引用本文： 王久吉, 郭紅民, 趙海洋, 楊進飛, 張江濤. 血清微 RNA 預測非創傷性腦出血早期神經功能惡化的價值分析. 華西醫學, 2023, 38(5): 704-709. doi: 10.7507/1002-0179.202301007 復制
非創傷性腦出血即腦動靜脈血管自發性破裂導致的出血，其作為臨床常見的腦血管疾病，發病率、病死率、復發率較高，可對患者生命健康及生活質量造成嚴重影響，中老年人為其主要發病群體[1]。近年來，隨著生活習慣等的不斷改變以及人口老齡化的不斷加劇，非創傷性腦出血的發病率呈逐年上升趨勢。同時，隨著我國醫療水平的不斷提升，非創傷性腦出血的病死率逐漸降低，但仍有部分患者于創傷早期因出現缺血再灌注損傷而促使病情惡化，影響患者預后。早期神經功能惡化（early neurological deterioration, END）作為非創傷性腦出血常見的早期惡化類型之一，其發生率為 20%～40%[2]，且目前尚無統一的預測手段。Jiang 等[3]研究顯示，上調 miR-141-3p 的表達水平可促進大鼠神經干細胞的發育；Zhang 等[4]研究指出，下調 miR-130a 的表達水平可減輕顱內出血對大鼠神經元的損傷；Gao 等[5]研究顯示，miR-29a-3p 的高水平表達可提高缺氧損傷大鼠神經元活性；李光波等[6]研究指出，低水平 miR-130a、miR-210 的自發性腦出血患者神經功能更好，其表達水平對預測神經功能惡化具有重要的參考價值。可見，微 RNA（microRNA, miRNA）水平可反映神經功能情況，且 miRNA 的血液學檢測具有操作簡便、臨床可操作性強等特點。為提高非創傷性腦出血 END 的預測效果，本研究探討分析了血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平四者聯合檢測對非創傷性腦出血 END 的預測價值。現報告如下。
1 對象與方法
1.1 研究對象
采用便利抽樣法前瞻性選取 2021 年 2 月－2022 年 10 月承德市中心醫院收治入院的非創傷性腦出血患者為研究對象。納入標準：① 符合非創傷性腦出血的診斷標準[7]；② 年齡≥18 歲；③ 發病 12 h 內入院；④ 對本研究知情同意。排除標準：① 發病 72 h 內行腦脊液引流術、側腦室引流術、血腫清除術等手術治療；② 合并嚴重心、肝、腎等功能障礙；③ 患有嚴重血液系統疾病；④ 患有嚴重內分泌系統等原發性疾病；⑤ 發病前合并有精神疾病或認知障礙；⑥ 既往有腦血管畸形、腦腫瘤等腦器質性疾病史；⑦ 既往有腦梗死疾病。本研究內容均已告知患者及家屬知情同意，并獲得承德市中心醫院醫學倫理委員會批準。
1.2 資料收集與分組
收集患者入院時血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平以及 24 h 內神經功能惡化情況，根據患者是否出現神經功能惡化將其分為惡化組與非惡化組。
符合以下條件任意一條即判定為神經功能惡化：① 入院 24 h 內格拉斯哥昏迷量表（Glasgow Coma Scale, GCS）評分降低 2 分及以上；② 美國國立衛生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS）評分增加 4 分及以上[8]。
1.3 主要儀器與試劑
臺式離心機、電熱恒溫水浴槽（廣州吉迪儀器有限公司生產）；NanoDrop 2000C 分光光度計（美國 Thermo Scientific 公司生產）；實時熒光定量聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）儀（美國 Aapplied Biosystems 公司生產）；實時熒光定量 PCR 試劑盒、miRNeasy 微量提取試劑盒（武漢優博生物技術有限公司生產）。
1.4 標本采集與提取
采集患者空腹外周靜脈血 2 mL，4℃、2500 r/min 離心 10 min 后，取上層血清置于離心管內–80℃凍存。取下層紅色細胞碎片加入 2 倍紅細胞裂解液，37℃水浴靜置 10 min 后，1500 r/min 離心 5 min，去除上層液體；加入磷酸鹽緩沖液吹打，再次 1500 r/min 離心 5 min 后，去除上層液體，獲取白細胞；加入總 RNA 抽提試劑（total RNA extraction reagent, Trizol）吹打混勻后，置于離心管內–80℃凍存。將凍存血清及白細胞在冰上溶解后，取 0.2 mL 血清依次加入 Trizol 0.75 mL 與 5 mol/L 醋酸 20 μL 混勻，靜置 5 min 后，加入 0.2 mL 氯仿（取 1 mL 白細胞解凍液直接加入 0.2 mL 氯仿，后續操作與血清操作相同）；靜置 5 min 后，4℃、12000 r/min 離心 15 min，吸取上層水樣液體置于離心管中，加入異丙醇 0.5 mL 混勻；靜置 10 min 后，4℃、12000 r/min 離心 10 min，棄除上清液；白色沉淀（即 RNA）內加入 75% 無水乙醇 1 mL 清洗后，4℃、7500 r/min 離心 5 min，棄除上清液；空氣中干燥 5 min 后，加入雙蒸水充分溶解，并于 60℃孵育 10 min 后，采用 miRNeasy 微量提取試劑盒進行純化。NanoDrop 2000C 分光光度計檢測 A260/A280 為 1.9～2.0 表示純度良好。
1.5 實時熒光定量 PCR 法檢測 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 表達水平
配制 5.5 μL RNA 與引物混合液，70℃孵育 10 min 后，冰上急冷 5 min；4℃、12000 r/min 離心 3 s，加入反轉錄反應液，逆轉錄合成互補 DNA（反應條件為 42℃作用 1 h，70℃作用 15 min，4℃作用 30 min），而后進行實時熒光定量 PCR 擴增（擴增條件為 95℃作用 30 s，95℃作用 5 s，60℃作用 30 s，共循環 45 次），實驗重復 3 次取平均值。內參為 U6，采用 2–△△Ct 法進行基因表達量分析。基因引物序列見表1。
表1
基因引物序列
1.6 統計學方法
采用 SPSS 25.0 軟件進行統計分析。計量資料符合正態分布，以均數±標準差表示，組間比較采用兩獨立樣本 t 檢驗；計數資料以頻數和/或百分比表示，組間比較采用 χ2 檢驗。采用多因素二分類 logistic 回歸分析非創傷性腦出血發生 END 的相關影響因素，計算比值比（odds ratio, OR）及其 95% 置信區間（confidence interval, CI）。采用受試者操作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲線的曲線下面積（area under the curve, AUC）分析 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平單獨及聯合預測非創傷性腦出血 END 的價值（其中聯合預測使用通過 logistic 回歸分析得到的聯合預測概率），并獲取截斷值及對應的靈敏度、特異度、陽性預測值以及陰性預測值。雙側檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 患者 END 發生情況及基本特征分析
共納入 235 例非創傷性腦出血患者，其中男 134 例，女 101 例；年齡 40～82 歲，平均（60.9±11.8）歲。235 例患者中，45 例（19.1%）出現神經功能惡化，設為惡化組，此 45 例均同時滿足入院 24 h 內 GCS 評分降低 2 分及以上、NIHSS 評分增加 4 分及以上；190 例（80.9%）未出現神經功能惡化，設非惡化組。
惡化組患者入院 GCS 評分明顯低于非惡化組，NIHSS 評分明顯高于非惡化組，血腫體積明顯大于非惡化組，破入腦室患者比例明顯高于非惡化組，差異有統計學意義（P<0.05），見表2。
表2
兩組患者基本特征分析
2.2 兩組患者 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平對比
惡化組患者 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平明顯低于非惡化組，miR-130a、miR-210 水平明顯高于非惡化組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。
表3
兩組患者 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平對比（
，ng/mL）
2.3 END 發生的多因素 logistic 回歸分析
以是否發生 END 為因變量（發生=1；未發生=0），入院時 GCS 評分（連續變量）、NIHSS 評分（連續變量）、血腫體積（連續變量）、破入腦室（是=1；否=0）、miR-141-3p 水平（連續變量）、miR-130a 水平（連續變量）、miR-29a-3p 水平（連續變量）、miR-210 水平（連續變量）為自變量，進行多因素二分類 logistic 回歸分析。結果顯示，入院時 GCS 評分、NIHSS 評分以及血清 miR-130a、miR-210 水平是非創傷性腦出血 END 發生的獨立危險因素（P<0.05），血清 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平是非創傷性腦出血 END 發生的保護因素（P<0.05），見表4。
表4
非創傷性腦出血 END 發生的多因素 logistic 回歸分析
2.4 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平在非創傷性腦出血 END 中的預測價值分析
以是否發生 END 為因變量（發生=1；未發生=0），miR-141-3p 水平、miR-130a 水平、miR-29a-3p 水平、miR-210 水平為自變量（均為連續變量），進行多因素二分類 logistic 回歸分析，得到 4 項指標聯合的預測概率，繼而以 4 項指標聯合的預測概率進行 ROC 曲線分析。結果顯示，聯合檢測血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平預測非創傷性腦出血 END 的 AUC 為 0.857，根據聯合檢測的預測概率截斷值判定非創傷性腦出血 END 的靈敏度為 86.7%，特異度為 94.7%，陽性預測值為 79.6%，陰性預測值為 96.8%，見表5、圖1。
表5
miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平單獨及聯合檢測對非創傷性腦出血 END 的預測價值
圖1
miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平預測非創傷性腦出血早期神經功能惡化的受試者操作特征曲線圖
3 討論
作為臨床常見疾病，非創傷性腦出血具有較高的發病率及死亡率，其發病群體以中老年人群為主，發病率呈逐年上升趨勢，且受社會環境等眾多因素影響，發病年齡呈年輕化趨勢[9]。非創傷性腦出血對腦組織的擠壓以及腦組織水腫等，可造成腦組織不可逆性損傷，同時引發對應的神經功能缺失[10]。出血量逐漸增多是造成神經功能惡化、死亡等病情進展的主要因素[11-12]，而如何有效預測病情進展是改善患者預后的關鍵。
miRNA 是具有調控功能的非編碼小分子 RNA，可通過阻止或降解 mRNA 轉錄在細胞發育及基因調控等多層面發揮重要作用[13-14]。近年來部分研究學者發現，miRNA 作為潛在的生物標志物，其表達水平與心腦血管疾病的發生發展及神經系統發育及功能密切相關[15-17]。本研究鑒于腦組織內 miRNA 的表達水平與外周血內近乎平行，觀察了非創傷性腦出血后出現 END 的患者與未出現 END 的患者血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平的差異，結果顯示，出現 END 的惡化組患者血清 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平明顯低于未出現 END 的非惡化組，miR-130a、miR-210 水平明顯高于未出現 END 的非惡化組；且多因素 logistic 回歸分析結果顯示，血清 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平是非創傷性腦出血 END 發生的保護因素，發揮保護作用，而血清 miR-130a、miR-210 水平是非創傷性腦出血 END 發生的獨立危險因素，發揮促進作用，這與既往研究結果相一致。如 Yu 等[18]研究顯示，miR-141-3p 具有抗炎作用，可通過調節高遷移率族蛋白 B1 水平而抑制白細胞介素-6、腫瘤壞死因子-α 等促炎因子的表達，緩解機體炎癥反應，減少細胞凋亡壞死；上調其表達水平可抑制信號轉導及轉錄激活子-4 的表達而降低機體炎癥反應介導的神經損傷，減輕神經功能能缺損癥狀，降低患者死亡率。Zhang 等[4]研究顯示，miR-130a 可通過調節小凹蛋白-1/基質金屬蛋白酶-2（caveolin-1/matrix metalloproteinase-2）通路活性而影響血腦屏障通透性，下調其表達水平可顯著降低血腦屏障通透性，改善微循環狀態，減輕腦水腫程度。臧雪風等[19]研究顯示，miR-29a-3p 可通過減少Ⅰ型膠原蛋白的沉積而提高血管彈性，抑制血管破裂出血，其表達缺失可誘導大量炎癥因子的釋放，加劇腦水腫程度，加重神經系統損傷。李光波等[6]研究顯示，miR-210 具有缺氧相關性，在缺氧狀態下，其表達水平明顯上調，可促進血管生成；抑制急性腦出血患者 miR-210 的表達，可降低血腦屏障通透性，減輕腦水腫程度。進一步分析各 miRNA 在非創傷性腦出血 END 中的預測價值發現，用 logistic 回歸獲得的血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平的聯合概率可有效預測非創傷性腦出血 END 的發生，且預測價值較高。
綜上所述，血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 在非創傷性腦出血 END 的發生中具有較高的預測價值。但本研究對象均選自同一家醫院，結果適用性仍需開展多中心大樣本研究予以驗證。另外，如何根據預測結果給予高危患者針對性的防控，以改善患者預后，是未來的研究方向。
利益沖突：所有作者聲明不存在利益沖突。
非創傷性腦出血即腦動靜脈血管自發性破裂導致的出血，其作為臨床常見的腦血管疾病，發病率、病死率、復發率較高，可對患者生命健康及生活質量造成嚴重影響，中老年人為其主要發病群體[1]。近年來，隨著生活習慣等的不斷改變以及人口老齡化的不斷加劇，非創傷性腦出血的發病率呈逐年上升趨勢。同時，隨著我國醫療水平的不斷提升，非創傷性腦出血的病死率逐漸降低，但仍有部分患者于創傷早期因出現缺血再灌注損傷而促使病情惡化，影響患者預后。早期神經功能惡化（early neurological deterioration, END）作為非創傷性腦出血常見的早期惡化類型之一，其發生率為 20%～40%[2]，且目前尚無統一的預測手段。Jiang 等[3]研究顯示，上調 miR-141-3p 的表達水平可促進大鼠神經干細胞的發育；Zhang 等[4]研究指出，下調 miR-130a 的表達水平可減輕顱內出血對大鼠神經元的損傷；Gao 等[5]研究顯示，miR-29a-3p 的高水平表達可提高缺氧損傷大鼠神經元活性；李光波等[6]研究指出，低水平 miR-130a、miR-210 的自發性腦出血患者神經功能更好，其表達水平對預測神經功能惡化具有重要的參考價值。可見，微 RNA（microRNA, miRNA）水平可反映神經功能情況，且 miRNA 的血液學檢測具有操作簡便、臨床可操作性強等特點。為提高非創傷性腦出血 END 的預測效果，本研究探討分析了血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平四者聯合檢測對非創傷性腦出血 END 的預測價值。現報告如下。
1 對象與方法
1.1 研究對象
采用便利抽樣法前瞻性選取 2021 年 2 月－2022 年 10 月承德市中心醫院收治入院的非創傷性腦出血患者為研究對象。納入標準：① 符合非創傷性腦出血的診斷標準[7]；② 年齡≥18 歲；③ 發病 12 h 內入院；④ 對本研究知情同意。排除標準：① 發病 72 h 內行腦脊液引流術、側腦室引流術、血腫清除術等手術治療；② 合并嚴重心、肝、腎等功能障礙；③ 患有嚴重血液系統疾病；④ 患有嚴重內分泌系統等原發性疾病；⑤ 發病前合并有精神疾病或認知障礙；⑥ 既往有腦血管畸形、腦腫瘤等腦器質性疾病史；⑦ 既往有腦梗死疾病。本研究內容均已告知患者及家屬知情同意，并獲得承德市中心醫院醫學倫理委員會批準。
1.2 資料收集與分組
收集患者入院時血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平以及 24 h 內神經功能惡化情況，根據患者是否出現神經功能惡化將其分為惡化組與非惡化組。
符合以下條件任意一條即判定為神經功能惡化：① 入院 24 h 內格拉斯哥昏迷量表（Glasgow Coma Scale, GCS）評分降低 2 分及以上；② 美國國立衛生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS）評分增加 4 分及以上[8]。
1.3 主要儀器與試劑
臺式離心機、電熱恒溫水浴槽（廣州吉迪儀器有限公司生產）；NanoDrop 2000C 分光光度計（美國 Thermo Scientific 公司生產）；實時熒光定量聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）儀（美國 Aapplied Biosystems 公司生產）；實時熒光定量 PCR 試劑盒、miRNeasy 微量提取試劑盒（武漢優博生物技術有限公司生產）。
1.4 標本采集與提取
采集患者空腹外周靜脈血 2 mL，4℃、2500 r/min 離心 10 min 后，取上層血清置于離心管內–80℃凍存。取下層紅色細胞碎片加入 2 倍紅細胞裂解液，37℃水浴靜置 10 min 后，1500 r/min 離心 5 min，去除上層液體；加入磷酸鹽緩沖液吹打，再次 1500 r/min 離心 5 min 后，去除上層液體，獲取白細胞；加入總 RNA 抽提試劑（total RNA extraction reagent, Trizol）吹打混勻后，置于離心管內–80℃凍存。將凍存血清及白細胞在冰上溶解后，取 0.2 mL 血清依次加入 Trizol 0.75 mL 與 5 mol/L 醋酸 20 μL 混勻，靜置 5 min 后，加入 0.2 mL 氯仿（取 1 mL 白細胞解凍液直接加入 0.2 mL 氯仿，后續操作與血清操作相同）；靜置 5 min 后，4℃、12000 r/min 離心 15 min，吸取上層水樣液體置于離心管中，加入異丙醇 0.5 mL 混勻；靜置 10 min 后，4℃、12000 r/min 離心 10 min，棄除上清液；白色沉淀（即 RNA）內加入 75% 無水乙醇 1 mL 清洗后，4℃、7500 r/min 離心 5 min，棄除上清液；空氣中干燥 5 min 后，加入雙蒸水充分溶解，并于 60℃孵育 10 min 后，采用 miRNeasy 微量提取試劑盒進行純化。NanoDrop 2000C 分光光度計檢測 A260/A280 為 1.9～2.0 表示純度良好。
1.5 實時熒光定量 PCR 法檢測 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 表達水平
配制 5.5 μL RNA 與引物混合液，70℃孵育 10 min 后，冰上急冷 5 min；4℃、12000 r/min 離心 3 s，加入反轉錄反應液，逆轉錄合成互補 DNA（反應條件為 42℃作用 1 h，70℃作用 15 min，4℃作用 30 min），而后進行實時熒光定量 PCR 擴增（擴增條件為 95℃作用 30 s，95℃作用 5 s，60℃作用 30 s，共循環 45 次），實驗重復 3 次取平均值。內參為 U6，采用 2–△△Ct 法進行基因表達量分析。基因引物序列見表1。
表1
基因引物序列
1.6 統計學方法
采用 SPSS 25.0 軟件進行統計分析。計量資料符合正態分布，以均數±標準差表示，組間比較采用兩獨立樣本 t 檢驗；計數資料以頻數和/或百分比表示，組間比較采用 χ2 檢驗。采用多因素二分類 logistic 回歸分析非創傷性腦出血發生 END 的相關影響因素，計算比值比（odds ratio, OR）及其 95% 置信區間（confidence interval, CI）。采用受試者操作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲線的曲線下面積（area under the curve, AUC）分析 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平單獨及聯合預測非創傷性腦出血 END 的價值（其中聯合預測使用通過 logistic 回歸分析得到的聯合預測概率），并獲取截斷值及對應的靈敏度、特異度、陽性預測值以及陰性預測值。雙側檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 患者 END 發生情況及基本特征分析
共納入 235 例非創傷性腦出血患者，其中男 134 例，女 101 例；年齡 40～82 歲，平均（60.9±11.8）歲。235 例患者中，45 例（19.1%）出現神經功能惡化，設為惡化組，此 45 例均同時滿足入院 24 h 內 GCS 評分降低 2 分及以上、NIHSS 評分增加 4 分及以上；190 例（80.9%）未出現神經功能惡化，設非惡化組。
惡化組患者入院 GCS 評分明顯低于非惡化組，NIHSS 評分明顯高于非惡化組，血腫體積明顯大于非惡化組，破入腦室患者比例明顯高于非惡化組，差異有統計學意義（P<0.05），見表2。
表2
兩組患者基本特征分析
2.2 兩組患者 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平對比
惡化組患者 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平明顯低于非惡化組，miR-130a、miR-210 水平明顯高于非惡化組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。
表3
兩組患者 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平對比（，ng/mL）
2.3 END 發生的多因素 logistic 回歸分析
以是否發生 END 為因變量（發生=1；未發生=0），入院時 GCS 評分（連續變量）、NIHSS 評分（連續變量）、血腫體積（連續變量）、破入腦室（是=1；否=0）、miR-141-3p 水平（連續變量）、miR-130a 水平（連續變量）、miR-29a-3p 水平（連續變量）、miR-210 水平（連續變量）為自變量，進行多因素二分類 logistic 回歸分析。結果顯示，入院時 GCS 評分、NIHSS 評分以及血清 miR-130a、miR-210 水平是非創傷性腦出血 END 發生的獨立危險因素（P<0.05），血清 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平是非創傷性腦出血 END 發生的保護因素（P<0.05），見表4。
表4
非創傷性腦出血 END 發生的多因素 logistic 回歸分析
2.4 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平在非創傷性腦出血 END 中的預測價值分析
以是否發生 END 為因變量（發生=1；未發生=0），miR-141-3p 水平、miR-130a 水平、miR-29a-3p 水平、miR-210 水平為自變量（均為連續變量），進行多因素二分類 logistic 回歸分析，得到 4 項指標聯合的預測概率，繼而以 4 項指標聯合的預測概率進行 ROC 曲線分析。結果顯示，聯合檢測血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平預測非創傷性腦出血 END 的 AUC 為 0.857，根據聯合檢測的預測概率截斷值判定非創傷性腦出血 END 的靈敏度為 86.7%，特異度為 94.7%，陽性預測值為 79.6%，陰性預測值為 96.8%，見表5、圖1。
表5
miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平單獨及聯合檢測對非創傷性腦出血 END 的預測價值
圖1
miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平預測非創傷性腦出血早期神經功能惡化的受試者操作特征曲線圖
3 討論
作為臨床常見疾病，非創傷性腦出血具有較高的發病率及死亡率，其發病群體以中老年人群為主，發病率呈逐年上升趨勢，且受社會環境等眾多因素影響，發病年齡呈年輕化趨勢[9]。非創傷性腦出血對腦組織的擠壓以及腦組織水腫等，可造成腦組織不可逆性損傷，同時引發對應的神經功能缺失[10]。出血量逐漸增多是造成神經功能惡化、死亡等病情進展的主要因素[11-12]，而如何有效預測病情進展是改善患者預后的關鍵。
miRNA 是具有調控功能的非編碼小分子 RNA，可通過阻止或降解 mRNA 轉錄在細胞發育及基因調控等多層面發揮重要作用[13-14]。近年來部分研究學者發現，miRNA 作為潛在的生物標志物，其表達水平與心腦血管疾病的發生發展及神經系統發育及功能密切相關[15-17]。本研究鑒于腦組織內 miRNA 的表達水平與外周血內近乎平行，觀察了非創傷性腦出血后出現 END 的患者與未出現 END 的患者血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平的差異，結果顯示，出現 END 的惡化組患者血清 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平明顯低于未出現 END 的非惡化組，miR-130a、miR-210 水平明顯高于未出現 END 的非惡化組；且多因素 logistic 回歸分析結果顯示，血清 miR-141-3p、miR-29a-3p 水平是非創傷性腦出血 END 發生的保護因素，發揮保護作用，而血清 miR-130a、miR-210 水平是非創傷性腦出血 END 發生的獨立危險因素，發揮促進作用，這與既往研究結果相一致。如 Yu 等[18]研究顯示，miR-141-3p 具有抗炎作用，可通過調節高遷移率族蛋白 B1 水平而抑制白細胞介素-6、腫瘤壞死因子-α 等促炎因子的表達，緩解機體炎癥反應，減少細胞凋亡壞死；上調其表達水平可抑制信號轉導及轉錄激活子-4 的表達而降低機體炎癥反應介導的神經損傷，減輕神經功能能缺損癥狀，降低患者死亡率。Zhang 等[4]研究顯示，miR-130a 可通過調節小凹蛋白-1/基質金屬蛋白酶-2（caveolin-1/matrix metalloproteinase-2）通路活性而影響血腦屏障通透性，下調其表達水平可顯著降低血腦屏障通透性，改善微循環狀態，減輕腦水腫程度。臧雪風等[19]研究顯示，miR-29a-3p 可通過減少Ⅰ型膠原蛋白的沉積而提高血管彈性，抑制血管破裂出血，其表達缺失可誘導大量炎癥因子的釋放，加劇腦水腫程度，加重神經系統損傷。李光波等[6]研究顯示，miR-210 具有缺氧相關性，在缺氧狀態下，其表達水平明顯上調，可促進血管生成；抑制急性腦出血患者 miR-210 的表達，可降低血腦屏障通透性，減輕腦水腫程度。進一步分析各 miRNA 在非創傷性腦出血 END 中的預測價值發現，用 logistic 回歸獲得的血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 水平的聯合概率可有效預測非創傷性腦出血 END 的發生，且預測價值較高。
綜上所述，血清 miR-141-3p、miR-130a、miR-29a-3p、miR-210 在非創傷性腦出血 END 的發生中具有較高的預測價值。但本研究對象均選自同一家醫院，結果適用性仍需開展多中心大樣本研究予以驗證。另外，如何根據預測結果給予高危患者針對性的防控，以改善患者預后，是未來的研究方向。
利益沖突：所有作者聲明不存在利益沖突。
