化損傷的潛在目標。
3 hARD1與結直腸癌細胞凋亡和增殖的關系
細胞凋亡（cell apoptosis）是細胞對環境的生理性病理性刺激信號，以及環境條件的變化或緩和性損傷產生的應答有序變化的死亡過程，觸發細胞凋亡的誘因有：DNA損傷、生長因子撤除、FasL以及腫瘤壞死因子（TNF）作用、細胞間接觸等[19]。細胞發生凋亡時會伴有細胞皺縮、核染色質凝聚、Caspases激活、細胞膜通透性改變、染色體的DNA降解等一系列形態、生化及分子生物學的變化[20-21]。腫瘤的發生不僅是細胞過度增生的結果，與細胞凋亡通路受阻也有著極大的關系。Hickman [22]提出，誘導細胞凋亡可以作為腫瘤研究領域的新的手段和目標。Park等[23-25]學者通過實驗證實了hARD1可以調控結直腸癌細胞凋亡，還對hARD1調控凋亡的機理也進行了深入研究。Park認為hARD1結合受體相關蛋白1（receptor associated protein 1）進而可調節阿霉素誘導的NF-kB亞單位RelA/p65乙酰化的活性，進一步來調節抗凋亡蛋白MCL1的活性，從而抑制結直腸癌細胞的凋亡；在柔紅霉素（daunorubicin，DNR）誘導凋亡的Caspase途徑中發現，hARD1及NATH被裂解，致使NATs活性降低40%～80%。Fisher等[24]利用RNA干擾技術抑制He p-G2細胞株hARD1的表達, 隨即通過基因芯片技術證實hARD1沉默具有誘導凋亡作用，并發現hARD1沉默導致基因變化趨勢與在缺氧條件下基因的變化趨勢大致相同；Perez等[25]發現，在結直腸癌腫瘤形成過程中，野生型p53的活性是由各種乙酰轉移酶和去乙酰化酶調節而達到抗凋亡能力，p53調控啟動子和轉錄活性過程中，hARD1在其中可能充當了重要角色。
細胞增殖（cell proliferation）是生活細胞的重要生理功能之一，以分裂的方式進行增殖，是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎[26]。細胞周期的時序受到不同基因的嚴格調控，其調控的基因主要含有：細胞周期基因、癌基因（ras家族、src家族、myc家族等）等，故Hartwell等[27]認為，腫瘤的發生本質上是細胞的失控性生長，屬于細胞周期性疾病。hARD1作為一種乙酰轉移酶在細胞的生長和分化中發揮重要的調節作用，但hARD1調控腫瘤細胞的增殖過程中相關酶和生物活性調節的報道甚少，具體機理目前尚未形成統一的共識。Park等[4]發現，在增殖較旺盛細胞的細胞核內S期ARD1呈現高表達，核定位信號（nuclear localization signal，NLS）敲除使hARD1不再進入細胞核，導致細胞形態變化和細胞生長障礙；一但外源性NLS激活hARD1后細胞會逐漸恢復正常形態。Foyn等[28]以NAT特異性的底物為指導，人工合成了3類底物類似物CoA-Ac-SES4、CoA-Ac-EEE4和CoA-Ac-MLG7作為選擇性抑制劑，證實hARD1（hnaa10）能抑制癌細胞的增殖而導致細胞死亡，也能增加癌細胞對藥物誘導的細胞毒作用。Seo等[29]將不同功能片段mRNA人工剪接而成的hARD1注入小鼠體內，通過研究其細胞活動并將hARD1從HeLa細胞分離和測序，序列比對發現，和小鼠ard1（mard1）相比，hARD1變異比較少見，hARD1最常見的形式hARD1（131）具有改變的閱讀框，編碼為46 bp缺失基因序列；hARD1（235）通過上調細胞周期蛋白D1刺激細胞增殖，然而hARD1（131）卻不能影響cyclin D1的表達，也不能影響細胞的生長。此外，hARD1（131）和hARD1（235）亞細胞定位也不同，hARD1（131）主要分布在細胞核，而hARD1（235）主要定位于胞漿。Seo等[30]的動物實驗還表明，mard1（225）在缺氧條件下可以抑制腫瘤血管生成并可降低缺氧誘導因子（HIF-1α）α穩定性；Kuo等[6]從另外的視角研究了ARD1與腫瘤的關系，ARD1抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的活性來抑制細胞增殖并增加細胞自噬，從而抑制腫瘤細胞的發生和發展，ard1-tsc2-mtor軸的失調可能會導致癌癥的發展。
4 hARD1對結直腸癌診療的影響
進展期結直腸癌明確診斷主要靠病理學檢查，而對于早期的患者尚無確切有效的方法。Liu等[31]認為，多個不同腫瘤標志物的組合能更好地提示患者腫瘤生物學特點，將225例臨床免疫組化確診為結腸腺癌的樣本隨訪10年，結合γ-突觸核蛋白（SNCG）、人類同源物Piwi（Hiwi）、肝再生磷酸酶-3（PRL-3）、停滯缺陷蛋白1以及同源物（hARD1）5種生物標志物進行單因素和多因素分析顯示：陽性率SNCG為32.0%（72/225）、聯合SNCG/Hiwi/PRL-3/ARD1為76.9%（173/225），隨訪發現隨著ARD含量的升高隨訪患者5年生存率降低。結直腸癌的基本治療方法有手術、化療、放療、生物治療等，各有其利弊。目前研究hARD1對結直腸癌治療的影響甚少，大多圍繞其影響化療展開。Yamada等[32]認為，進展期結直腸癌的5年生存率不足5%，治療效果差強人意最重要的原因是對化療的反應不佳，因此以對疾病產生機理的認識來指導臨床治療是目前科研上亟待解決的問題。白松等[33]發現，ARD1作為靶點抑制時結直腸癌細胞周期會被抑制，G2/M期DNA含量最高；而恰好有研究[34]表明，奧沙利鉑（L-OHP）對處于G2/M期的細胞最為敏感，可以推測認為，ARD1基因沉默可增加奧沙利鉑的敏感性，但具體機理及調控因子有待進一步研究。Wang等[35]研究認為，hARD1蛋白質與轉移性乳腺癌表型和不良預后相關，應用免疫組織化學染色法檢測82例浸潤性導管癌、159例纖維腺瘤、66例乳腺增生及19例炎性乳腺疾病的ARD1蛋白表達，結果其表達陽性率分別為61.0%（50/82）、54.7%（87/159）、37.9%（25/66）和36.8%（7/19）。提示高ARD1的表達與乳腺癌（相對危險度=1.32，P < 0.005）呈正相關關系。此外，在癌癥患者ARD1蛋白的表達水平與淋巴結轉移明顯相關，這為我們今后研究hARD1和結直腸癌發生發展的關系乃至指導結直腸癌的診治提供了方向。
綜上所述，hARD1在促進結直腸癌細胞凋亡和增殖的過程中通過不同的途徑發揮著生物學功能，hARD1可能通過多途徑的綜合效應發揮生物學效應，但其具體的作用機理目前尚未明確，有待進一步深入研究[36]。根據目前的研究，hARD1在治療上主要是通過誘導癌細胞凋亡或（和）降低癌細胞的增殖能力，從而達到延緩癌組織的發生進程進而抵抗癌細胞[37]。相信隨著研究的深入會發現其潛在的臨床應用價值。
5 結語
結直腸癌目前尚無特殊有效的治療方法，hARD1蛋白可能成為治療本疾病的一個潛在靶點而受到很多學者的關注。其相關性研究目前存在主要問題有：①hARD1能否獨立發揮比較穩定的生物學功能，是否有特異的方法或者更為確切的方法檢測其在癌組織中的表達, 能否確切穩定地成為腫瘤標志物。②目前檢測方法、實驗條件的差異導致實驗結果存在爭議。③hARD1的分布可能隨著腫瘤的生長而發生改變，不同時期的組織標本的表達水平可能存在差異，是否對這種差異有合理的解釋。④hARD1與結直腸癌的發生、進展及治療的機理在廣度和深度上有待進一步研究，尤其是動物實驗目前有待深化拓展。hARD1的研究目前朝著與臨床腫瘤治療的方向發展，相信不久的將來通過更為系統科學的實驗方法進一步認清其與結直腸癌之間的聯系，找到hARDl的特異性抑制劑或者成為一個比較有效的輔助治療手段，為臨床診斷和治療腫瘤提供新的方法。
停滯缺陷蛋白1 (arrest defective 1，ARD1)蛋白是一種乙酰基轉移酶（acetyl transferase），人ARD1(hARD1)與酵母N-乙酰基轉移酶基因ARDl是同源基因。ARD1與多種腫瘤的發生發展有著密切的關系，比如參與腫瘤細胞和組織的增殖、分化、凋亡、耐藥等。現擬對ARD1抗結直腸癌作用機理的研究進展作一綜述。
1 ARD1的生物化學特性
hARD1是一種乙酰基轉移酶，它定位于人染色體xq28，有7個外顯子，編碼氨基酸235個，全長5 019 bp [1]。在過去的50年中，其功能已經開始慢慢地被闡明，主要包括調節蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白的穩定性、蛋白質的功能、蛋白質定位到特定的細胞器等[2-3]。ARD1最初在酵母中被發現，酵母ARD1是組成N2乙酰基轉移酶NatA（NAT1、ARD1、NAT5）3個亞基中的1個亞基。ARD1主要發揮N-α-乙酰轉移酶的作用，其可以將乙酰coA的乙酰基（-CO-CH3）轉移到新生多肽N端，從而影響蛋白的功能、穩定性及與其他蛋白分子的聯系和進一步修飾，也在細胞周期的調節中發揮重要作用[4-5]。在哺乳動物中ARD1存在兩種活性：賴氨酸殘基的ε氨基和N端的α氨基乙酰化的活性[6]，ARD1所介導的乙酰化普遍存在于真核細胞多種組織的蛋白成分中，它在許多生物過程中起翻譯后修飾的作用，如DNA修復，蛋白質的穩定性和核轉位，蛋白質間的相互作用以及細胞增殖、凋亡, 細胞自噬和神經發展等；此外，在腫瘤的發展中也起著至關重要的作用。近年來，有研究[7-8]發現，人類N-乙酰基轉移酶ARD1（hARD1）與腫瘤存在高度相關性，并在諸多腫瘤組織和細胞中呈現高表達狀態。
2 hARD1與結直腸癌的相關性
腫瘤的發生是一個多因素、多階段緩慢發展的過程，在這個過程中癌細胞逐漸獲取如抗凋亡、永生化復制能力、侵犯鄰近組織、向其他組織轉移、破壞免疫系統功能等異于正常組織細胞的功能[9]。
近年來諸多研究[10-12]均證實hARD1與諸如肺癌、乳腺癌、結直腸癌、前列腺癌、甲狀腺癌等多種腫瘤的發生高度相關。早在2005年，Arnesen等[13]研究發現，相比于癌旁組織，hARD1在癌組織中呈現高表達狀態。隨后，Ren等[14]在mRNA和蛋白質水平證實hARD1在結直腸癌組織中呈高表達，并提出將其作為結直腸癌潛在標志物。此外，在SW620、HCT-8等結直腸腺癌細胞株中，hARD1也呈現高表達狀態[11]。值得一提的是，hARD1還與結直腸癌癌前病變也存在一定的相關性。Crabtree等[15]的研究表明，人體結腸家族性腺瘤性息肉病（familial adenomatous polyposis，FAP）的嚴重程度在一定程度上與修飾基因端乙酰轉移酶（N-terminalacetyltransfe-rases，NATs）的作用有著密切的關聯，在151例FAP中NAT1*10基因存在缺失，晚期接近癌變的患者NAT2等位基因存在“突變密集區”并與高結直腸癌風險相關。雖然NATs可能不是FAP發生的決定性因素，但NAT1和NAT2變異者FAP患病風險增加了2倍以上，在一定程度上揭示了NATs（ARD1）在結直腸癌發生發展中發揮了重要的作用。另外，Xu等[16]研究發現，N-乙酰基轉移酶的催化亞基ARD1可以正向調控粒細胞白血病1（myeloid cell leukemia-1，MCL1）的表達，同時MCL1表達量與結腸癌的病灶大小呈正相關關系。ARD1不光與結直腸癌的病灶大小相關，也與結直腸癌的診斷及療效的檢測存在一定的關聯。余敏等[17]通過對共計115例不同腫瘤觀察對象采用自制人體hARD1抗血清處理后，顯示其在結直腸癌中呈高表達，接受5-FU處理后其表達降低，由此可見，hARDl有成為結直腸癌潛在標志物的可能性及其治療后療效監測指標理論上的可行性。最近還有觀點[18]認為，ARD1在細胞的氧化應激反應中同樣扮演了重要角色，是改善癌細胞的氧化損傷的潛在目標。
3 hARD1與結直腸癌細胞凋亡和增殖的關系
細胞凋亡（cell apoptosis）是細胞對環境的生理性病理性刺激信號，以及環境條件的變化或緩和性損傷產生的應答有序變化的死亡過程，觸發細胞凋亡的誘因有：DNA損傷、生長因子撤除、FasL以及腫瘤壞死因子（TNF）作用、細胞間接觸等[19]。細胞發生凋亡時會伴有細胞皺縮、核染色質凝聚、Caspases激活、細胞膜通透性改變、染色體的DNA降解等一系列形態、生化及分子生物學的變化[20-21]。腫瘤的發生不僅是細胞過度增生的結果，與細胞凋亡通路受阻也有著極大的關系。Hickman [22]提出，誘導細胞凋亡可以作為腫瘤研究領域的新的手段和目標。Park等[23-25]學者通過實驗證實了hARD1可以調控結直腸癌細胞凋亡，還對hARD1調控凋亡的機理也進行了深入研究。Park認為hARD1結合受體相關蛋白1（receptor associated protein 1）進而可調節阿霉素誘導的NF-kB亞單位RelA/p65乙酰化的活性，進一步來調節抗凋亡蛋白MCL1的活性，從而抑制結直腸癌細胞的凋亡；在柔紅霉素（daunorubicin，DNR）誘導凋亡的Caspase途徑中發現，hARD1及NATH被裂解，致使NATs活性降低40%～80%。Fisher等[24]利用RNA干擾技術抑制He p-G2細胞株hARD1的表達, 隨即通過基因芯片技術證實hARD1沉默具有誘導凋亡作用，并發現hARD1沉默導致基因變化趨勢與在缺氧條件下基因的變化趨勢大致相同；Perez等[25]發現，在結直腸癌腫瘤形成過程中，野生型p53的活性是由各種乙酰轉移酶和去乙酰化酶調節而達到抗凋亡能力，p53調控啟動子和轉錄活性過程中，hARD1在其中可能充當了重要角色。
細胞增殖（cell proliferation）是生活細胞的重要生理功能之一，以分裂的方式進行增殖，是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎[26]。細胞周期的時序受到不同基因的嚴格調控，其調控的基因主要含有：細胞周期基因、癌基因（ras家族、src家族、myc家族等）等，故Hartwell等[27]認為，腫瘤的發生本質上是細胞的失控性生長，屬于細胞周期性疾病。hARD1作為一種乙酰轉移酶在細胞的生長和分化中發揮重要的調節作用，但hARD1調控腫瘤細胞的增殖過程中相關酶和生物活性調節的報道甚少，具體機理目前尚未形成統一的共識。Park等[4]發現，在增殖較旺盛細胞的細胞核內S期ARD1呈現高表達，核定位信號（nuclear localization signal，NLS）敲除使hARD1不再進入細胞核，導致細胞形態變化和細胞生長障礙；一但外源性NLS激活hARD1后細胞會逐漸恢復正常形態。Foyn等[28]以NAT特異性的底物為指導，人工合成了3類底物類似物CoA-Ac-SES4、CoA-Ac-EEE4和CoA-Ac-MLG7作為選擇性抑制劑，證實hARD1（hnaa10）能抑制癌細胞的增殖而導致細胞死亡，也能增加癌細胞對藥物誘導的細胞毒作用。Seo等[29]將不同功能片段mRNA人工剪接而成的hARD1注入小鼠體內，通過研究其細胞活動并將hARD1從HeLa細胞分離和測序，序列比對發現，和小鼠ard1（mard1）相比，hARD1變異比較少見，hARD1最常見的形式hARD1（131）具有改變的閱讀框，編碼為46 bp缺失基因序列；hARD1（235）通過上調細胞周期蛋白D1刺激細胞增殖，然而hARD1（131）卻不能影響cyclin D1的表達，也不能影響細胞的生長。此外，hARD1（131）和hARD1（235）亞細胞定位也不同，hARD1（131）主要分布在細胞核，而hARD1（235）主要定位于胞漿。Seo等[30]的動物實驗還表明，mard1（225）在缺氧條件下可以抑制腫瘤血管生成并可降低缺氧誘導因子（HIF-1α）α穩定性；Kuo等[6]從另外的視角研究了ARD1與腫瘤的關系，ARD1抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的活性來抑制細胞增殖并增加細胞自噬，從而抑制腫瘤細胞的發生和發展，ard1-tsc2-mtor軸的失調可能會導致癌癥的發展。
4 hARD1對結直腸癌診療的影響
進展期結直腸癌明確診斷主要靠病理學檢查，而對于早期的患者尚無確切有效的方法。Liu等[31]認為，多個不同腫瘤標志物的組合能更好地提示患者腫瘤生物學特點，將225例臨床免疫組化確診為結腸腺癌的樣本隨訪10年，結合γ-突觸核蛋白（SNCG）、人類同源物Piwi（Hiwi）、肝再生磷酸酶-3（PRL-3）、停滯缺陷蛋白1以及同源物（hARD1）5種生物標志物進行單因素和多因素分析顯示：陽性率SNCG為32.0%（72/225）、聯合SNCG/Hiwi/PRL-3/ARD1為76.9%（173/225），隨訪發現隨著ARD含量的升高隨訪患者5年生存率降低。結直腸癌的基本治療方法有手術、化療、放療、生物治療等，各有其利弊。目前研究hARD1對結直腸癌治療的影響甚少，大多圍繞其影響化療展開。Yamada等[32]認為，進展期結直腸癌的5年生存率不足5%，治療效果差強人意最重要的原因是對化療的反應不佳，因此以對疾病產生機理的認識來指導臨床治療是目前科研上亟待解決的問題。白松等[33]發現，ARD1作為靶點抑制時結直腸癌細胞周期會被抑制，G2/M期DNA含量最高；而恰好有研究[34]表明，奧沙利鉑（L-OHP）對處于G2/M期的細胞最為敏感，可以推測認為，ARD1基因沉默可增加奧沙利鉑的敏感性，但具體機理及調控因子有待進一步研究。Wang等[35]研究認為，hARD1蛋白質與轉移性乳腺癌表型和不良預后相關，應用免疫組織化學染色法檢測82例浸潤性導管癌、159例纖維腺瘤、66例乳腺增生及19例炎性乳腺疾病的ARD1蛋白表達，結果其表達陽性率分別為61.0%（50/82）、54.7%（87/159）、37.9%（25/66）和36.8%（7/19）。提示高ARD1的表達與乳腺癌（相對危險度=1.32，P < 0.005）呈正相關關系。此外，在癌癥患者ARD1蛋白的表達水平與淋巴結轉移明顯相關，這為我們今后研究hARD1和結直腸癌發生發展的關系乃至指導結直腸癌的診治提供了方向。
綜上所述，hARD1在促進結直腸癌細胞凋亡和增殖的過程中通過不同的途徑發揮著生物學功能，hARD1可能通過多途徑的綜合效應發揮生物學效應，但其具體的作用機理目前尚未明確，有待進一步深入研究[36]。根據目前的研究，hARD1在治療上主要是通過誘導癌細胞凋亡或（和）降低癌細胞的增殖能力，從而達到延緩癌組織的發生進程進而抵抗癌細胞[37]。相信隨著研究的深入會發現其潛在的臨床應用價值。
5 結語
結直腸癌目前尚無特殊有效的治療方法，hARD1蛋白可能成為治療本疾病的一個潛在靶點而受到很多學者的關注。其相關性研究目前存在主要問題有：①hARD1能否獨立發揮比較穩定的生物學功能，是否有特異的方法或者更為確切的方法檢測其在癌組織中的表達, 能否確切穩定地成為腫瘤標志物。②目前檢測方法、實驗條件的差異導致實驗結果存在爭議。③hARD1的分布可能隨著腫瘤的生長而發生改變，不同時期的組織標本的表達水平可能存在差異，是否對這種差異有合理的解釋。④hARD1與結直腸癌的發生、進展及治療的機理在廣度和深度上有待進一步研究，尤其是動物實驗目前有待深化拓展。hARD1的研究目前朝著與臨床腫瘤治療的方向發展，相信不久的將來通過更為系統科學的實驗方法進一步認清其與結直腸癌之間的聯系，找到hARDl的特異性抑制劑或者成為一個比較有效的輔助治療手段，為臨床診斷和治療腫瘤提供新的方法。