引用本文： 羅金龍, 姜淮蕪. 胎盤生長因子在胃癌組織中的表達及其臨床意義. 中國普外基礎與臨床雜志, 2015, 22(9): 1101-1106. doi: 10.7507/1007-9424.20150285 復制
胃癌是人類常見的惡性腫瘤之一，在我國惡性腫瘤中其發病率居首位，嚴重影響患者的生存質量[1]。然而，對于其發生和發展機理仍未完全闡明。目前較公認的胃癌發生假說有亞硝基化合物致癌學說、幽門螺桿菌感染學說、不良飲食方式致癌學說等[2]。近年來的研究[3]表明，體內腫瘤直徑超過2 mm時，若沒有新生血管的形成，腫瘤氧及營養物質需求就無法得到滿足[4]。在腫瘤新生血管的形成過程中，血管調控因子起著重要的作用[5-6]。胎盤生長因子（placental growth factor，PlGF）作為調控血管生長的重要因子，能夠促進新生血管的形成，從而維持腫瘤生長，這已在較多腫瘤中得到證實[7-9]。胃癌生長同樣需要新生血管的營養支持。筆者認為，PlGF可能同樣參與胃癌發生發展的病理學過程。然而，對于PlGF在胃癌發生發展過程中的作用，目前報道較少。因此，筆者采用逆轉錄-聚合酶鏈反應法（RT-PCR法）和免疫組織化學染色法分別檢測了胃癌組織和癌旁組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達，同時采用酶聯免疫吸附法（ELISA法）檢測了胃癌患者和健康體檢人員血液中PlGF的濃度，以初步探討PlGF與胃癌發生的相關性。
1 資料與方法
1.1 研究對象
回顧性收集2013年3月至2014年12月期間在綿陽四〇四醫院腹部外科行胃癌根治術的88例胃癌患者作為研究對象，所有患者均具有完整的病例資料，且經術后病理學檢查證實為胃癌。本組所有研究對象取標本前未行任何治療，且明確告知研究對象試驗方法及目的，取得研究對象同意，并經綿陽四〇四醫院倫理委員會批準。88例胃癌患者中，男71例，女17例；年齡25～86歲（≤50歲者48例，>50歲者40例），中位年齡為48.4歲；胃癌直徑2.2～5.8 cm，中位直徑為4.3 cm （≤4.0 cm者45例，>4.0 cm者43例）；腸型43例，彌漫型45例；pT分期：pT1～2期35例，pT3～4期53例；pN分期：pN1～2期49例，pN3期39例；pM分期：pM0期84例，pM1期4例；高分化7例，中分化19例，低分化62例；Borrmann分型：0型（按照日本胃癌協會大體分型標準[10]定義為淺表擴散型） 20例，Ⅰ型18例，Ⅱ型19例，Ⅲ型18例，Ⅳ型13例；伴有肝臟轉移2例，伴有腹膜轉移2例。同期取其腫瘤組織（胃癌組）及癌旁組織（癌旁組織組，距離腫瘤以遠5.0 cm） 行免疫組織化學染色和RT-PCR，取其外周血行ELISA檢測。采用隨機數表法抽取2014年9月于綿陽四〇四醫院體檢科行體檢者30例（體檢組），其中男25例，女5例；年齡29～73歲，中位年齡為48歲。取其外周血行ELISA檢測。胃癌組患者和體檢組人群的年齡（χ2=0.270，P=0.603）和性別構成（χ2=0.104，P=0.747）比較差異均無統計學意義，具有可比性。
1.2 主要試劑和設備
試劑：ELISA試劑盒、兔抗人PlGF多克隆抗體和S-P免疫組織化學試劑盒均購自北京博奧森生物技術有限公司，RNA逆轉錄試劑盒和PCR試劑盒均購自日本TAKARA公司，TRIzol總RNA提取試劑盒購自美國Life Technologies公司。PlGF基因引物采用Primer Priemer 6.0軟件設計，由第三軍醫大學中心實驗室合成。設備：ST-360型酶標儀（上海科華實驗系統有限公司），HBPX2型PCR儀（美國Thermo Hybaid公司），PPDB-21C型生物組織包埋機及CM1900型組織切片機（湖北徠克醫療儀器有限公司）。
1.3 方法
1.3.1 RT-PCR法檢測組織中PlGF mRNA的表達
術中取胃癌組織和癌旁組織，充分漂洗后，放入凍存管中，置于液氮中速凍后，于-80 ℃條件下保存，以待抽提RNA。以常規TRIzol法抽提RNA，逆轉錄成cDNA （操作按試劑盒說明書進行），以進行PCR擴增。PlGF基因引物：上游引物5′-TGTCTTCATTCCATCACTCTTCTTG-3′，下游引物5′-TCAGTGGTGCTCCATACAGAAC-3′，理論產物長度為248 bp。β-actin引物：上游引物5′-CCCATCT ATGAGGGTTACGC-3′，下游引物5′-TTTAATGTCACGCACGATT-TC-3′，產物長度為150 bp。反應條件：95 ℃變性4 min，進入循環（94 ℃變性30 s，55 ℃退火40 s，72 ℃延伸30 s），擴增30個循環，最后1個循環為72 ℃延伸10 min。反應體系：5×PCR Buffer 10.00 μL、滅菌蒸餾水28.75 μL、TaKaRa Ex Taq?HS 0.25 μL、PCR上游引物0.50 μL、PCR下游引物0.50 μL。取5.00 μL PCR產物行瓊脂糖凝膠電泳30 min，電壓為120 V。采用計算機掃描分析電泳條帶，以PlGF mRNA條帶與β-actin條帶灰度值的比值作為PlGF mRNA的表達水平。
1.3.2 免疫組織化學染色法檢測組織中PlGF的表達
術中取胃癌組織和癌旁組織，充分漂洗，置于10%甲醛溶液中固定24 h，常規脫水，石蠟包埋，制成蠟塊，-20 ℃條件下保存。免疫組織化學染色的具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行。以PBS液代替一抗作為空白對照，以肝癌組織作為陽性對照。陽性染色判定：腫瘤細胞的胞質染色成棕黃色。每例標本隨機選擇10個高倍視野（400倍），計數100個細胞中的陽性細胞數（陽性百分比），計算陽性百分比均值。陽性百分比<5%判定為陰性，≥5%判定為陽性[11]。
1.3.3 ELISA法檢測外周血中PlGF的濃度
取體檢組人員和胃癌組患者的外周血3 mL，自凝后離心（5 000 r/min離心20 min，r=10 cm），分離血清后于-80 ℃條件下保存待檢。ELISA法的具體操作按照試劑盒說明書進行。最后在波長為450 nm處測定各孔吸光度（A）值，通過繪制出的標準曲線，查出相應的濃度，再乘以實驗過程中的稀釋倍數，即為該樣品的實際濃度。
1.4 統計學方法
采用SPSS 19.0軟件進行統計學分析。計量資料的正態性檢驗采用單樣本Kolmogorov-Smirnov檢驗，正態分布資料以均數±標準差（
2 結果
2.1 胃癌組織和癌旁組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達結果
RT-PCR結果顯示：胃癌組癌組織中PlGF mRNA的表達水平為0.569±0.166，高于癌旁組織組（0.037±0.020），差異有統計學意義（t=-29.948，P=0.000），見圖 1。免疫組織化學染色結果顯示：胃癌組癌組織中PlGF呈陽性表達71例，表達陽性率為80.7%，高于癌旁組織組的5.7% （5/88），差異具有統計學意義（χ2=100.867，P=0.000）。在胃癌組織中，PlGF主要表達于胃癌細胞的胞質中，呈簇狀或團片狀染色，部分間質血管內皮細胞可見少量染色；而癌旁組織中未見異常染色（圖 2）。
圖1
示胃癌組織及其癌旁組織中PlGF mRNA的瓊脂糖凝膠電泳結果。1A：PlGF mRNA；1B：內參β-actin。1：Marker；2：癌旁組織；3：胃癌組織；4和5：β-actin ? ?圖 2 示胃癌組織及其癌旁組織中PlGF的免疫組織化學染色結果（SP ×400）。2A：癌旁組織中PlGF呈陰性表達；2B：胃癌組織中PlGF呈陽性表達
2.2 胃癌組和體檢組外周血中PlGF濃度的檢測結果
ELISA法檢測結果顯示，胃癌組患者外周血中PlGF的濃度為（57.247±9.800）ng/L，高于體檢組的（10.351±1.715）ng/L，差異有統計學意義（t=43.000，P=0.000）。
2.3 胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA及其蛋白表達、外周血中PlGF濃度與其臨床病理學特征的關系
胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達與腫瘤直徑、pT分期、pN分期、分化程度及Borr-mann分型均有關（P<0.050），腫瘤直徑>4 cm、pT3～4期、pN3期、低分化及Borrmann分型為Ⅲ～Ⅳ型者PLGF mRNA的表達水平和PlGF的表達陽性率均較高，而PlGF mRNA及其蛋白的表達與年齡、性別、pM分期及胃腸型均無關（P>0.050）。胃癌患者外周血中PlGF的濃度與年齡、性別、腫瘤直徑、pT分期、pN分期、pM分期、分化程度、Borrmann分型及胃腸型均無關（P>0.050），見表 1。
表1
胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA及其蛋白表達和外周血中PlGF濃度與其臨床病理學特征的關系
3 討論
PlGF是血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）家族中的一員[12]，是一種分泌型同源二聚體糖蛋白[13]。研究表明，PlGF不僅能夠調節滋養細胞的增殖[14]，而且能夠誘導腫瘤細胞的血管病理性增殖、遷移和激活，促進腫瘤生長和轉移[15]。相關研究顯示，在肺癌[16]、直腸癌[17]、乳腺癌[18]等組織中PlGF均呈高表達，且其表達與腫瘤微血管密度（microvessel density，MVD）成正比。胃癌組織的生長也需要有新生血管提供支持。本組資料結果表明：胃癌患者的癌組織（相對于癌旁組織）及血液（相對于健康體檢人群）中PlGF均呈高表達，由此可以推測，PlGF同樣也有可能參與胃癌發生和發展的病理學過程。
3.1 胃癌患者癌組織中PlGF mRNA表達異常及其臨床意義
本組RT-PCR檢測結果顯示，胃癌組組織中PlGFmRNA的表達水平高于癌旁組織組，差異有統計學意義（P=0.000）。胃癌組織中PlGF mRNA的表達水平增加，說明PlGF表達的上調可能源于PlGF mRNA轉錄的增加，提示胃癌組織中PlGF的合成增加源自于基因水平，說明胃癌患者可能存在先天遺傳或者后期出現的基因突變，導致其PlGF基因表達異常，最終誘導胃癌發生，促進胃癌發展。本研究進一步分析發現，胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA的表達與腫瘤直徑、pT分期、pN分期、分化程度以及Borrmann分型均有關（P<0.050）。提示PlGF mRNA可用于胃癌的早期診斷、確定治療方案等，同時其可作為基因診斷和靶向治療的位點，進而豐富了胃癌的診治手段。
3.2 胃癌患者癌組織中PlGF表達異常及其臨床意義
本研究免疫組織化學染色結果顯示，胃癌組組織中PlGF的表達陽性率高于癌旁組織組（P=0.000），在胃癌組織中PlGF呈異常表達，這與PlGF在其他惡性腫瘤組織中表達的研究結論[19-23]基本一致。PlGF能夠促進、誘導血管內皮細胞的分化、增殖及遷移，從而促進腫瘤微血管生長，為胃癌等腫瘤生長提供營養支持，促進其生長和轉移[24-26]。由此筆者認為，胃癌組織中PlGF表達陽性率的升高對于胃癌的診斷具有一定臨床意義，術前可以通過胃鏡取活體組織檢測其PlGF的表達，以協助診斷是否為胃癌。此外，本組資料結果還表明，胃癌組患者癌組織中PlGF的表達與腫瘤直徑、pT分期、pN分期、分化程度及Borrmann分型均有關（P<0.050），提示癌組織中PlGF的表達情況在一定程度上反映了患者病情的嚴重程度。據此，筆者認為，通過活檢檢測病灶組織中PGlF的表達量，在一定程度上可以對胃癌的診斷及分期提供依據，為胃癌的治療提供合理的策略，還可在一定程度上判斷患者的預后。
3.3 胃癌患者外周血中PlGF濃度變化的臨床意義
本組資料結果顯示，胃癌組患者外周血中PlGF的濃度高于體檢組（P=0.000），提示外周血中的PlGF濃度可作為胃癌診斷的檢驗學指標。當患者出現惡心、嘔吐、便血、黑便等胃腸道癥狀，并伴有胃癌高危因素時，可以通過行外周血PlGF濃度檢測，以協助胃癌的診斷。此外，胃癌患者外周血中PlGF的濃度與年齡、性別、腫瘤直徑、pT分期、pN分期、pM分期、分化程度、Borrmann分型及胃腸型均無關（P>0.050），與癌組織中PlGF mRNA及其蛋白不同，是確無影響還是由于樣本量較少所致，需累積病例、擴大樣本量以進一步探討外周血中PGlF濃度與胃癌患者臨床病理學特征的關系，或者進一步了解其代謝過程及衰減周期。
腫瘤的發生和發展是一個多因素、受多層面影響的過程。本組資料結果表明，癌組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達對胃癌的研究具有重要價值，其基因甚至可能作為抗腫瘤治療的靶向位點。然而，雖然關于PlGF在胃癌組織中表達的研究發現了很多陽性結果，同樣本研究也取得了預期結果，但是由于試驗設計的局限性、個體差異，以及可能存在的統計學偏倚，對于PlGF在胃癌發生發展中的作用，仍需要大宗病例、多中心的研究進一步驗證。
胃癌是人類常見的惡性腫瘤之一，在我國惡性腫瘤中其發病率居首位，嚴重影響患者的生存質量[1]。然而，對于其發生和發展機理仍未完全闡明。目前較公認的胃癌發生假說有亞硝基化合物致癌學說、幽門螺桿菌感染學說、不良飲食方式致癌學說等[2]。近年來的研究[3]表明，體內腫瘤直徑超過2 mm時，若沒有新生血管的形成，腫瘤氧及營養物質需求就無法得到滿足[4]。在腫瘤新生血管的形成過程中，血管調控因子起著重要的作用[5-6]。胎盤生長因子（placental growth factor，PlGF）作為調控血管生長的重要因子，能夠促進新生血管的形成，從而維持腫瘤生長，這已在較多腫瘤中得到證實[7-9]。胃癌生長同樣需要新生血管的營養支持。筆者認為，PlGF可能同樣參與胃癌發生發展的病理學過程。然而，對于PlGF在胃癌發生發展過程中的作用，目前報道較少。因此，筆者采用逆轉錄-聚合酶鏈反應法（RT-PCR法）和免疫組織化學染色法分別檢測了胃癌組織和癌旁組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達，同時采用酶聯免疫吸附法（ELISA法）檢測了胃癌患者和健康體檢人員血液中PlGF的濃度，以初步探討PlGF與胃癌發生的相關性。
1 資料與方法
1.1 研究對象
回顧性收集2013年3月至2014年12月期間在綿陽四〇四醫院腹部外科行胃癌根治術的88例胃癌患者作為研究對象，所有患者均具有完整的病例資料，且經術后病理學檢查證實為胃癌。本組所有研究對象取標本前未行任何治療，且明確告知研究對象試驗方法及目的，取得研究對象同意，并經綿陽四〇四醫院倫理委員會批準。88例胃癌患者中，男71例，女17例；年齡25～86歲（≤50歲者48例，>50歲者40例），中位年齡為48.4歲；胃癌直徑2.2～5.8 cm，中位直徑為4.3 cm （≤4.0 cm者45例，>4.0 cm者43例）；腸型43例，彌漫型45例；pT分期：pT1～2期35例，pT3～4期53例；pN分期：pN1～2期49例，pN3期39例；pM分期：pM0期84例，pM1期4例；高分化7例，中分化19例，低分化62例；Borrmann分型：0型（按照日本胃癌協會大體分型標準[10]定義為淺表擴散型） 20例，Ⅰ型18例，Ⅱ型19例，Ⅲ型18例，Ⅳ型13例；伴有肝臟轉移2例，伴有腹膜轉移2例。同期取其腫瘤組織（胃癌組）及癌旁組織（癌旁組織組，距離腫瘤以遠5.0 cm） 行免疫組織化學染色和RT-PCR，取其外周血行ELISA檢測。采用隨機數表法抽取2014年9月于綿陽四〇四醫院體檢科行體檢者30例（體檢組），其中男25例，女5例；年齡29～73歲，中位年齡為48歲。取其外周血行ELISA檢測。胃癌組患者和體檢組人群的年齡（χ2=0.270，P=0.603）和性別構成（χ2=0.104，P=0.747）比較差異均無統計學意義，具有可比性。
1.2 主要試劑和設備
試劑：ELISA試劑盒、兔抗人PlGF多克隆抗體和S-P免疫組織化學試劑盒均購自北京博奧森生物技術有限公司，RNA逆轉錄試劑盒和PCR試劑盒均購自日本TAKARA公司，TRIzol總RNA提取試劑盒購自美國Life Technologies公司。PlGF基因引物采用Primer Priemer 6.0軟件設計，由第三軍醫大學中心實驗室合成。設備：ST-360型酶標儀（上海科華實驗系統有限公司），HBPX2型PCR儀（美國Thermo Hybaid公司），PPDB-21C型生物組織包埋機及CM1900型組織切片機（湖北徠克醫療儀器有限公司）。
1.3 方法
1.3.1 RT-PCR法檢測組織中PlGF mRNA的表達
術中取胃癌組織和癌旁組織，充分漂洗后，放入凍存管中，置于液氮中速凍后，于-80 ℃條件下保存，以待抽提RNA。以常規TRIzol法抽提RNA，逆轉錄成cDNA （操作按試劑盒說明書進行），以進行PCR擴增。PlGF基因引物：上游引物5′-TGTCTTCATTCCATCACTCTTCTTG-3′，下游引物5′-TCAGTGGTGCTCCATACAGAAC-3′，理論產物長度為248 bp。β-actin引物：上游引物5′-CCCATCT ATGAGGGTTACGC-3′，下游引物5′-TTTAATGTCACGCACGATT-TC-3′，產物長度為150 bp。反應條件：95 ℃變性4 min，進入循環（94 ℃變性30 s，55 ℃退火40 s，72 ℃延伸30 s），擴增30個循環，最后1個循環為72 ℃延伸10 min。反應體系：5×PCR Buffer 10.00 μL、滅菌蒸餾水28.75 μL、TaKaRa Ex Taq?HS 0.25 μL、PCR上游引物0.50 μL、PCR下游引物0.50 μL。取5.00 μL PCR產物行瓊脂糖凝膠電泳30 min，電壓為120 V。采用計算機掃描分析電泳條帶，以PlGF mRNA條帶與β-actin條帶灰度值的比值作為PlGF mRNA的表達水平。
1.3.2 免疫組織化學染色法檢測組織中PlGF的表達
術中取胃癌組織和癌旁組織，充分漂洗，置于10%甲醛溶液中固定24 h，常規脫水，石蠟包埋，制成蠟塊，-20 ℃條件下保存。免疫組織化學染色的具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行。以PBS液代替一抗作為空白對照，以肝癌組織作為陽性對照。陽性染色判定：腫瘤細胞的胞質染色成棕黃色。每例標本隨機選擇10個高倍視野（400倍），計數100個細胞中的陽性細胞數（陽性百分比），計算陽性百分比均值。陽性百分比<5%判定為陰性，≥5%判定為陽性[11]。
1.3.3 ELISA法檢測外周血中PlGF的濃度
取體檢組人員和胃癌組患者的外周血3 mL，自凝后離心（5 000 r/min離心20 min，r=10 cm），分離血清后于-80 ℃條件下保存待檢。ELISA法的具體操作按照試劑盒說明書進行。最后在波長為450 nm處測定各孔吸光度（A）值，通過繪制出的標準曲線，查出相應的濃度，再乘以實驗過程中的稀釋倍數，即為該樣品的實際濃度。
1.4 統計學方法
采用SPSS 19.0軟件進行統計學分析。計量資料的正態性檢驗采用單樣本Kolmogorov-Smirnov檢驗，正態分布資料以均數±標準差（
2 結果
2.1 胃癌組織和癌旁組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達結果
RT-PCR結果顯示：胃癌組癌組織中PlGF mRNA的表達水平為0.569±0.166，高于癌旁組織組（0.037±0.020），差異有統計學意義（t=-29.948，P=0.000），見圖 1。免疫組織化學染色結果顯示：胃癌組癌組織中PlGF呈陽性表達71例，表達陽性率為80.7%，高于癌旁組織組的5.7% （5/88），差異具有統計學意義（χ2=100.867，P=0.000）。在胃癌組織中，PlGF主要表達于胃癌細胞的胞質中，呈簇狀或團片狀染色，部分間質血管內皮細胞可見少量染色；而癌旁組織中未見異常染色（圖 2）。
圖1
示胃癌組織及其癌旁組織中PlGF mRNA的瓊脂糖凝膠電泳結果。1A：PlGF mRNA；1B：內參β-actin。1：Marker；2：癌旁組織；3：胃癌組織；4和5：β-actin ? ?圖 2 示胃癌組織及其癌旁組織中PlGF的免疫組織化學染色結果（SP ×400）。2A：癌旁組織中PlGF呈陰性表達；2B：胃癌組織中PlGF呈陽性表達
2.2 胃癌組和體檢組外周血中PlGF濃度的檢測結果
ELISA法檢測結果顯示，胃癌組患者外周血中PlGF的濃度為（57.247±9.800）ng/L，高于體檢組的（10.351±1.715）ng/L，差異有統計學意義（t=43.000，P=0.000）。
2.3 胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA及其蛋白表達、外周血中PlGF濃度與其臨床病理學特征的關系
胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達與腫瘤直徑、pT分期、pN分期、分化程度及Borr-mann分型均有關（P<0.050），腫瘤直徑>4 cm、pT3～4期、pN3期、低分化及Borrmann分型為Ⅲ～Ⅳ型者PLGF mRNA的表達水平和PlGF的表達陽性率均較高，而PlGF mRNA及其蛋白的表達與年齡、性別、pM分期及胃腸型均無關（P>0.050）。胃癌患者外周血中PlGF的濃度與年齡、性別、腫瘤直徑、pT分期、pN分期、pM分期、分化程度、Borrmann分型及胃腸型均無關（P>0.050），見表 1。
表1
胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA及其蛋白表達和外周血中PlGF濃度與其臨床病理學特征的關系
3 討論
PlGF是血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）家族中的一員[12]，是一種分泌型同源二聚體糖蛋白[13]。研究表明，PlGF不僅能夠調節滋養細胞的增殖[14]，而且能夠誘導腫瘤細胞的血管病理性增殖、遷移和激活，促進腫瘤生長和轉移[15]。相關研究顯示，在肺癌[16]、直腸癌[17]、乳腺癌[18]等組織中PlGF均呈高表達，且其表達與腫瘤微血管密度（microvessel density，MVD）成正比。胃癌組織的生長也需要有新生血管提供支持。本組資料結果表明：胃癌患者的癌組織（相對于癌旁組織）及血液（相對于健康體檢人群）中PlGF均呈高表達，由此可以推測，PlGF同樣也有可能參與胃癌發生和發展的病理學過程。
3.1 胃癌患者癌組織中PlGF mRNA表達異常及其臨床意義
本組RT-PCR檢測結果顯示，胃癌組組織中PlGFmRNA的表達水平高于癌旁組織組，差異有統計學意義（P=0.000）。胃癌組織中PlGF mRNA的表達水平增加，說明PlGF表達的上調可能源于PlGF mRNA轉錄的增加，提示胃癌組織中PlGF的合成增加源自于基因水平，說明胃癌患者可能存在先天遺傳或者后期出現的基因突變，導致其PlGF基因表達異常，最終誘導胃癌發生，促進胃癌發展。本研究進一步分析發現，胃癌組患者癌組織中PlGF mRNA的表達與腫瘤直徑、pT分期、pN分期、分化程度以及Borrmann分型均有關（P<0.050）。提示PlGF mRNA可用于胃癌的早期診斷、確定治療方案等，同時其可作為基因診斷和靶向治療的位點，進而豐富了胃癌的診治手段。
3.2 胃癌患者癌組織中PlGF表達異常及其臨床意義
本研究免疫組織化學染色結果顯示，胃癌組組織中PlGF的表達陽性率高于癌旁組織組（P=0.000），在胃癌組織中PlGF呈異常表達，這與PlGF在其他惡性腫瘤組織中表達的研究結論[19-23]基本一致。PlGF能夠促進、誘導血管內皮細胞的分化、增殖及遷移，從而促進腫瘤微血管生長，為胃癌等腫瘤生長提供營養支持，促進其生長和轉移[24-26]。由此筆者認為，胃癌組織中PlGF表達陽性率的升高對于胃癌的診斷具有一定臨床意義，術前可以通過胃鏡取活體組織檢測其PlGF的表達，以協助診斷是否為胃癌。此外，本組資料結果還表明，胃癌組患者癌組織中PlGF的表達與腫瘤直徑、pT分期、pN分期、分化程度及Borrmann分型均有關（P<0.050），提示癌組織中PlGF的表達情況在一定程度上反映了患者病情的嚴重程度。據此，筆者認為，通過活檢檢測病灶組織中PGlF的表達量，在一定程度上可以對胃癌的診斷及分期提供依據，為胃癌的治療提供合理的策略，還可在一定程度上判斷患者的預后。
3.3 胃癌患者外周血中PlGF濃度變化的臨床意義
本組資料結果顯示，胃癌組患者外周血中PlGF的濃度高于體檢組（P=0.000），提示外周血中的PlGF濃度可作為胃癌診斷的檢驗學指標。當患者出現惡心、嘔吐、便血、黑便等胃腸道癥狀，并伴有胃癌高危因素時，可以通過行外周血PlGF濃度檢測，以協助胃癌的診斷。此外，胃癌患者外周血中PlGF的濃度與年齡、性別、腫瘤直徑、pT分期、pN分期、pM分期、分化程度、Borrmann分型及胃腸型均無關（P>0.050），與癌組織中PlGF mRNA及其蛋白不同，是確無影響還是由于樣本量較少所致，需累積病例、擴大樣本量以進一步探討外周血中PGlF濃度與胃癌患者臨床病理學特征的關系，或者進一步了解其代謝過程及衰減周期。
腫瘤的發生和發展是一個多因素、受多層面影響的過程。本組資料結果表明，癌組織中PlGF mRNA及其蛋白的表達對胃癌的研究具有重要價值，其基因甚至可能作為抗腫瘤治療的靶向位點。然而，雖然關于PlGF在胃癌組織中表達的研究發現了很多陽性結果，同樣本研究也取得了預期結果，但是由于試驗設計的局限性、個體差異，以及可能存在的統計學偏倚，對于PlGF在胃癌發生發展中的作用，仍需要大宗病例、多中心的研究進一步驗證。
