引用本文： 張立海, 夏賓, 王嬌, 黃文麗, 王躍生, 劉春宇, 譚柏宏, 尹彥斌, 趙冰冰. Roux-en-Y胃旁路術對2型糖尿病大鼠炎癥因子及脂肪組織胰島素受體底物-1/2表達影響的實驗研究. 中國普外基礎與臨床雜志, 2015, 22(12): 1460-1465. doi: 10.7507/1007-9424.20150382 復制
2型糖尿病（T2DM）的發病率不斷升高，給人類的身心健康帶來了嚴重損害[1]。Roux-en-Y胃轉流（Roux-en-Y gastric bypass，RYGB）術治療T2DM療效確切并能獲得長期治愈，是目前手術治療T2DM應用最廣泛的手術方式[2-3]。目前臨床和基礎研究表明，RYGB治療T2DM的相關機制與其對胰島素效應靶器官胰島素抵抗的改善關系密切，但該術式改善機體胰島素抵抗的具體途徑仍需要更深入的研究。胰島素抵抗按作用部位可進一步分為脂肪、肝臟、胰島細胞和骨骼肌的胰島素抵抗[4]。本研究以Sprague-Dawley（SD）大鼠為實驗對象，在T2DM模型成功建立后，觀測RYGB對T2DM大鼠的血糖、血清炎癥因子的調節作用、對脂肪組織胰島素抵抗和胰島素受體底物（IRS）-1和IRS-2表達的影響，研究RYGB治療T2DM及改善脂肪組織胰島素抵抗的相關機制。
1 材料與方法
1.1 模型制備
健康雄性SD大鼠50只，體質量210～260 g，SPF級，許可證號SCXK魯20130001，購于吉林大學動物實驗中心。大鼠經適應性喂養1周，隨機數字表法選取40只行高糖高脂飲食（豬油18%+蔗糖20%+蛋黃3%+基礎飼料59%）喂養4周，再行1%鏈脲佐菌素（STZ）溶液低劑量（35 mg/kg）腹腔內注射，建立T2DM大鼠模型；剩余10只大鼠給予正常飲食喂養，4周后行等量生理鹽水腹腔內注射；72 h和1周后禁食12 h，尾部靜脈采血測隨機血糖，行口服葡萄糖耐量試驗（OGTT），空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）≥16.7 mmol/L或OGTT≥11.1 mmol/L為成功模型；成功模型大鼠單籠、標準大鼠飼料喂養，自然晝夜循環，室溫（21±2）℃。
1.2 動物分組
完全隨機區段分組法將34只滿足T2DM模型條件的大鼠分為3組：T2MD-RYGB組（n=14）、T2MD組（n=10）及T2MD-假手術組（n=10），將正常飼養大鼠設為正常對照組（n=10）。T2MD-RYGB組及T2MD-假手術組大鼠分別行RYGB及胃十二指腸離斷原位吻合術干預[5]。其中T2MD-RYGB大鼠術后1周內有4只死亡，術后2～4周內有2只死亡，總體死亡率為42.9%，大鼠死后均行尸檢發現，3只大鼠存在腸梗阻、小腸壞死、腹腔感染（其中1只大鼠出現腸扭轉），2只大鼠出現吻合口漏，1只大鼠出現病態消瘦，全腸壁水腫。
1.3 檢測指標
①分別于術前1 d及術后第1、4、8周（未行手術干預的大鼠與手術大鼠同步檢測）將大鼠隔夜禁食，眶靜脈采血用微量血糖儀測量FPG水平。②應用大鼠ELISA試劑盒（美國IBL公司）測定空腹血清胰島素（FINS）、腫瘤壞死因子（TNF）-α、C反應蛋白（CRP）和游離脂肪酸（FFA）含量。③計算穩態模型胰島素抵抗（homestasis model assessment for insulin resistance，HOMA-IR）指數=FINS（mU/L）×FPG（mmol/L）/22.5，脂肪組織胰島素抵抗（adipose tissue insulin resistance，Adipo-IR）指數=禁食后胰島素（mU/L）×非酯化脂肪酸（mmol/L）。④應用大鼠ELISA試劑盒測定術后第8周時大鼠附睪脂肪組織中IRS-1和IRS-2蛋白表達水平。
1.4 統計學方法
運用SPSS 19.0軟件處理數據，所有檢測結果統一采用均數±標準差（
2 結果
2.1 RYGB對T2DM大鼠FPG水平的影響
①術前，T2DM成模大鼠較正常大鼠FPG、OGTT水平明顯升高（P < 0.01），T2DM大鼠各組間FPG、OGTT水平接近（P > 0.05）。②術后各時間點，T2MD-RYGB組大鼠FPG、OGTT逐漸降低，明顯低于T2MD-假手術組和T2MD組相應時相的水平（P < 0.05），但高于正常對照組水平（P < 0.05）。③與術前比較，T2MD-RYGB組大鼠術后各時間點FPG、OGTT水平均明顯下降（P < 0.05），T2MD-假手術組、T2MD組、正常對照組FPG、OGTT水平均在較接近的范圍內波動，差異無統計學意義（P > 0.05），見表 1。
表1
各組大鼠手術前、后FPG水平比較（mmol/L，2.2 RYGB對T2DM大鼠血清TNF-α、CRP、FFA水平的影響
①術前及術后第1周，T2DM成模大鼠各組間血清TNF-α、CRP、FFA含量差異無統計學意義（P > 0.05），但均明顯高于正常大鼠水平（P < 0.05）。術后第4周、第8周時，T2MD-RYGB組大鼠各指標逐漸降低，明顯低于T2MD-假手術組和T2MD組（P < 0.05），但高于正常對照組水平（P < 0.05）。②T2MD-RYGB組術后第1周血清TNF-α、CRP、FFA含量有所下降，與術前比較差異無統計學意義（P > 0.05），術后第4周、第8周時各指標繼續降低，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）。其余3組手術前后各指標變化不明顯（P > 0.05），見表 2～4。
表2
各組大鼠TNF-α水平比較（ng/L，
表3
各組大鼠CRP水平比較（μg/L，
表4
各組大鼠FFA水平比較（μmol/L，2.3 RYGB對T2DM大鼠血清FINS水平的影響
T2MD-RYGB組大鼠術后第1周和第4周時血清FINS水平比術前有所下降，但差異無統計學意義（P > 0.05），術后第8周時FINS水平繼續降低，達到正常對照組水平，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）。其余3組大鼠手術前后血清FINS水平比較接近（P > 0.05），見表 5。
表5
各組大鼠FINS水平比較（mU/L，2.4 手術前、后各組大鼠HOMA-IR、Adipo-IR指數變化
①術前，T2DM成模大鼠HOMA-IR、Adipo-IR指數均明顯高于正常大鼠（P < 0.05）。②T2MD-RYGB組大鼠術后第4周和第8周時HOMA-IR、Adipo-IR指數明顯低于T2MD組和T2MD-假手術組（P < 0.05）。③T2MD-RYGB組大鼠術后第4周和第8周時HOMA-IR、Adipo-IR較術前明顯下降（P < 0.05）；其余各組手術前后HOMA-IR、Adipo-IR指數較接近（P > 0.05），見表 6。
表6
各組大鼠手術前、后HOMA-IR、Adipo-IR指數比較（2.5 RYGB對大鼠附睪脂肪組織中IRS-1、IRS-2蛋
白表達水平的影響手術后第8周時T2MD組、T2MD-假手術組大鼠較正常對照組大鼠附睪脂肪組織胰島素受體底物（IRS-1和IRS-2）含量明顯減少（P < 0.05），T2MD-RYGB組大鼠術后附睪脂肪組織中IRS-1、IRS-2蛋白含量較T2MD組、T2MD-假手術組明顯增加（P < 0.05），但均明顯低于正常對照組水平（P < 0.05），見圖 1。
圖1
各組大鼠附睪脂肪組織中IRS-1和IRS-2蛋白表達水平。1A：IRS-1；1B：IRS-2。與正常對照組比較，*P < 0.05；與T2MD-RYGB組比較，△ P < 0.05
2.6 各組大鼠術后第8周時的附睪脂肪組織中IRS-1和IRS-2表達水平分別與其對應血清FPG、FFA、TNF-α、CRP水平及Adipo-IR指數的關系
T2MD成模各組大鼠術后第8周時的附睪脂肪組織中IRS-1/2表達與血清FPG、TNF-α、CRP、FFA水平及Adipo-IR指數均呈負相關，正常對照組各指標間無確切相關性。見表 7。
表7
各組IRS-1和IRS-2蛋白表達水平分別與其對應血清FPG、FFA、TNF-α、CRP水平及Adipo-IR指數的關系
3 討論
3.1 RYGB與胰島素抵抗
近年來大量數據[6-9]表明，RYGB治療T2MD療效顯著并能達到長期治愈，但RYGB治療T2DM的具體機制仍需要進一步闡明[10]。目前有研究[11]證實，RYGB對T2DM的治療作用與機體胰島素抵抗狀態的緩解密切相關，該術式是否可通過改善脂肪組織胰島素抵抗、降低機體炎癥因子水平進而改善機體胰島素抵抗? RYGB降低脂肪組織內胰島素抵抗的具體機制是否與上調IRS-1/2表達水平、改善胰島素磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）信號轉導通路關系密切?本實驗通過高糖高脂加STZ誘導T2DM大鼠模型，并對其行RYGB干預，通過觀察術后各指標改變情況，驗證以上假設。
3.2 炎癥介質與胰島素抵抗
機體胰島β細胞功能受損和組織胰島素抵抗是T2DM的主要病理、生理特征，其中后者是T2DM的核心機制[12]。胰島素抵抗是指在相同胰島素劑量條件下不能獲得同等劑量的反應或臨床效果[13]。文獻[14]數據表明，機體亞臨床抗原抗體反應與胰島素效應器官胰島素抵抗存在內在聯系。一方面，胰島素效應器官PI3K信號轉導通路受阻，可引起組織促炎因子生成，從而提高機體炎癥介質水平；CRP、單核細胞趨化蛋白-1、TNF-α、IL-6等多種炎癥介質可介導胰島素靶器官產生亞臨床炎癥反應[15]，使胰島素PI3K信號轉導通路受阻，引起組織胰島素抵抗的發生[16]。另一方面，一系列激酶在各種炎性細胞長期作用下逐漸被激活，使胰島素受體底物酪氨酸位點磷酸化受阻，并誘導其蘇、絲氨酸位點異常磷酸化，最終使得胰島素相關信號傳導能力下降，進一步導致機體胰島素抵抗[17]。本研究實驗數據顯示，RYGB術前，T2DM成模大鼠較正常對照大鼠血清TNF-α、CRP水平明顯增高（P < 0.05），T2DM大鼠各組間TNF-α、CRP水平接近（P > 0.05）；T2MD-RYGB組術后第1周血清TNF-α、CRP含量有所下降，與術前比較差異無統計學意義（P > 0.05），術后第4周、第8周時各指標繼續降低，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）；其余3組手術前后各指標變化不明顯（P > 0.05）。表明RYGB可明顯降低T2DM大鼠血清炎癥介質水平，緩解胰島素靶器官亞臨床炎癥反應，使胰島素PI3K信號轉導通路得到改善，從而降低機體胰島素抵抗[18]。
3.3 脂肪組織與胰島素抵抗
在遺傳因素或環境因素的作用下，機體脂肪組織功能受損[19]，對脂肪組織產生脂毒性作用，造成脂肪分解出不受控制的脂肪酸，以脂肪肝等脂質異位過度沉積、全身胰島素抵抗和炎癥為特征[20]。而脂肪細胞瘦素抵抗、脂聯素和抵抗素分泌水平降低或活性減弱、骨豁肌細胞甘油三酯含量增多等[21-22]，通過降低胰島素受體及其底物的合成和分泌水平[23]，從而阻礙胰島素敏感組織PI3K信號轉導通路的激活，導致胰島素抵抗形成[24-25]。本研究中，RYGB術前，T2DM成模大鼠較正常對照大鼠血清FFA、HOMA-IR、Adipo-IR水平明顯增高（P < 0.05），T2DM鼠各組間FFA、HOMA-IR、Adipo-IR水平接近（P > 0.05）。T2MD-RYGB組術后第1周血清FFA、HOMA-IR、Adipo-IR含量有所下降，與術前比較差異無統計學意義（P > 0.05），術后第4周、第8周時各指標繼續降低，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）；其余3組手術前后各指標變化不明顯（P > 0.05）。參考以上數據可知，RYGB可明顯降低T2DM大鼠血清FFA水平，機體胰島素抵抗得到明顯改善，是RYGB治療T2DM的可能機制。
3.4 脂肪組織IRS-1/-2含量與胰島素抵抗的相關性分析
本研究中，RYGB術后8周T2DM大鼠脂肪組織內IRS-1/2表達水平明顯提高，組織胰島素敏感性顯著提高，血清炎癥因子減少，機體胰島素抵抗得到明顯改善，血糖控制良好。相關分析結果顯示：各模型組大鼠IRS-1/2含量與血清FPG、TNF-α、CRP、FFA、Adipo-IR水平均呈負相關（P < 0.05）；正常對照組各指標間無明顯相關性（P > 0.05）。
綜上所述，RYGB可通過調節脂肪組織內IRS-1/2表達水平，改善組織胰島素PI3K信號轉導通路，從而調節脂肪組織胰島素抵抗，減少血清炎癥因子及FFA表達，最終降低機體胰島素抵抗水平，是RYGB治療T2DM的可能機制。
2型糖尿病（T2DM）的發病率不斷升高，給人類的身心健康帶來了嚴重損害[1]。Roux-en-Y胃轉流（Roux-en-Y gastric bypass，RYGB）術治療T2DM療效確切并能獲得長期治愈，是目前手術治療T2DM應用最廣泛的手術方式[2-3]。目前臨床和基礎研究表明，RYGB治療T2DM的相關機制與其對胰島素效應靶器官胰島素抵抗的改善關系密切，但該術式改善機體胰島素抵抗的具體途徑仍需要更深入的研究。胰島素抵抗按作用部位可進一步分為脂肪、肝臟、胰島細胞和骨骼肌的胰島素抵抗[4]。本研究以Sprague-Dawley（SD）大鼠為實驗對象，在T2DM模型成功建立后，觀測RYGB對T2DM大鼠的血糖、血清炎癥因子的調節作用、對脂肪組織胰島素抵抗和胰島素受體底物（IRS）-1和IRS-2表達的影響，研究RYGB治療T2DM及改善脂肪組織胰島素抵抗的相關機制。
1 材料與方法
1.1 模型制備
健康雄性SD大鼠50只，體質量210～260 g，SPF級，許可證號SCXK魯20130001，購于吉林大學動物實驗中心。大鼠經適應性喂養1周，隨機數字表法選取40只行高糖高脂飲食（豬油18%+蔗糖20%+蛋黃3%+基礎飼料59%）喂養4周，再行1%鏈脲佐菌素（STZ）溶液低劑量（35 mg/kg）腹腔內注射，建立T2DM大鼠模型；剩余10只大鼠給予正常飲食喂養，4周后行等量生理鹽水腹腔內注射；72 h和1周后禁食12 h，尾部靜脈采血測隨機血糖，行口服葡萄糖耐量試驗（OGTT），空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）≥16.7 mmol/L或OGTT≥11.1 mmol/L為成功模型；成功模型大鼠單籠、標準大鼠飼料喂養，自然晝夜循環，室溫（21±2）℃。
1.2 動物分組
完全隨機區段分組法將34只滿足T2DM模型條件的大鼠分為3組：T2MD-RYGB組（n=14）、T2MD組（n=10）及T2MD-假手術組（n=10），將正常飼養大鼠設為正常對照組（n=10）。T2MD-RYGB組及T2MD-假手術組大鼠分別行RYGB及胃十二指腸離斷原位吻合術干預[5]。其中T2MD-RYGB大鼠術后1周內有4只死亡，術后2～4周內有2只死亡，總體死亡率為42.9%，大鼠死后均行尸檢發現，3只大鼠存在腸梗阻、小腸壞死、腹腔感染（其中1只大鼠出現腸扭轉），2只大鼠出現吻合口漏，1只大鼠出現病態消瘦，全腸壁水腫。
1.3 檢測指標
①分別于術前1 d及術后第1、4、8周（未行手術干預的大鼠與手術大鼠同步檢測）將大鼠隔夜禁食，眶靜脈采血用微量血糖儀測量FPG水平。②應用大鼠ELISA試劑盒（美國IBL公司）測定空腹血清胰島素（FINS）、腫瘤壞死因子（TNF）-α、C反應蛋白（CRP）和游離脂肪酸（FFA）含量。③計算穩態模型胰島素抵抗（homestasis model assessment for insulin resistance，HOMA-IR）指數=FINS（mU/L）×FPG（mmol/L）/22.5，脂肪組織胰島素抵抗（adipose tissue insulin resistance，Adipo-IR）指數=禁食后胰島素（mU/L）×非酯化脂肪酸（mmol/L）。④應用大鼠ELISA試劑盒測定術后第8周時大鼠附睪脂肪組織中IRS-1和IRS-2蛋白表達水平。
1.4 統計學方法
運用SPSS 19.0軟件處理數據，所有檢測結果統一采用均數±標準差（
2 結果
2.1 RYGB對T2DM大鼠FPG水平的影響
①術前，T2DM成模大鼠較正常大鼠FPG、OGTT水平明顯升高（P < 0.01），T2DM大鼠各組間FPG、OGTT水平接近（P > 0.05）。②術后各時間點，T2MD-RYGB組大鼠FPG、OGTT逐漸降低，明顯低于T2MD-假手術組和T2MD組相應時相的水平（P < 0.05），但高于正常對照組水平（P < 0.05）。③與術前比較，T2MD-RYGB組大鼠術后各時間點FPG、OGTT水平均明顯下降（P < 0.05），T2MD-假手術組、T2MD組、正常對照組FPG、OGTT水平均在較接近的范圍內波動，差異無統計學意義（P > 0.05），見表 1。
表1
各組大鼠手術前、后FPG水平比較（mmol/L，2.2 RYGB對T2DM大鼠血清TNF-α、CRP、FFA水平的影響
①術前及術后第1周，T2DM成模大鼠各組間血清TNF-α、CRP、FFA含量差異無統計學意義（P > 0.05），但均明顯高于正常大鼠水平（P < 0.05）。術后第4周、第8周時，T2MD-RYGB組大鼠各指標逐漸降低，明顯低于T2MD-假手術組和T2MD組（P < 0.05），但高于正常對照組水平（P < 0.05）。②T2MD-RYGB組術后第1周血清TNF-α、CRP、FFA含量有所下降，與術前比較差異無統計學意義（P > 0.05），術后第4周、第8周時各指標繼續降低，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）。其余3組手術前后各指標變化不明顯（P > 0.05），見表 2～4。
表2
各組大鼠TNF-α水平比較（ng/L，
表3
各組大鼠CRP水平比較（μg/L，
表4
各組大鼠FFA水平比較（μmol/L，2.3 RYGB對T2DM大鼠血清FINS水平的影響
T2MD-RYGB組大鼠術后第1周和第4周時血清FINS水平比術前有所下降，但差異無統計學意義（P > 0.05），術后第8周時FINS水平繼續降低，達到正常對照組水平，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）。其余3組大鼠手術前后血清FINS水平比較接近（P > 0.05），見表 5。
表5
各組大鼠FINS水平比較（mU/L，2.4 手術前、后各組大鼠HOMA-IR、Adipo-IR指數變化
①術前，T2DM成模大鼠HOMA-IR、Adipo-IR指數均明顯高于正常大鼠（P < 0.05）。②T2MD-RYGB組大鼠術后第4周和第8周時HOMA-IR、Adipo-IR指數明顯低于T2MD組和T2MD-假手術組（P < 0.05）。③T2MD-RYGB組大鼠術后第4周和第8周時HOMA-IR、Adipo-IR較術前明顯下降（P < 0.05）；其余各組手術前后HOMA-IR、Adipo-IR指數較接近（P > 0.05），見表 6。
表6
各組大鼠手術前、后HOMA-IR、Adipo-IR指數比較（2.5 RYGB對大鼠附睪脂肪組織中IRS-1、IRS-2蛋
白表達水平的影響手術后第8周時T2MD組、T2MD-假手術組大鼠較正常對照組大鼠附睪脂肪組織胰島素受體底物（IRS-1和IRS-2）含量明顯減少（P < 0.05），T2MD-RYGB組大鼠術后附睪脂肪組織中IRS-1、IRS-2蛋白含量較T2MD組、T2MD-假手術組明顯增加（P < 0.05），但均明顯低于正常對照組水平（P < 0.05），見圖 1。
圖1
各組大鼠附睪脂肪組織中IRS-1和IRS-2蛋白表達水平。1A：IRS-1；1B：IRS-2。與正常對照組比較，*P < 0.05；與T2MD-RYGB組比較，△ P < 0.05
2.6 各組大鼠術后第8周時的附睪脂肪組織中IRS-1和IRS-2表達水平分別與其對應血清FPG、FFA、TNF-α、CRP水平及Adipo-IR指數的關系
T2MD成模各組大鼠術后第8周時的附睪脂肪組織中IRS-1/2表達與血清FPG、TNF-α、CRP、FFA水平及Adipo-IR指數均呈負相關，正常對照組各指標間無確切相關性。見表 7。
表7
各組IRS-1和IRS-2蛋白表達水平分別與其對應血清FPG、FFA、TNF-α、CRP水平及Adipo-IR指數的關系
3 討論
3.1 RYGB與胰島素抵抗
近年來大量數據[6-9]表明，RYGB治療T2MD療效顯著并能達到長期治愈，但RYGB治療T2DM的具體機制仍需要進一步闡明[10]。目前有研究[11]證實，RYGB對T2DM的治療作用與機體胰島素抵抗狀態的緩解密切相關，該術式是否可通過改善脂肪組織胰島素抵抗、降低機體炎癥因子水平進而改善機體胰島素抵抗? RYGB降低脂肪組織內胰島素抵抗的具體機制是否與上調IRS-1/2表達水平、改善胰島素磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）信號轉導通路關系密切?本實驗通過高糖高脂加STZ誘導T2DM大鼠模型，并對其行RYGB干預，通過觀察術后各指標改變情況，驗證以上假設。
3.2 炎癥介質與胰島素抵抗
機體胰島β細胞功能受損和組織胰島素抵抗是T2DM的主要病理、生理特征，其中后者是T2DM的核心機制[12]。胰島素抵抗是指在相同胰島素劑量條件下不能獲得同等劑量的反應或臨床效果[13]。文獻[14]數據表明，機體亞臨床抗原抗體反應與胰島素效應器官胰島素抵抗存在內在聯系。一方面，胰島素效應器官PI3K信號轉導通路受阻，可引起組織促炎因子生成，從而提高機體炎癥介質水平；CRP、單核細胞趨化蛋白-1、TNF-α、IL-6等多種炎癥介質可介導胰島素靶器官產生亞臨床炎癥反應[15]，使胰島素PI3K信號轉導通路受阻，引起組織胰島素抵抗的發生[16]。另一方面，一系列激酶在各種炎性細胞長期作用下逐漸被激活，使胰島素受體底物酪氨酸位點磷酸化受阻，并誘導其蘇、絲氨酸位點異常磷酸化，最終使得胰島素相關信號傳導能力下降，進一步導致機體胰島素抵抗[17]。本研究實驗數據顯示，RYGB術前，T2DM成模大鼠較正常對照大鼠血清TNF-α、CRP水平明顯增高（P < 0.05），T2DM大鼠各組間TNF-α、CRP水平接近（P > 0.05）；T2MD-RYGB組術后第1周血清TNF-α、CRP含量有所下降，與術前比較差異無統計學意義（P > 0.05），術后第4周、第8周時各指標繼續降低，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）；其余3組手術前后各指標變化不明顯（P > 0.05）。表明RYGB可明顯降低T2DM大鼠血清炎癥介質水平，緩解胰島素靶器官亞臨床炎癥反應，使胰島素PI3K信號轉導通路得到改善，從而降低機體胰島素抵抗[18]。
3.3 脂肪組織與胰島素抵抗
在遺傳因素或環境因素的作用下，機體脂肪組織功能受損[19]，對脂肪組織產生脂毒性作用，造成脂肪分解出不受控制的脂肪酸，以脂肪肝等脂質異位過度沉積、全身胰島素抵抗和炎癥為特征[20]。而脂肪細胞瘦素抵抗、脂聯素和抵抗素分泌水平降低或活性減弱、骨豁肌細胞甘油三酯含量增多等[21-22]，通過降低胰島素受體及其底物的合成和分泌水平[23]，從而阻礙胰島素敏感組織PI3K信號轉導通路的激活，導致胰島素抵抗形成[24-25]。本研究中，RYGB術前，T2DM成模大鼠較正常對照大鼠血清FFA、HOMA-IR、Adipo-IR水平明顯增高（P < 0.05），T2DM鼠各組間FFA、HOMA-IR、Adipo-IR水平接近（P > 0.05）。T2MD-RYGB組術后第1周血清FFA、HOMA-IR、Adipo-IR含量有所下降，與術前比較差異無統計學意義（P > 0.05），術后第4周、第8周時各指標繼續降低，與術前比較差異有統計學意義（P < 0.05）；其余3組手術前后各指標變化不明顯（P > 0.05）。參考以上數據可知，RYGB可明顯降低T2DM大鼠血清FFA水平，機體胰島素抵抗得到明顯改善，是RYGB治療T2DM的可能機制。
3.4 脂肪組織IRS-1/-2含量與胰島素抵抗的相關性分析
本研究中，RYGB術后8周T2DM大鼠脂肪組織內IRS-1/2表達水平明顯提高，組織胰島素敏感性顯著提高，血清炎癥因子減少，機體胰島素抵抗得到明顯改善，血糖控制良好。相關分析結果顯示：各模型組大鼠IRS-1/2含量與血清FPG、TNF-α、CRP、FFA、Adipo-IR水平均呈負相關（P < 0.05）；正常對照組各指標間無明顯相關性（P > 0.05）。
綜上所述，RYGB可通過調節脂肪組織內IRS-1/2表達水平，改善組織胰島素PI3K信號轉導通路，從而調節脂肪組織胰島素抵抗，減少血清炎癥因子及FFA表達，最終降低機體胰島素抵抗水平，是RYGB治療T2DM的可能機制。
