引用本文： 李晶, 喬瑋, 任曉琦, 石浩, 楊婷, 馬紹英, 趙亞平, 蘇成忠. 煅燒異種骨用于犬牙槽嵴保存的初步研究. 中國修復重建外科雜志, 2019, 33(11): 1452-1456. doi: 10.7507/1002-1892.201908052 復制
在口腔臨床中，拔牙后牙槽嵴位點的保存對于缺牙部位進行種植修復有著非常重要的意義。目前，牙槽嵴保存常用的方法是在牙槽窩內植入骨修復材料。植骨材料多種多樣，有自體骨、同種異體骨、異種骨等[1-2]。自體骨作為植骨的“金標準”已成為共識，但其骨量有限，難以滿足大范圍骨缺損修復；同種異體骨是骨科臨床常用材料，但其來源有限、有一定程度的免疫原性，也不能完全滿足臨床植骨需求。異種骨材料來源廣泛，但存在較強的免疫原性及疾病傳播風險，如果經過合適方法處理可以作為骨移植替代材料，解決臨床上自體骨與同種異體骨來源不足的問題。高溫煅燒是一種可以徹底去除異種骨免疫原性及致病微生物的有效方法[3]。將具有天然多孔結構的牛松質骨經高溫煅燒后制得的煅燒骨，不僅有效去除了抗原，還可以為新生骨組織和血管長入提供通道，是一種理想的骨修復材料。煅燒骨制備工藝以及理化性質研究國內外已有諸多報道[4-6]，這些研究表明煅燒骨具有良好的生物安全性[7-8]；但煅燒骨材料用于動物植骨的成骨效果研究僅有少量報道。本研究將牛骨經高溫煅燒制備煅燒異種骨材料（以下簡稱煅燒異種骨）植入犬拔牙窩內，與植入天然煅燒骨修復材料——“骼瑞”的成骨效果進行比較，評價煅燒異種骨在犬拔牙窩內的植骨效果，為煅燒異種骨作為植骨材料應用于口腔臨床提供實驗依據。
1 材料與方法
1.1 實驗動物、主要材料及試劑、儀器
健康 1.5～2 歲齡比格犬 6 只，體質量 10.8～12.3 kg，雌雄不限，牙齒無齲壞或缺失，牙周健康，購自南京柴門生物科技有限公司，由中國輻射防護研究院 GLP 實驗中心負責飼養。手術前每只動物在 GLP 實驗中心至少有 7 d 過渡期，以適應新環境。
骼瑞（陜西瑞盛生物材料有限公司）為白色顆粒，粒徑 0.25～1.0 mm，是天然牛松質骨經專利技術低溫煅燒后制備的天然煅燒骨修復材料，其主要成分為羥基磷灰石。天然煅燒骨修復材料具有與人類松質骨類似的宏觀和微觀多孔結構，且具有良好的生物相容性和骨傳導性，是國內首家批準上市的同類產品，在犬牙槽骨缺損修復實驗中有良好的成骨效果[9]，臨床使用效果良好。
煅燒異種骨（山西奧瑞生物材料有限公司），粒徑 0.25～1.0 mm，是經脫脂脫蛋白的牛骨在 800～1 000℃有氧條件下高溫煅燒制備而成的無機骨材料。煅燒異種骨為白色不規則顆粒，不含蛋白質，無細胞毒性，具有良好的生物相容性。
犬口咽清噴劑（陜西鑫誠大唐畜牧有限公司）；戊巴比妥鈉（北京化學試劑公司）；0.9% 氯化鈉注射液（山東化魯制藥有限公司）。CS 9300 型錐形 CT 機（Carestrea 公司，美國）；KD-TS1 型生物組織自動脫水機（浙江金華科迪儀器設備有限公司）；BMJ-A 型包埋機（常州中威電子儀器有限公司）；RM2015 型石蠟切片機（Leica 公司，德國）；牙科電鉆（佛山瑞郗醫療器械有限公司）。
1.2 實驗分組及方法
實驗動物以 3% 戊巴比妥鈉（1.0 mg/kg）靜脈注射全身麻醉[10]，牙根處注射 2% 利多卡因行局部麻醉。常規口腔消毒后分離牙齦，拔除犬雙側下頜第 2、4 前磨牙以及上頜第 2 前磨牙；用刮匙徹底清除牙周韌帶，使用牙科電鉆低速、低溫 0.9% 氯化鈉注射液冷卻下擴大牙槽窩并降低牙槽間隔，制備大小約 8 mm（近遠中向）×8 mm（垂直向）×4 mm（頰舌向）的骨缺損模型。將植骨材料用 0.9% 氯化鈉注射液充分浸潤后填充至牙槽窩中，充填器擠壓至材料完全充滿牙槽窩，左側植入煅燒異種骨作為實驗組，右側植入骼瑞作為對照組。拉攏分離的齦瓣，非吸收線“8”字縫合，關閉拔牙創面。見圖 1a～c。
圖1
實驗動物手術過程
a. 拔除牙齒；b. 材料填充至拔牙窩；c. “8”字縫合；d. 術后防護
Figure1. Surgical procedure of animalsa. Extracted teeth carefully; b. Implanted the material into extraction socket; c. Sutured wound with “8” closure; d. Prevented after implantation
術前 1 d 開始，每天肌肉注射慶大霉素（1.5 U/kg）預防感染，連續 7 d；術后即刻用慶大霉素注射液沖洗傷口預防感染。術后多層無菌紗布覆蓋傷口防止動物舔食傷口，戴犬防咬嘴套防止動物扯掉紗布（圖 1d），每天更換 1 次，同時使用犬口咽清噴劑處理創口，持續 7 d。術后 2 周內給予軟食，2 周后拆除縫線，正常飲食。
1.3 觀測指標
1.3.1 大體觀察
術后 1、6 個月，分別觀察傷口愈合情況，是否有排斥反應，有無腫脹、炎性分泌物，植骨材料有無裸露等。
1.3.2 錐形束 CT 檢查
術后 1、6 個月分別過量麻醉處死 3 只實驗動物，分離上下頜骨，采用 4% 甲醛溶液固定 48 h ，制作標本后行錐形束 CT 檢查，每次均由同一拍攝者在常規條件下拍攝。掃描參數：投照電壓<110 kV，電流<15 mA，有效曝光時間<5.4 s，體素 0.18 mm×0.18 mm×0.18 mm。獲得的 DICOM 格式數據導入 CS 3D Imaging 軟件中，對數據進行三維重建；采用 Image-pro plus6.0 軟件對重建圖片進行分析，測量植骨部位與相鄰參照區（鄰近的第 3 前磨牙兩個牙根中間的骨區）的平均灰度值，計算植骨區與參照區的灰度比。見圖 2。
圖2
錐形束 CT 三維重建
三角形示植骨區，五角星示參照區
Figure2. CBCT three-dimensional reconstruction The triangle indicated the bone graft area, and the pentagon indicated the reference area1.3.3 組織學觀察
術后 1、6 個月拍攝錐形束 CT 后，將包含植骨部位的組織塊采用 50% 甲酸脫鈣處理 70 d，常規系列乙醇脫水，石蠟包埋制備組織學切片，片厚 5 μm，HE 染色，光鏡下觀察植入材料吸收情況和新骨形成情況，評價材料成骨效果。
1.4 統計學方法
采用 SPSS17.0 統計軟件進行分析。數據以均數±標準差表示，組間比較采用配對 t 檢驗；檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 大體觀察
實驗動物無死亡，術后飲食均正常。術后 2 周拆線可見創口基本愈合，植骨材料無裸露。術后 1 個月，兩組創口均愈合良好，牙齦色澤正常，無腫脹；處死動物后取出含植入物的牙槽骨，矢狀位剖開，兩組植入部位均可見白色植骨材料殘留。術后 6 個月，兩組創口均愈合良好，牙齦色澤正常，無腫脹；處死動物后植入部位大體觀察均未見植骨材料。兩組大體觀察結果無明顯差異。見圖 3。
圖3
術后大體觀察
a. 術后 1 個月創口愈合良好；b. 術后 1 個月植入部位可見白色植骨材料；c. 術后 6 個月植入部位未見植骨材料
Figure3. General observation after operationa. The wound healed well at 1 month after operation; b. White material could be seen at 1 month after operation; c. No material could be observed at 6 months after operation
2.2 錐形束 CT 檢查
術后 1 個月，兩組植骨區均可見植骨材料殘留。術后 6 個月，兩組植骨區未見明顯植骨材料殘留，植骨區牙槽嵴高度均未見明顯降低，實驗組和對照組牙槽窩內骨量無明顯差異。見圖 4。術后 1、6 個月實驗組植骨處與對應參照區的灰度比分別為 0.97±0.14、0.93±0.06，對照組分別為 0.99±0.16、0.94±0.05，兩組比較差異均無統計學意義（t=?1.030，P=0.333；t=?0.770，P=0.466）。
圖4
術后錐形束 CT 三維重建
a. 術后 1 個月；b. 術后 6 個月
Figure4. CBCT three-dimensional reconstruction after operationa. At 1 month after operation; b. At 6 months after operation
2.3 組織學觀察
HE 染色示，術后 1 個月，低倍鏡下兩組植骨部位均可見大量植骨材料未完全降解，骨小梁間可見不完整骨移植材料，材料與組織之間界限明顯；高倍鏡下植骨材料周圍可見新生骨組織，多為編織骨，可見新舊骨分界處的黏合線。術后 6 個月，兩組植骨部位植骨材料完全降解，均可見大量成骨，高倍鏡下可見成熟骨單位；實驗組和對照組均未見明顯炎性細胞浸潤。見圖 5。
圖5
術后各時間點 HE 染色觀察
a. 實驗組術后 1 個月（×40），箭頭示不完整的骨移植材料；b. 實驗組術后 1 個月（×400），箭頭示植骨材料周圍可見新生骨；c. 對照組術后 1 個月（×40），箭頭示不完整的骨移植材料；d. 對照組術后 1 個月（×400），箭頭示植骨材料周圍可見新生骨；e. 實驗組術后 6 個月（×40）；f. 實驗組術后 6 個月（×400）；g. 對照組術后 6 個月（×40）；h. 對照組術后 6 個月（×400）
Figure5. HE staining observation at different time points after operationa. Experimental group at 1 month after operation (×40), arrow indicated incomplete bone graft materials; b. Experimental group at 1 month after operation (×400), arrow indicated new bone around the bone graft materials; c. Control group at 1 month after operation (×40), arrow indicated incomplete bone graft materials; d. Control group at 1 month after operation (×400), arrow indicated new bone around the bone graft materials; e. Experimental group at 6 months after operation (×40); f. Experimental group at 6 months after operation (×400); g. Control group at 6 months after operation (×40); h. Control group at 6 months after operation (×400)
3 討論
牙齒拔除后，牙槽嵴的寬度和高度均會發生顯著吸收[11]。為保存牙槽嵴位點，為隨后的種植修復提供良好基礎，許多研究人員以比格犬作為動物模型進行研究，并建立了骨缺損動物模型[12]。研究表明，拔牙后牙槽窩植入羥基磷灰石材料[13]、Bio-Oss 骨粉[14]或骼瑞[9]都能夠在一定程度上促進牙槽骨的缺損修復，達到牙槽嵴位點保存的效果。也有研究表明單獨植入 Bio-Oss Collagen 骨膠原[15-16]用于牙槽窩位點保存的作用不可靠，需要與種植體聯合使用[17]。本實驗將煅燒骨材料植入犬牙槽窩，采用灰度比與植骨處的成骨效果來驗證煅燒骨材料用于牙槽嵴位點保存的有效性。
錐形束 CT 技術因其輻射量低、掃描時間短、費用低廉、偽影減少等優勢[18]，逐漸應用于口腔牙槽骨形態變化的臨床評估工作[19]。錐形束 CT 的灰度值雖不能直接反映確切的骨密度，但與參照區形成的灰度比可以間接反映植骨區的骨密度[20]。本研究以鄰近的第 3 前磨牙牙根處作為參考區，計算植骨處與對應參考區的灰度比來反映植骨處的骨密度恢復情況，具有一定的可行性。我們同時采用 HE 染色對植骨處進行組織學觀察，能直觀反映植骨材料的成骨效果。結果顯示，術后 1 個月，實驗組和對照組植骨材料周圍已有新骨形成；術后 6 個月，植骨材料周圍形成大量新骨并連接成片，具有良好的骨傳導性。術后 6 個月植骨區灰度較術后 1 個月有所降低，是由于術后植骨材料逐步降解，同時有新骨形成，新骨的密度小于植骨材料。術后不同時期實驗組和對照組植骨區灰度比差異均無統計學意義，說明煅燒骨材料與骼瑞成骨效果一致，能夠保持牙槽骨密度。
綜上述，煅燒異種骨材料具有良好的生物安全性和骨傳導性，有望用于牙槽嵴位點保存。煅燒異種骨為無機骨材料，缺乏骨誘導活性，與骨誘導因子聯合使用可以有效提高成骨效果，但是聯合使用的方法與可行性有待進一步研究。
作者貢獻：李晶參與科研設計、實施，數據收集及文章撰寫；喬瑋、任曉琦參與科研實施，圖片處理及數據收集整理；石浩、楊婷參與數據整理及統計分析；馬紹英、趙亞平對文章的知識性內容作批評性審閱；蘇成忠參與文章科研設計及討論部分分析。
利益沖突：所有作者聲明，在課題研究和文章撰寫過程中不存在利益沖突。
機構倫理問題：研究方案經中國輻射防護研究院藥物安全評價中心動物福利倫理委員會批準。實驗動物生產許可證號：SCXK（蘇）2016-0007，實驗動物使用許可證號：SYXK（晉）2013-0002。
在口腔臨床中，拔牙后牙槽嵴位點的保存對于缺牙部位進行種植修復有著非常重要的意義。目前，牙槽嵴保存常用的方法是在牙槽窩內植入骨修復材料。植骨材料多種多樣，有自體骨、同種異體骨、異種骨等[1-2]。自體骨作為植骨的“金標準”已成為共識，但其骨量有限，難以滿足大范圍骨缺損修復；同種異體骨是骨科臨床常用材料，但其來源有限、有一定程度的免疫原性，也不能完全滿足臨床植骨需求。異種骨材料來源廣泛，但存在較強的免疫原性及疾病傳播風險，如果經過合適方法處理可以作為骨移植替代材料，解決臨床上自體骨與同種異體骨來源不足的問題。高溫煅燒是一種可以徹底去除異種骨免疫原性及致病微生物的有效方法[3]。將具有天然多孔結構的牛松質骨經高溫煅燒后制得的煅燒骨，不僅有效去除了抗原，還可以為新生骨組織和血管長入提供通道，是一種理想的骨修復材料。煅燒骨制備工藝以及理化性質研究國內外已有諸多報道[4-6]，這些研究表明煅燒骨具有良好的生物安全性[7-8]；但煅燒骨材料用于動物植骨的成骨效果研究僅有少量報道。本研究將牛骨經高溫煅燒制備煅燒異種骨材料（以下簡稱煅燒異種骨）植入犬拔牙窩內，與植入天然煅燒骨修復材料——“骼瑞”的成骨效果進行比較，評價煅燒異種骨在犬拔牙窩內的植骨效果，為煅燒異種骨作為植骨材料應用于口腔臨床提供實驗依據。
1 材料與方法
1.1 實驗動物、主要材料及試劑、儀器
健康 1.5～2 歲齡比格犬 6 只，體質量 10.8～12.3 kg，雌雄不限，牙齒無齲壞或缺失，牙周健康，購自南京柴門生物科技有限公司，由中國輻射防護研究院 GLP 實驗中心負責飼養。手術前每只動物在 GLP 實驗中心至少有 7 d 過渡期，以適應新環境。
骼瑞（陜西瑞盛生物材料有限公司）為白色顆粒，粒徑 0.25～1.0 mm，是天然牛松質骨經專利技術低溫煅燒后制備的天然煅燒骨修復材料，其主要成分為羥基磷灰石。天然煅燒骨修復材料具有與人類松質骨類似的宏觀和微觀多孔結構，且具有良好的生物相容性和骨傳導性，是國內首家批準上市的同類產品，在犬牙槽骨缺損修復實驗中有良好的成骨效果[9]，臨床使用效果良好。
煅燒異種骨（山西奧瑞生物材料有限公司），粒徑 0.25～1.0 mm，是經脫脂脫蛋白的牛骨在 800～1 000℃有氧條件下高溫煅燒制備而成的無機骨材料。煅燒異種骨為白色不規則顆粒，不含蛋白質，無細胞毒性，具有良好的生物相容性。
犬口咽清噴劑（陜西鑫誠大唐畜牧有限公司）；戊巴比妥鈉（北京化學試劑公司）；0.9% 氯化鈉注射液（山東化魯制藥有限公司）。CS 9300 型錐形 CT 機（Carestrea 公司，美國）；KD-TS1 型生物組織自動脫水機（浙江金華科迪儀器設備有限公司）；BMJ-A 型包埋機（常州中威電子儀器有限公司）；RM2015 型石蠟切片機（Leica 公司，德國）；牙科電鉆（佛山瑞郗醫療器械有限公司）。
1.2 實驗分組及方法
實驗動物以 3% 戊巴比妥鈉（1.0 mg/kg）靜脈注射全身麻醉[10]，牙根處注射 2% 利多卡因行局部麻醉。常規口腔消毒后分離牙齦，拔除犬雙側下頜第 2、4 前磨牙以及上頜第 2 前磨牙；用刮匙徹底清除牙周韌帶，使用牙科電鉆低速、低溫 0.9% 氯化鈉注射液冷卻下擴大牙槽窩并降低牙槽間隔，制備大小約 8 mm（近遠中向）×8 mm（垂直向）×4 mm（頰舌向）的骨缺損模型。將植骨材料用 0.9% 氯化鈉注射液充分浸潤后填充至牙槽窩中，充填器擠壓至材料完全充滿牙槽窩，左側植入煅燒異種骨作為實驗組，右側植入骼瑞作為對照組。拉攏分離的齦瓣，非吸收線“8”字縫合，關閉拔牙創面。見圖 1a～c。
圖1
實驗動物手術過程
a. 拔除牙齒；b. 材料填充至拔牙窩；c. “8”字縫合；d. 術后防護
Figure1. Surgical procedure of animalsa. Extracted teeth carefully; b. Implanted the material into extraction socket; c. Sutured wound with “8” closure; d. Prevented after implantation
術前 1 d 開始，每天肌肉注射慶大霉素（1.5 U/kg）預防感染，連續 7 d；術后即刻用慶大霉素注射液沖洗傷口預防感染。術后多層無菌紗布覆蓋傷口防止動物舔食傷口，戴犬防咬嘴套防止動物扯掉紗布（圖 1d），每天更換 1 次，同時使用犬口咽清噴劑處理創口，持續 7 d。術后 2 周內給予軟食，2 周后拆除縫線，正常飲食。
1.3 觀測指標
1.3.1 大體觀察
術后 1、6 個月，分別觀察傷口愈合情況，是否有排斥反應，有無腫脹、炎性分泌物，植骨材料有無裸露等。
1.3.2 錐形束 CT 檢查
術后 1、6 個月分別過量麻醉處死 3 只實驗動物，分離上下頜骨，采用 4% 甲醛溶液固定 48 h ，制作標本后行錐形束 CT 檢查，每次均由同一拍攝者在常規條件下拍攝。掃描參數：投照電壓<110 kV，電流<15 mA，有效曝光時間<5.4 s，體素 0.18 mm×0.18 mm×0.18 mm。獲得的 DICOM 格式數據導入 CS 3D Imaging 軟件中，對數據進行三維重建；采用 Image-pro plus6.0 軟件對重建圖片進行分析，測量植骨部位與相鄰參照區（鄰近的第 3 前磨牙兩個牙根中間的骨區）的平均灰度值，計算植骨區與參照區的灰度比。見圖 2。
圖2
錐形束 CT 三維重建
三角形示植骨區，五角星示參照區
Figure2. CBCT three-dimensional reconstruction The triangle indicated the bone graft area, and the pentagon indicated the reference area1.3.3 組織學觀察
術后 1、6 個月拍攝錐形束 CT 后，將包含植骨部位的組織塊采用 50% 甲酸脫鈣處理 70 d，常規系列乙醇脫水，石蠟包埋制備組織學切片，片厚 5 μm，HE 染色，光鏡下觀察植入材料吸收情況和新骨形成情況，評價材料成骨效果。
1.4 統計學方法
采用 SPSS17.0 統計軟件進行分析。數據以均數±標準差表示，組間比較采用配對 t 檢驗；檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 大體觀察
實驗動物無死亡，術后飲食均正常。術后 2 周拆線可見創口基本愈合，植骨材料無裸露。術后 1 個月，兩組創口均愈合良好，牙齦色澤正常，無腫脹；處死動物后取出含植入物的牙槽骨，矢狀位剖開，兩組植入部位均可見白色植骨材料殘留。術后 6 個月，兩組創口均愈合良好，牙齦色澤正常，無腫脹；處死動物后植入部位大體觀察均未見植骨材料。兩組大體觀察結果無明顯差異。見圖 3。
圖3
術后大體觀察
a. 術后 1 個月創口愈合良好；b. 術后 1 個月植入部位可見白色植骨材料；c. 術后 6 個月植入部位未見植骨材料
Figure3. General observation after operationa. The wound healed well at 1 month after operation; b. White material could be seen at 1 month after operation; c. No material could be observed at 6 months after operation
2.2 錐形束 CT 檢查
術后 1 個月，兩組植骨區均可見植骨材料殘留。術后 6 個月，兩組植骨區未見明顯植骨材料殘留，植骨區牙槽嵴高度均未見明顯降低，實驗組和對照組牙槽窩內骨量無明顯差異。見圖 4。術后 1、6 個月實驗組植骨處與對應參照區的灰度比分別為 0.97±0.14、0.93±0.06，對照組分別為 0.99±0.16、0.94±0.05，兩組比較差異均無統計學意義（t=?1.030，P=0.333；t=?0.770，P=0.466）。
圖4
術后錐形束 CT 三維重建
a. 術后 1 個月；b. 術后 6 個月
Figure4. CBCT three-dimensional reconstruction after operationa. At 1 month after operation; b. At 6 months after operation
2.3 組織學觀察
HE 染色示，術后 1 個月，低倍鏡下兩組植骨部位均可見大量植骨材料未完全降解，骨小梁間可見不完整骨移植材料，材料與組織之間界限明顯；高倍鏡下植骨材料周圍可見新生骨組織，多為編織骨，可見新舊骨分界處的黏合線。術后 6 個月，兩組植骨部位植骨材料完全降解，均可見大量成骨，高倍鏡下可見成熟骨單位；實驗組和對照組均未見明顯炎性細胞浸潤。見圖 5。
圖5
術后各時間點 HE 染色觀察
a. 實驗組術后 1 個月（×40），箭頭示不完整的骨移植材料；b. 實驗組術后 1 個月（×400），箭頭示植骨材料周圍可見新生骨；c. 對照組術后 1 個月（×40），箭頭示不完整的骨移植材料；d. 對照組術后 1 個月（×400），箭頭示植骨材料周圍可見新生骨；e. 實驗組術后 6 個月（×40）；f. 實驗組術后 6 個月（×400）；g. 對照組術后 6 個月（×40）；h. 對照組術后 6 個月（×400）
Figure5. HE staining observation at different time points after operationa. Experimental group at 1 month after operation (×40), arrow indicated incomplete bone graft materials; b. Experimental group at 1 month after operation (×400), arrow indicated new bone around the bone graft materials; c. Control group at 1 month after operation (×40), arrow indicated incomplete bone graft materials; d. Control group at 1 month after operation (×400), arrow indicated new bone around the bone graft materials; e. Experimental group at 6 months after operation (×40); f. Experimental group at 6 months after operation (×400); g. Control group at 6 months after operation (×40); h. Control group at 6 months after operation (×400)
3 討論
牙齒拔除后，牙槽嵴的寬度和高度均會發生顯著吸收[11]。為保存牙槽嵴位點，為隨后的種植修復提供良好基礎，許多研究人員以比格犬作為動物模型進行研究，并建立了骨缺損動物模型[12]。研究表明，拔牙后牙槽窩植入羥基磷灰石材料[13]、Bio-Oss 骨粉[14]或骼瑞[9]都能夠在一定程度上促進牙槽骨的缺損修復，達到牙槽嵴位點保存的效果。也有研究表明單獨植入 Bio-Oss Collagen 骨膠原[15-16]用于牙槽窩位點保存的作用不可靠，需要與種植體聯合使用[17]。本實驗將煅燒骨材料植入犬牙槽窩，采用灰度比與植骨處的成骨效果來驗證煅燒骨材料用于牙槽嵴位點保存的有效性。
錐形束 CT 技術因其輻射量低、掃描時間短、費用低廉、偽影減少等優勢[18]，逐漸應用于口腔牙槽骨形態變化的臨床評估工作[19]。錐形束 CT 的灰度值雖不能直接反映確切的骨密度，但與參照區形成的灰度比可以間接反映植骨區的骨密度[20]。本研究以鄰近的第 3 前磨牙牙根處作為參考區，計算植骨處與對應參考區的灰度比來反映植骨處的骨密度恢復情況，具有一定的可行性。我們同時采用 HE 染色對植骨處進行組織學觀察，能直觀反映植骨材料的成骨效果。結果顯示，術后 1 個月，實驗組和對照組植骨材料周圍已有新骨形成；術后 6 個月，植骨材料周圍形成大量新骨并連接成片，具有良好的骨傳導性。術后 6 個月植骨區灰度較術后 1 個月有所降低，是由于術后植骨材料逐步降解，同時有新骨形成，新骨的密度小于植骨材料。術后不同時期實驗組和對照組植骨區灰度比差異均無統計學意義，說明煅燒骨材料與骼瑞成骨效果一致，能夠保持牙槽骨密度。
綜上述，煅燒異種骨材料具有良好的生物安全性和骨傳導性，有望用于牙槽嵴位點保存。煅燒異種骨為無機骨材料，缺乏骨誘導活性，與骨誘導因子聯合使用可以有效提高成骨效果，但是聯合使用的方法與可行性有待進一步研究。
作者貢獻：李晶參與科研設計、實施，數據收集及文章撰寫；喬瑋、任曉琦參與科研實施，圖片處理及數據收集整理；石浩、楊婷參與數據整理及統計分析；馬紹英、趙亞平對文章的知識性內容作批評性審閱；蘇成忠參與文章科研設計及討論部分分析。
利益沖突：所有作者聲明，在課題研究和文章撰寫過程中不存在利益沖突。
機構倫理問題：研究方案經中國輻射防護研究院藥物安全評價中心動物福利倫理委員會批準。實驗動物生產許可證號：SCXK（蘇）2016-0007，實驗動物使用許可證號：SYXK（晉）2013-0002。
