引用本文： 張喆, 陳學明, 李晨宇, 馮海, 于宏志, 朱仁明, 蔡執敏. 生長激素對人工血管內皮化影響的臨床觀察. 中國修復重建外科雜志, 2015, 29(6): 756-760. doi: 10.7507/1002-1892.20150162 復制
動脈閉塞性疾病是血管外科常見病，使用人工血管重建動脈是常用的治療措施，但血管遠期通暢率不理想，主要原因是人工血管移植后血栓形成和內膜增生狹窄，這與人工血管內表面不能自發形成完整的血管內皮細胞（endothelial cells，ECs）覆蓋層有關[1]。如何促進人工血管快速形成完整ECs覆蓋層是解決這一問題的關鍵。研究表明，血液中的血管內皮祖細胞（endothelial progenitor cells，EPCs）可在人工血管內表面沉積分化為新生內皮[2]，生長激素在人體內產生的IGF-Ⅰ能夠促進血液中EPCs的增殖[3]，并通過提高一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）活性抑制ECs凋亡[4]。動物實驗表明，對人工血管移植術后的雜交犬注射重組人生長激素（recombinant human growth hormone，rhGH）能夠促進ECs增殖，抑制內膜過度增生[5]。我們將rhGH應用于臨床人工血管轉流術后患者，旨在觀察其是否具有促進血管內皮化、抑制內膜增生、提高血管通暢率的作用。報告如下。
1 臨床資料
1.1 患者選擇標準
納入標準：① 有慢性下肢缺血癥狀；② 存在間歇性跛行、靜息痛或組織潰瘍；③ 經CT血管造影或磁共振血管造影確診為下肢動脈硬化閉塞癥；④ 根據泛大西洋學會聯盟（TASC）分級標準[6]評定為C級或D級。
排除標準：① 一般狀況差，不能耐受手術者；② 血管病變經術前評估不適宜行血管轉流術治療。
2007年8月－2009年1月共收治94例下肢動脈硬化閉塞癥患者，其中32例（34條患肢）符合選擇標準納入研究。采用隨機數表法將患者分為研究組（16例18條患肢）和對照組（16例16條患肢）。所有患者均知情同意。
1.2 一般資料
研究組：男13例，女3例；年齡51～75歲，平均60.0歲。病程1～10個月，平均3.6個月。病變部位：單側股淺動脈13例，雙側股淺動脈2例，主髂動脈+單側股淺動脈1例。根據TASC分級標準：C級8條，D級10條。合并高血壓10例，糖尿病5例，冠心病7例，腦梗死1例。
對照組：男11例，女5例；年齡56～74歲，平均64.5歲。病程0.5～12個月，平均2.4個月。病變部位：單側股淺動脈15例，主髂動脈+單側股淺動脈1例。根據TASC分級標準：C級4條，D級12條。合并高血壓14例，糖尿病8例，冠心病5例，腦梗死3例。
兩組患者性別、年齡、病程、病變部位、TASC分級及合并基礎疾病比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。
1.3 手術方法
所有手術均由同一組醫師完成。本組28例單側股淺動脈閉塞患者行單側膝上股-腘動脈人工血管轉流術，2例雙側股淺動脈閉塞者同期行雙側手術，2例主髂動脈+單側股淺動脈閉塞者行腹-雙股 +單側股-腘動脈人工血管轉流術。其中單側肢體手術在腰叢神經阻滯麻醉下進行，其余需開腹或雙側肢體同期手術在全麻下進行。患者取仰臥位，作患側腹股溝縱切口，切開淺筋膜及股血管鞘，游離股總動脈；再作膝關節上內側縱切口，切開深筋膜，牽開股內側肌和縫匠肌，游離腘動脈，用手觸摸動脈管壁柔軟程度，確認其能否作流出道。用隧道器穿過兩切口間皮下軟組織制備隧道，將8 mm 膨體聚四氟乙烯人工血管（貝朗公司，德國）穿過隧道，阻斷血管前靜脈給予肝素，然后開始血管吻合。血管近、遠端均用5-0號Prolene線作端-側連續外翻縫合，開放血流后檢查移植物和流出道通暢情況。合并主髂動脈病變者同期行腹-股+股-腘動脈人工血管轉流術。
1.4 術后處理
兩組患者術后均常規給予低分子肝素抗凝治療。研究組于術后當日起每晚皮下注射9 U rhGH [商品名：賽增（Jintropin），長春金賽藥業有限責任公司]，連續應用7 d，并于用藥后監測1 h及2 h血糖水平，如血糖高于10 mmol/ L給予胰島素控制，持續血糖增高且無法通過藥物控制或發生其他嚴重并發癥則立即停用。對照組同時間點皮下注射等量生理鹽水。兩組患者出院后均長期口服拜阿斯匹靈（100 mg，1次/d）抗血小板治療。
1.5 療效評價指標
所有患者于術后2周及3個月接受超聲檢查，均由同一名超聲科醫師完成，觀察比較兩組股-腘人工血管通暢情況和內膜增生情況，包括管腔有無狹窄并測量管壁厚度。測量方法：取人工血管任意3個點，若存在突向管腔的不均勻回聲結構則定義為內膜增生，選取增生最嚴重的區域測量管壁厚度，多次測量取均值。
1.6 統計學方法
采用SPSS16.0統計軟件進行分析。計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗；通暢率評估應用Kaplan-Maier法分析。檢驗水準α=0.05。
2 結果
對照組1例行單側股-腘動脈人工血管轉流術者于術后2 d出現急性血栓形成，行取栓+自體靜脈序貫搭橋，術后1周再次閉塞，最終因腎功能衰竭死亡；兩組其余患者均無嚴重并發癥發生，順利出院。研究組于注射rhGH后監測1 h及2 h血糖水平，未出現無法控制的嚴重血糖升高情況。兩組患者均獲隨訪，隨訪時間36～60個月，平均56.4個月。所有患者（除死亡患者）術后2周經超聲檢查均未發現明顯內膜增生，研究組與對照組的管壁厚度分別為（0.13±0.02）cm和（0.15±0.03）cm，比較差異無統計學意義（t= -1.720，P=0.108）。術后3個月超聲檢查發現對照組7條人工血管內膜增生，其中1條局部管壁厚度達0.4 cm，管腔狹窄75%；而研究組僅2 條見內膜增生。研究組與對照組的管壁厚度分別為（0.17±0.06）cm和（0.26±0.09）cm，比較差異有統計學意義（t= -2.240，P=0.045）。見圖 1。
圖1
兩組患者術后超聲檢查人工血管內膜增生情況 ? 對照組術后2周人工血管內壁光滑 ? 對照組術后3個月人工血管內膜增生 ? 研究組術后2周人工血管內壁光滑 ? 研究組術后3個月人工血管未見內膜增生
Figure1.
Postoperative ultrasonography of intimal hyperplasia in vascular prostheses of 2 groups ? The inner wall of vascular prostheses was smooth in control group at 2 weeks after operation ? Intimal hyperplasia was observed in vascular prostheses in control group at 3 months after operation ? The inner wall of vascular prostheses was smooth in study group at 2 weeks after operation ? No intimal hyperplasia was observed in vascular prostheses in study group at 3 months after operation
研究組術后5年內共8條肢體人工血管閉塞，其中4條肢體行人工血管取栓術（其中2條同期行遠端血管球囊成型及支架植入術），2條肢體行截肢術，2條肢體癥狀較輕采取保守治療。對照組除死亡患者外，其余患者術后5年內共9條肢體人工血管閉塞，其中3條肢體行人工血管取栓術（其中1條同期行遠端血管球囊成型及支架植入術），4條肢體行截肢術，2條肢體癥狀較輕采取保守治療。研究組和對照組人工血管5年一期通暢率分別為52.5%和35.7%，比較差異無統計學意義（χ2=1.470，P=0.225）。見圖 2。
圖2
兩組人工血管5年一期通暢率
Figure2.
The 5-year primary patency rate of vascular prostheses in 2 groups
3 討論
人工血管作為動脈重建的重要材料已在臨床廣泛應用，但血管的遠期通暢率尚不理想。Park等[7]總結了膝上股-腘動脈膨體聚四氟乙烯人工血管與自體大隱靜脈轉流術后的通暢率，結果顯示大隱靜脈轉流術后5年一期通暢率為85.2%，而人工血管僅達64.5%。Rychlik等[8]統計的膝上人工血管旁路移植術治療下肢慢性缺血的10年一期通暢率僅為28%。與自體血管相比，人工血管通暢率低，其原因在于人造移植物無法形成完整的ECs覆蓋層。
研究表明，ECs具有抗血栓形成、抗凝血、調節間質細胞生長、抑制血管平滑肌細胞過度生長的作用[9]。如果ECs損傷或缺如即可誘發血栓形成，在血栓形成的24 h內血管平滑肌細胞開始增生。目前普遍認為人工血管內ECs的來源包括：① 吻合口兩側宿主血管的ECs向人工血管遷移；② 微毛細血管通過人工血管網孔向腔內生長；③ 循環血液中的細胞隨血流沉降到人工血管內表面。血管移植術后宿主ECs僅能在吻合口處延伸數厘米，不能達到完全內皮化的要求；經人工血管網孔向腔內生長的內膜需時較長且易混有較多纖維組織，特別是在植入血流緩慢的小口徑動脈和靜脈時，容易導致血栓形成[1]。自Shi等[10]發現人工血管內壁上的ECs可由外周血中的EPCs沉降分化形成以來，越來越多研究表明EPCs在加速血管內皮化方面起到重要作用[2, 11]。Asahara等[12]將EPCs命名為血管內皮祖細胞或血管內皮前體細胞，它是一種起源于骨髓的原始細胞，類似于胚胎期的成血管細胞，具有高度分化增殖能力，可定向分化為成熟的ECs。正常情況下EPCs數量極少，外周血中只有500～1 000 個 / mL，當腫瘤發生或血管受損時VEGF和bFGF表達增高，外周血EPCs的數量也隨之增加[13]。現已證明存在于骨髓中的EPCs表達VEGF受體2（VEGF receptor 2，VEGFR2）[14]，Ohki等[15]提出增加VEGF濃度應能動員骨髓來源的VEGFR2陽性EPCs，并通過研究證實了此觀點；他們通過刺激粒細胞增殖促進其釋放VEGF，從而增加了外周血EPCs濃度。Hattori等[16]的研究也證實隨著VEGF表達增高，外周血EPCs數量也增加，說明血液中EPCs的濃度與VEGF水平成正相關。
生長激素作為臨床常用藥物，其生理作用是促進物質代謝與生長發育，對機體各個器官和各種組織均有影響。生長激素能誘導靶細胞產生一種具有促生長作用的肽類物質IGF，目前已分離出兩種生長素介質，即IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ，生長激素促進細胞增殖的作用主要是通過IGF-Ⅰ介導。研究表明，IGF-Ⅰ能作用于細胞內的IGF-Ⅰ受體，提高VEGF基因水平，增強VEGF基因轉錄使其表達增加，提高血液中EPCs濃度，并與內皮高親和力的結合位點相互作用提高NOS活性，促進ECs一氧化氮生成，抑制其凋亡，并促進ECs分化[4, 17-18]。Thum等[3]的研究也證明了此觀點，并通過動物及人體實驗進一步論證了rhGH的作用，他們發現注射了rhGH的成年人血液中EPCs的數量和功能均較未用藥的人群明顯提升，同樣的結果也在注射了IGF-Ⅰ的小鼠中得到驗證。以上研究為rhGH提高血液中EPCs沉降分化為ECs，從而促進人工血管內皮化提供了理論依據。我們既往動物實驗[5]表明，在對28只雜交犬移植人工血管后，研究組注射rhGH，分別于術后1、2、3個月取出血管，電鏡觀測結果表明術后2、3個月血管內膜厚度均顯著小于對照組，術后2個月ECs計數明顯多于對照組，提示rhGH可促進人工血管移植后ECs增殖、成熟，有利于抑制其內膜過度增生。本次研究結果顯示，在手術方案相同的情況下，術后2周兩組人工血管管壁厚度無明顯差異，但術后3個月再次復查發現對照組有7條肢體人工血管出現明顯內膜增生，而研究組僅有2條出現，且研究組管壁厚度明顯低于對照組，差異有統計學意義，表明rhGH能夠抑制內膜的過度增生，具有促進人工血管內皮化的作用。
雖然研究組人工血管5年一期通暢率高于對照組，但差異無統計學意義，尚不能證明應用rhGH有助于提高遠期通暢率。但影響人工血管遠期通暢率的因素是多方面的，流入、流出道血管條件差、吸煙、各種原因引起的凝血機制異常、未按時服用抗血小板藥物等都是危險因素。其中流出道的血管條件對于轉流手術遠期效果至關重要[19]，目前認為股-腘動脈人工血管轉流術患者如果有2～3條較通暢的流出道，人工血管3年通暢率比無或僅有1條流出道的患者高2～3倍[20]。研究組和對照組行二次手術干預的患者中，分別有2條和1條肢體在取栓過程中同時行遠端流出道球囊成型及支架植入術，說明血管疾病不斷進展累及流出道后，成為導致橋血管閉塞的原因之一。
本研究采用的rhGH劑量是根據藥品說明書推薦的常規用藥方案制定，在臨床上通常用于促進燒傷創面或術后傷口愈合，主要副作用是一過性高血糖反應。用藥期間我們對患者的血糖水平進行了定時監測，必要時給予胰島素控制，研究組患者均未出現嚴重藥物副反應，說明臨床應用rhGH安全。
綜上述，通過臨床觀察并結合既往研究表明，rhGH具有促進人工血管內皮化的作用，臨床應用能夠抑制術后人工血管內膜過度增生，對于防止人工血管轉流術后血管狹窄具有一定效果。
動脈閉塞性疾病是血管外科常見病，使用人工血管重建動脈是常用的治療措施，但血管遠期通暢率不理想，主要原因是人工血管移植后血栓形成和內膜增生狹窄，這與人工血管內表面不能自發形成完整的血管內皮細胞（endothelial cells，ECs）覆蓋層有關[1]。如何促進人工血管快速形成完整ECs覆蓋層是解決這一問題的關鍵。研究表明，血液中的血管內皮祖細胞（endothelial progenitor cells，EPCs）可在人工血管內表面沉積分化為新生內皮[2]，生長激素在人體內產生的IGF-Ⅰ能夠促進血液中EPCs的增殖[3]，并通過提高一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）活性抑制ECs凋亡[4]。動物實驗表明，對人工血管移植術后的雜交犬注射重組人生長激素（recombinant human growth hormone，rhGH）能夠促進ECs增殖，抑制內膜過度增生[5]。我們將rhGH應用于臨床人工血管轉流術后患者，旨在觀察其是否具有促進血管內皮化、抑制內膜增生、提高血管通暢率的作用。報告如下。
1 臨床資料
1.1 患者選擇標準
納入標準：① 有慢性下肢缺血癥狀；② 存在間歇性跛行、靜息痛或組織潰瘍；③ 經CT血管造影或磁共振血管造影確診為下肢動脈硬化閉塞癥；④ 根據泛大西洋學會聯盟（TASC）分級標準[6]評定為C級或D級。
排除標準：① 一般狀況差，不能耐受手術者；② 血管病變經術前評估不適宜行血管轉流術治療。
2007年8月－2009年1月共收治94例下肢動脈硬化閉塞癥患者，其中32例（34條患肢）符合選擇標準納入研究。采用隨機數表法將患者分為研究組（16例18條患肢）和對照組（16例16條患肢）。所有患者均知情同意。
1.2 一般資料
研究組：男13例，女3例；年齡51～75歲，平均60.0歲。病程1～10個月，平均3.6個月。病變部位：單側股淺動脈13例，雙側股淺動脈2例，主髂動脈+單側股淺動脈1例。根據TASC分級標準：C級8條，D級10條。合并高血壓10例，糖尿病5例，冠心病7例，腦梗死1例。
對照組：男11例，女5例；年齡56～74歲，平均64.5歲。病程0.5～12個月，平均2.4個月。病變部位：單側股淺動脈15例，主髂動脈+單側股淺動脈1例。根據TASC分級標準：C級4條，D級12條。合并高血壓14例，糖尿病8例，冠心病5例，腦梗死3例。
兩組患者性別、年齡、病程、病變部位、TASC分級及合并基礎疾病比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。
1.3 手術方法
所有手術均由同一組醫師完成。本組28例單側股淺動脈閉塞患者行單側膝上股-腘動脈人工血管轉流術，2例雙側股淺動脈閉塞者同期行雙側手術，2例主髂動脈+單側股淺動脈閉塞者行腹-雙股 +單側股-腘動脈人工血管轉流術。其中單側肢體手術在腰叢神經阻滯麻醉下進行，其余需開腹或雙側肢體同期手術在全麻下進行。患者取仰臥位，作患側腹股溝縱切口，切開淺筋膜及股血管鞘，游離股總動脈；再作膝關節上內側縱切口，切開深筋膜，牽開股內側肌和縫匠肌，游離腘動脈，用手觸摸動脈管壁柔軟程度，確認其能否作流出道。用隧道器穿過兩切口間皮下軟組織制備隧道，將8 mm 膨體聚四氟乙烯人工血管（貝朗公司，德國）穿過隧道，阻斷血管前靜脈給予肝素，然后開始血管吻合。血管近、遠端均用5-0號Prolene線作端-側連續外翻縫合，開放血流后檢查移植物和流出道通暢情況。合并主髂動脈病變者同期行腹-股+股-腘動脈人工血管轉流術。
1.4 術后處理
兩組患者術后均常規給予低分子肝素抗凝治療。研究組于術后當日起每晚皮下注射9 U rhGH [商品名：賽增（Jintropin），長春金賽藥業有限責任公司]，連續應用7 d，并于用藥后監測1 h及2 h血糖水平，如血糖高于10 mmol/ L給予胰島素控制，持續血糖增高且無法通過藥物控制或發生其他嚴重并發癥則立即停用。對照組同時間點皮下注射等量生理鹽水。兩組患者出院后均長期口服拜阿斯匹靈（100 mg，1次/d）抗血小板治療。
1.5 療效評價指標
所有患者于術后2周及3個月接受超聲檢查，均由同一名超聲科醫師完成，觀察比較兩組股-腘人工血管通暢情況和內膜增生情況，包括管腔有無狹窄并測量管壁厚度。測量方法：取人工血管任意3個點，若存在突向管腔的不均勻回聲結構則定義為內膜增生，選取增生最嚴重的區域測量管壁厚度，多次測量取均值。
1.6 統計學方法
采用SPSS16.0統計軟件進行分析。計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗；通暢率評估應用Kaplan-Maier法分析。檢驗水準α=0.05。
2 結果
對照組1例行單側股-腘動脈人工血管轉流術者于術后2 d出現急性血栓形成，行取栓+自體靜脈序貫搭橋，術后1周再次閉塞，最終因腎功能衰竭死亡；兩組其余患者均無嚴重并發癥發生，順利出院。研究組于注射rhGH后監測1 h及2 h血糖水平，未出現無法控制的嚴重血糖升高情況。兩組患者均獲隨訪，隨訪時間36～60個月，平均56.4個月。所有患者（除死亡患者）術后2周經超聲檢查均未發現明顯內膜增生，研究組與對照組的管壁厚度分別為（0.13±0.02）cm和（0.15±0.03）cm，比較差異無統計學意義（t= -1.720，P=0.108）。術后3個月超聲檢查發現對照組7條人工血管內膜增生，其中1條局部管壁厚度達0.4 cm，管腔狹窄75%；而研究組僅2 條見內膜增生。研究組與對照組的管壁厚度分別為（0.17±0.06）cm和（0.26±0.09）cm，比較差異有統計學意義（t= -2.240，P=0.045）。見圖 1。
圖1
兩組患者術后超聲檢查人工血管內膜增生情況 ? 對照組術后2周人工血管內壁光滑 ? 對照組術后3個月人工血管內膜增生 ? 研究組術后2周人工血管內壁光滑 ? 研究組術后3個月人工血管未見內膜增生
Figure1.
Postoperative ultrasonography of intimal hyperplasia in vascular prostheses of 2 groups ? The inner wall of vascular prostheses was smooth in control group at 2 weeks after operation ? Intimal hyperplasia was observed in vascular prostheses in control group at 3 months after operation ? The inner wall of vascular prostheses was smooth in study group at 2 weeks after operation ? No intimal hyperplasia was observed in vascular prostheses in study group at 3 months after operation
研究組術后5年內共8條肢體人工血管閉塞，其中4條肢體行人工血管取栓術（其中2條同期行遠端血管球囊成型及支架植入術），2條肢體行截肢術，2條肢體癥狀較輕采取保守治療。對照組除死亡患者外，其余患者術后5年內共9條肢體人工血管閉塞，其中3條肢體行人工血管取栓術（其中1條同期行遠端血管球囊成型及支架植入術），4條肢體行截肢術，2條肢體癥狀較輕采取保守治療。研究組和對照組人工血管5年一期通暢率分別為52.5%和35.7%，比較差異無統計學意義（χ2=1.470，P=0.225）。見圖 2。
圖2
兩組人工血管5年一期通暢率
Figure2.
The 5-year primary patency rate of vascular prostheses in 2 groups
3 討論
人工血管作為動脈重建的重要材料已在臨床廣泛應用，但血管的遠期通暢率尚不理想。Park等[7]總結了膝上股-腘動脈膨體聚四氟乙烯人工血管與自體大隱靜脈轉流術后的通暢率，結果顯示大隱靜脈轉流術后5年一期通暢率為85.2%，而人工血管僅達64.5%。Rychlik等[8]統計的膝上人工血管旁路移植術治療下肢慢性缺血的10年一期通暢率僅為28%。與自體血管相比，人工血管通暢率低，其原因在于人造移植物無法形成完整的ECs覆蓋層。
研究表明，ECs具有抗血栓形成、抗凝血、調節間質細胞生長、抑制血管平滑肌細胞過度生長的作用[9]。如果ECs損傷或缺如即可誘發血栓形成，在血栓形成的24 h內血管平滑肌細胞開始增生。目前普遍認為人工血管內ECs的來源包括：① 吻合口兩側宿主血管的ECs向人工血管遷移；② 微毛細血管通過人工血管網孔向腔內生長；③ 循環血液中的細胞隨血流沉降到人工血管內表面。血管移植術后宿主ECs僅能在吻合口處延伸數厘米，不能達到完全內皮化的要求；經人工血管網孔向腔內生長的內膜需時較長且易混有較多纖維組織，特別是在植入血流緩慢的小口徑動脈和靜脈時，容易導致血栓形成[1]。自Shi等[10]發現人工血管內壁上的ECs可由外周血中的EPCs沉降分化形成以來，越來越多研究表明EPCs在加速血管內皮化方面起到重要作用[2, 11]。Asahara等[12]將EPCs命名為血管內皮祖細胞或血管內皮前體細胞，它是一種起源于骨髓的原始細胞，類似于胚胎期的成血管細胞，具有高度分化增殖能力，可定向分化為成熟的ECs。正常情況下EPCs數量極少，外周血中只有500～1 000 個 / mL，當腫瘤發生或血管受損時VEGF和bFGF表達增高，外周血EPCs的數量也隨之增加[13]。現已證明存在于骨髓中的EPCs表達VEGF受體2（VEGF receptor 2，VEGFR2）[14]，Ohki等[15]提出增加VEGF濃度應能動員骨髓來源的VEGFR2陽性EPCs，并通過研究證實了此觀點；他們通過刺激粒細胞增殖促進其釋放VEGF，從而增加了外周血EPCs濃度。Hattori等[16]的研究也證實隨著VEGF表達增高，外周血EPCs數量也增加，說明血液中EPCs的濃度與VEGF水平成正相關。
生長激素作為臨床常用藥物，其生理作用是促進物質代謝與生長發育，對機體各個器官和各種組織均有影響。生長激素能誘導靶細胞產生一種具有促生長作用的肽類物質IGF，目前已分離出兩種生長素介質，即IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ，生長激素促進細胞增殖的作用主要是通過IGF-Ⅰ介導。研究表明，IGF-Ⅰ能作用于細胞內的IGF-Ⅰ受體，提高VEGF基因水平，增強VEGF基因轉錄使其表達增加，提高血液中EPCs濃度，并與內皮高親和力的結合位點相互作用提高NOS活性，促進ECs一氧化氮生成，抑制其凋亡，并促進ECs分化[4, 17-18]。Thum等[3]的研究也證明了此觀點，并通過動物及人體實驗進一步論證了rhGH的作用，他們發現注射了rhGH的成年人血液中EPCs的數量和功能均較未用藥的人群明顯提升，同樣的結果也在注射了IGF-Ⅰ的小鼠中得到驗證。以上研究為rhGH提高血液中EPCs沉降分化為ECs，從而促進人工血管內皮化提供了理論依據。我們既往動物實驗[5]表明，在對28只雜交犬移植人工血管后，研究組注射rhGH，分別于術后1、2、3個月取出血管，電鏡觀測結果表明術后2、3個月血管內膜厚度均顯著小于對照組，術后2個月ECs計數明顯多于對照組，提示rhGH可促進人工血管移植后ECs增殖、成熟，有利于抑制其內膜過度增生。本次研究結果顯示，在手術方案相同的情況下，術后2周兩組人工血管管壁厚度無明顯差異，但術后3個月再次復查發現對照組有7條肢體人工血管出現明顯內膜增生，而研究組僅有2條出現，且研究組管壁厚度明顯低于對照組，差異有統計學意義，表明rhGH能夠抑制內膜的過度增生，具有促進人工血管內皮化的作用。
雖然研究組人工血管5年一期通暢率高于對照組，但差異無統計學意義，尚不能證明應用rhGH有助于提高遠期通暢率。但影響人工血管遠期通暢率的因素是多方面的，流入、流出道血管條件差、吸煙、各種原因引起的凝血機制異常、未按時服用抗血小板藥物等都是危險因素。其中流出道的血管條件對于轉流手術遠期效果至關重要[19]，目前認為股-腘動脈人工血管轉流術患者如果有2～3條較通暢的流出道，人工血管3年通暢率比無或僅有1條流出道的患者高2～3倍[20]。研究組和對照組行二次手術干預的患者中，分別有2條和1條肢體在取栓過程中同時行遠端流出道球囊成型及支架植入術，說明血管疾病不斷進展累及流出道后，成為導致橋血管閉塞的原因之一。
本研究采用的rhGH劑量是根據藥品說明書推薦的常規用藥方案制定，在臨床上通常用于促進燒傷創面或術后傷口愈合，主要副作用是一過性高血糖反應。用藥期間我們對患者的血糖水平進行了定時監測，必要時給予胰島素控制，研究組患者均未出現嚴重藥物副反應，說明臨床應用rhGH安全。
綜上述，通過臨床觀察并結合既往研究表明，rhGH具有促進人工血管內皮化的作用，臨床應用能夠抑制術后人工血管內膜過度增生，對于防止人工血管轉流術后血管狹窄具有一定效果。
