引用本文： 林燕, 李婧, 余湘尤, 劉玲嬌, 閆妮, 段朝陽. 核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白 3 炎性小體和 1-磷酸鞘氨醇對早期糖尿病腎病及其進展情況的診斷價值研究. 華西醫學, 2022, 37(7): 1035-1040. doi: 10.7507/1002-0179.202108088 復制
糖尿病是一類常見的以并發癥多和病程長為特征的慢性疾病，近年來在我國成年人中患病率呈持續非線性增長[1]。腎微血管病變作為糖尿病最常見的微血管并發癥之一，與非酶糖基化終產物所致腎小球基底膜增厚等病理損傷共同導致糖尿病腎病、腎病綜合征甚至腎功能不全等[2-3]。糖尿病腎病的早期診斷對防治疾病進展具有重要臨床意義，但通過常規的腎功能監測指標如尿素氮、肌酐等難以診斷腎臟早期損傷，而 24 h 尿蛋白定量以及尿β2-微球蛋白等腎臟早期損傷標志物檢測具有留取樣本過程較復雜、診斷影響因素多等缺點[4]。因此，發現新的特異性早期診斷標志物有助于提高早期糖尿病腎病的風險預測和診斷率。核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白 3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein ，NLRP3）炎性小體在腎臟炎性反應中扮演重要角色，可誘發糖尿病患者的腎損傷[5]；1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate，S1P）作為一種脂質酶，在糖尿病腎病的發生和發展中起到重要作用，參與了高糖刺激腎小球系膜細胞合成細胞外基質等的病理過程并可共同造成腎損傷[6]。然而，目前鮮有將 NLRP3 炎性小體和 S1P 水平用于糖尿病腎病診斷的研究，因此，本研究對二者用于診斷早期糖尿病腎病及判斷患者病情進展情況的臨床價值進行探討。
1 資料與方法
1.1 研究對象
根據糖尿病腎病發病率估算樣本量后，采用隨機數字表法選擇 2018 年 01 月－2020 年 12 月在陜西省人民醫院就診的 600 例確診的糖尿病患者。納入標準：確診為糖尿病或糖尿病腎病Ⅲ期及Ⅳ期[7-8]的患者。排除標準（滿足任意一條）：其他病因所致腎病者；心臟和肝功能嚴重不全；慢性感染性疾病病史者，或住院期間合并急性感染者；風濕或類風濕性關節炎病史；結締組織病病史；既往應用激素、免疫抑制劑等藥物者。本研究已通過陜西省人民醫院倫理委員會批準（編號為 20170034），并已獲得研究對象或其親屬的知情同意。根據臨床診斷標準[7-8]將患者分為單純糖尿病組、早期糖尿病腎病組（即糖尿病腎病 Mogensen 臨床分期Ⅲ期—持續性微量白蛋白尿期，腎小球濾過率正常）和臨床糖尿病腎病組（即糖尿病腎病 Mogensen 臨床分期Ⅳ期—顯性蛋白尿期，尿蛋白陽性且蛋白尿可達腎病程度，腎小球濾過率下降）。
1.2 方法
1.2.1 NLRP3 信使 RNA（messenger RNA，mRNA）檢測
抽取所有患者早晨空腹靜脈血 5 mL，分裝為兩管，分別用于 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平檢測。應用實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測血 NLRP3 mRNA 表達：首先通過淋巴細胞分離液分離單個核細胞，trizol 試劑（美國 Invitrogen 公司）提取總 RNA，檢測總 RNA 濃度，隨后將 RNA 逆轉錄合成互補 DNA，采用熒光定量聚合酶鏈反應試劑盒［寶日醫生物技術（北京）有限公司］進行實時熒光定量聚合酶鏈反應擴增。擴增條件：94℃預變性 5 min，94℃ 30 s、60℃ 30 s、72℃ 30 s，共 35 個循環；72℃延伸 5 min，計算 Ct 值，基因相對表達量以 2?ΔΔCt 表示。NLRP3 和內參β-actin 引物由上海生工生物有限公司設計合成，見表1。
表1
引物序列
1.2.2 S1P 水平檢測
抗凝血 4℃，1000 r/min，離心 5 min，取上層清液，采用酶聯免疫吸附測定雙抗體夾心法檢測血清 S1P 水平。人 S1P 酶聯免疫吸附檢測試劑盒購自研域生物技術（上海）有限公司。
1.3 統計學方法
所有數據用 SPSS 21.0 軟件進行統計分析，計數資料以例數（百分比）表示，組間比較采用χ2 檢驗；計量資料以均數±標準差表示，方差齊時采用單因素方差分析進行組間比較，組間比較差異有統計學意義時，進一步采用 LSD-t 檢驗進行組間兩兩比較，如方差不齊則采用 Welch 檢驗進行組間比較，隨后組間比較差異有統計學意義時則采用 Games-Howell 檢驗進行組間兩兩比較。通過 Pearson 相關性分析探討血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平的相關性。根據受試者操作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲線評價血 NLRP3 mRNA、S1P 水平以及聯合指標對早期糖尿病腎病以及臨床糖尿病腎病的診斷價值，其中聯合指標通過二分類 logistic 回歸分析計算預測概率值獲得，隨后采用 Hanley & McNeil 檢驗比較 ROC 曲線下面積。雙側檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 患者年齡和性別比較
600 例患者中，單純糖尿病組 205 例、早期糖尿病腎病組 198 例和臨床糖尿病腎病組 197 例。男性 351 例，女性 249 例，平均年齡（67.54±8.73）歲。3 組患者的年齡和性別差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。
表2
各組患者年齡和性別比較
2.2 患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平比較
臨床糖尿病腎病組患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平高于單純糖尿病組和早期糖尿病腎病組，差異有統計學意義（P<0.05）；早期糖尿病腎病組患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平高于單純糖尿病組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。
表3
各組患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平（
）
2.3 血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平的相關性
Pearson 相關性分析結果顯示，患者血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平存在正相關關系（r=0.455，P<0.001）。見圖1。
圖1
NLRP3 mRNA 與 S1P 水平的相關性散點圖
2.4 血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對早期糖尿病腎病的診斷價值
由 ROC 曲線分析可見，血 NLRP3 mRNA、S1P 水平及兩者聯合檢測用以從糖尿病患者中診斷早期糖尿病腎病的 ROC 曲線下面積分別為 0.645、0.968、0.971（P<0.001）。其中血 NLRP3 mRNA 診斷早期糖尿病腎病的最佳臨界值為 1.86，血 S1P 水平的最佳臨界值為 1.01 μmol/L。以上述最佳臨界值為早期糖尿病腎病的陽性判斷標準，統計各指標單獨及聯合檢測的診斷效能，發現聯合檢測的診斷效能高于血 NLRP3 mRNA，差異有統計學意義（Z=11.927，P<0.001）；但與血 S1P 水平的診斷效能相比，差異無統計學意義（Z=1.221，P=0.222）。見圖2、表4。
圖2
血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平診斷早期糖尿病腎病的 ROC 曲線
表4
ROC 曲線分析血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對早期糖尿病腎病的診斷價值
2.5 血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對臨床糖尿病腎病的診斷價值
由 ROC 曲線分析可見，血 NLRP3 mRNA、S1P 水平及兩者聯合檢測用以從早期糖尿病腎病患者中診斷臨床糖尿病腎病的 ROC 曲線下面積分別為 0.825、0.918、0.945（P<0.001）。其中血 NLRP3 mRNA 診斷臨床糖尿病腎病的最佳臨界值為 2.22，血 S1P 水平的最佳臨界值為 1.31 μmol/L。以上述最佳臨界值為臨床糖尿病腎病的陽性判斷標準，統計各指標單獨及聯合檢測的診斷效能，發現聯合檢測的診斷效能顯著高于血 NLRP3 mRNA 與血 S1P 水平，差異均有統計學意義（Z 值分別為 7.617、3.187，P 值分別為<0.001、0.001）。見表5、圖3。
圖3
血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平診斷臨床糖尿病腎病的 ROC 曲線
表5
ROC 曲線分析血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對臨床糖尿病腎病的診斷價值
3 討論
糖尿病作為較為常見的一類以代謝異常為主的慢性內分泌疾病，其發病率正在逐年增長，嚴重影響了居民的身心健康[9]。糖尿病腎病是糖尿病最常見的并發癥之一，我國居民的發病率亦呈上升趨勢，目前已成為終末期腎臟疾病的第 2 位原因[10]。由于糖尿病腎病發病機制極其復雜，一旦進展至終末期，基本已無治愈可能，而研究表明，對其進行早期診斷并有效干預，可有望阻止或延緩甚至逆轉進展，可使患者的生活質量明顯改善，并使生存期延長[11]。
據報道，代謝異常如高血糖可誘導系膜細胞表達 NLRP3 炎性小體并促使其激活，導致腎臟膠原蓄積、系膜面積增加，進而在糖尿病所致腎損傷的進程中發揮關鍵作用[12-14]。另外，NLRP3 炎性小體激活還可抑制高血糖時足細胞通過自噬實現保護性作用，導致足細胞損傷、腎小球硬化[15-18]；可激活 Toll 樣受體 4/核因子κB 信號通路，導致腎間質炎癥及腎小管上皮細胞轉分化[18-19]，進而促進糖尿病腎臟損傷。而對 NLRP3 炎性小體及其介導的炎癥反應進行干預有可能發揮改善糖尿病足細胞損傷及糖尿病腎病腎功能、延緩糖尿病腎病發展的作用[20-21]。本研究結果顯示，早期糖尿病腎病組患者血 NLRP3 mRNA 濃度高于單純糖尿病組，但低于臨床糖尿病腎病組，進一步提示血 NLRP3 炎性小體的激活與糖尿病所致腎損傷有關，且可能與腎臟損傷的程度相關。蔣東波等[22]研究發現，糖尿病腎病患者腎臟組織中 NLRP3 陽性表達率以及 NLRP3 表達水平均高于非糖尿病腎病患者；黃秀麗等[23]研究發現，老年糖尿病腎病患者外周血單個核細胞中 NLRP3 炎性小體水平與尿微量白蛋白呈正相關。以上結論均與本研究一致，進一步提示了 NLRP3 在糖尿病所致腎臟損傷中的作用。然而，NLRP3 炎性小體與糖尿病患者腎臟損害的關系仍需動物實驗進一步驗證，并結合腎臟病理損傷等指標深入探索。
糖尿病可以引起腎小球硬化、腎血管改變以及間質小管的萎縮和纖維化，其中腎小球系膜細胞的肥大、細胞外基質的過度生成和沉積導致的系膜區增生以及腎小球基膜增厚是糖尿病腎病早期典型的病理表現，而 S1P 除可刺激腎小球系膜細胞增殖、細胞外基質積累并促進腎臟纖維化、導致腎損傷[24-26]，還可通過激活 G 蛋白信號通路引起系膜增殖，進而促進糖尿病腎病進展[27-28]。本研究結果顯示，早期糖尿病腎病組患者血 S1P 水平高于單純糖尿病組，但低于臨床糖尿病腎病組。然而，有研究發現，S1P 可以保護腎小管上皮細胞的屏障功能及舒張功能，還可改善腎臟微循環[6, 29]；趙郁松等[30]研究發現，經治療 6 個月后仍病情進展的糖尿病腎病患者的 S1P 水平顯著低于病情未進展者，S1P 水平可用于預測糖尿病腎病患者經治療后的進展風險。導致上述與本研究結果不一致現象的原因可能是 S1P 通過 2 種作用相反的受體 S1P1 與 S1P2 發揮生物學作用，而糖尿病腎病時引起血管損傷的 S1P2 受體表達相對上調所致[28, 31]。因此，糖尿病患者血 S1P 水平增高是腎臟損傷的促進因素還是代償性保護因素，有待進一步研究。
本研究進一步發現，糖尿病患者血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平存在正相關關系，且血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平以及聯合檢測均可用以判斷糖尿病患者是否發生早期糖尿病腎病以及是否進展至臨床糖尿病腎病。雖然，NLRP3 mRNA 用于診斷早期糖尿病腎病的 ROC 曲線下面積僅為 0.645，診斷價值一般，但與 S1P 水平聯合診斷的 ROC 曲線下面積卻可顯著提高至 0.971。因此，如果可在臨床工作中聯合血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平進行診斷，可能大大降低早期糖尿病腎病的漏診率，為臨床早期發現腎損傷提供依據，而且也可能更準確地把握患者由早期糖尿病腎病發展為臨床糖尿病腎病的時機，從而及時調整治療策略。
綜上所述，通過檢測糖尿病患者血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平變化，可以及時發現早期糖尿病腎病并用以監測其進展情況，為糖尿病腎病的早期診斷和及時、有效治療提供重要的臨床參考。
利益沖突：所有作者聲明不存在利益沖突。
糖尿病是一類常見的以并發癥多和病程長為特征的慢性疾病，近年來在我國成年人中患病率呈持續非線性增長[1]。腎微血管病變作為糖尿病最常見的微血管并發癥之一，與非酶糖基化終產物所致腎小球基底膜增厚等病理損傷共同導致糖尿病腎病、腎病綜合征甚至腎功能不全等[2-3]。糖尿病腎病的早期診斷對防治疾病進展具有重要臨床意義，但通過常規的腎功能監測指標如尿素氮、肌酐等難以診斷腎臟早期損傷，而 24 h 尿蛋白定量以及尿β2-微球蛋白等腎臟早期損傷標志物檢測具有留取樣本過程較復雜、診斷影響因素多等缺點[4]。因此，發現新的特異性早期診斷標志物有助于提高早期糖尿病腎病的風險預測和診斷率。核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白 3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein ，NLRP3）炎性小體在腎臟炎性反應中扮演重要角色，可誘發糖尿病患者的腎損傷[5]；1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate，S1P）作為一種脂質酶，在糖尿病腎病的發生和發展中起到重要作用，參與了高糖刺激腎小球系膜細胞合成細胞外基質等的病理過程并可共同造成腎損傷[6]。然而，目前鮮有將 NLRP3 炎性小體和 S1P 水平用于糖尿病腎病診斷的研究，因此，本研究對二者用于診斷早期糖尿病腎病及判斷患者病情進展情況的臨床價值進行探討。
1 資料與方法
1.1 研究對象
根據糖尿病腎病發病率估算樣本量后，采用隨機數字表法選擇 2018 年 01 月－2020 年 12 月在陜西省人民醫院就診的 600 例確診的糖尿病患者。納入標準：確診為糖尿病或糖尿病腎病Ⅲ期及Ⅳ期[7-8]的患者。排除標準（滿足任意一條）：其他病因所致腎病者；心臟和肝功能嚴重不全；慢性感染性疾病病史者，或住院期間合并急性感染者；風濕或類風濕性關節炎病史；結締組織病病史；既往應用激素、免疫抑制劑等藥物者。本研究已通過陜西省人民醫院倫理委員會批準（編號為 20170034），并已獲得研究對象或其親屬的知情同意。根據臨床診斷標準[7-8]將患者分為單純糖尿病組、早期糖尿病腎病組（即糖尿病腎病 Mogensen 臨床分期Ⅲ期—持續性微量白蛋白尿期，腎小球濾過率正常）和臨床糖尿病腎病組（即糖尿病腎病 Mogensen 臨床分期Ⅳ期—顯性蛋白尿期，尿蛋白陽性且蛋白尿可達腎病程度，腎小球濾過率下降）。
1.2 方法
1.2.1 NLRP3 信使 RNA（messenger RNA，mRNA）檢測
抽取所有患者早晨空腹靜脈血 5 mL，分裝為兩管，分別用于 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平檢測。應用實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測血 NLRP3 mRNA 表達：首先通過淋巴細胞分離液分離單個核細胞，trizol 試劑（美國 Invitrogen 公司）提取總 RNA，檢測總 RNA 濃度，隨后將 RNA 逆轉錄合成互補 DNA，采用熒光定量聚合酶鏈反應試劑盒［寶日醫生物技術（北京）有限公司］進行實時熒光定量聚合酶鏈反應擴增。擴增條件：94℃預變性 5 min，94℃ 30 s、60℃ 30 s、72℃ 30 s，共 35 個循環；72℃延伸 5 min，計算 Ct 值，基因相對表達量以 2?ΔΔCt 表示。NLRP3 和內參β-actin 引物由上海生工生物有限公司設計合成，見表1。
表1
引物序列
1.2.2 S1P 水平檢測
抗凝血 4℃，1000 r/min，離心 5 min，取上層清液，采用酶聯免疫吸附測定雙抗體夾心法檢測血清 S1P 水平。人 S1P 酶聯免疫吸附檢測試劑盒購自研域生物技術（上海）有限公司。
1.3 統計學方法
所有數據用 SPSS 21.0 軟件進行統計分析，計數資料以例數（百分比）表示，組間比較采用χ2 檢驗；計量資料以均數±標準差表示，方差齊時采用單因素方差分析進行組間比較，組間比較差異有統計學意義時，進一步采用 LSD-t 檢驗進行組間兩兩比較，如方差不齊則采用 Welch 檢驗進行組間比較，隨后組間比較差異有統計學意義時則采用 Games-Howell 檢驗進行組間兩兩比較。通過 Pearson 相關性分析探討血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平的相關性。根據受試者操作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲線評價血 NLRP3 mRNA、S1P 水平以及聯合指標對早期糖尿病腎病以及臨床糖尿病腎病的診斷價值，其中聯合指標通過二分類 logistic 回歸分析計算預測概率值獲得，隨后采用 Hanley & McNeil 檢驗比較 ROC 曲線下面積。雙側檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 患者年齡和性別比較
600 例患者中，單純糖尿病組 205 例、早期糖尿病腎病組 198 例和臨床糖尿病腎病組 197 例。男性 351 例，女性 249 例，平均年齡（67.54±8.73）歲。3 組患者的年齡和性別差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。
表2
各組患者年齡和性別比較
2.2 患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平比較
臨床糖尿病腎病組患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平高于單純糖尿病組和早期糖尿病腎病組，差異有統計學意義（P<0.05）；早期糖尿病腎病組患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平高于單純糖尿病組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。
表3
各組患者血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平（）
2.3 血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平的相關性
Pearson 相關性分析結果顯示，患者血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平存在正相關關系（r=0.455，P<0.001）。見圖1。
圖1
NLRP3 mRNA 與 S1P 水平的相關性散點圖
2.4 血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對早期糖尿病腎病的診斷價值
由 ROC 曲線分析可見，血 NLRP3 mRNA、S1P 水平及兩者聯合檢測用以從糖尿病患者中診斷早期糖尿病腎病的 ROC 曲線下面積分別為 0.645、0.968、0.971（P<0.001）。其中血 NLRP3 mRNA 診斷早期糖尿病腎病的最佳臨界值為 1.86，血 S1P 水平的最佳臨界值為 1.01 μmol/L。以上述最佳臨界值為早期糖尿病腎病的陽性判斷標準，統計各指標單獨及聯合檢測的診斷效能，發現聯合檢測的診斷效能高于血 NLRP3 mRNA，差異有統計學意義（Z=11.927，P<0.001）；但與血 S1P 水平的診斷效能相比，差異無統計學意義（Z=1.221，P=0.222）。見圖2、表4。
圖2
血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平診斷早期糖尿病腎病的 ROC 曲線
表4
ROC 曲線分析血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對早期糖尿病腎病的診斷價值
2.5 血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對臨床糖尿病腎病的診斷價值
由 ROC 曲線分析可見，血 NLRP3 mRNA、S1P 水平及兩者聯合檢測用以從早期糖尿病腎病患者中診斷臨床糖尿病腎病的 ROC 曲線下面積分別為 0.825、0.918、0.945（P<0.001）。其中血 NLRP3 mRNA 診斷臨床糖尿病腎病的最佳臨界值為 2.22，血 S1P 水平的最佳臨界值為 1.31 μmol/L。以上述最佳臨界值為臨床糖尿病腎病的陽性判斷標準，統計各指標單獨及聯合檢測的診斷效能，發現聯合檢測的診斷效能顯著高于血 NLRP3 mRNA 與血 S1P 水平，差異均有統計學意義（Z 值分別為 7.617、3.187，P 值分別為<0.001、0.001）。見表5、圖3。
圖3
血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平診斷臨床糖尿病腎病的 ROC 曲線
表5
ROC 曲線分析血 NLRP3 mRNA 和 S1P 水平對臨床糖尿病腎病的診斷價值
3 討論
糖尿病作為較為常見的一類以代謝異常為主的慢性內分泌疾病，其發病率正在逐年增長，嚴重影響了居民的身心健康[9]。糖尿病腎病是糖尿病最常見的并發癥之一，我國居民的發病率亦呈上升趨勢，目前已成為終末期腎臟疾病的第 2 位原因[10]。由于糖尿病腎病發病機制極其復雜，一旦進展至終末期，基本已無治愈可能，而研究表明，對其進行早期診斷并有效干預，可有望阻止或延緩甚至逆轉進展，可使患者的生活質量明顯改善，并使生存期延長[11]。
據報道，代謝異常如高血糖可誘導系膜細胞表達 NLRP3 炎性小體并促使其激活，導致腎臟膠原蓄積、系膜面積增加，進而在糖尿病所致腎損傷的進程中發揮關鍵作用[12-14]。另外，NLRP3 炎性小體激活還可抑制高血糖時足細胞通過自噬實現保護性作用，導致足細胞損傷、腎小球硬化[15-18]；可激活 Toll 樣受體 4/核因子κB 信號通路，導致腎間質炎癥及腎小管上皮細胞轉分化[18-19]，進而促進糖尿病腎臟損傷。而對 NLRP3 炎性小體及其介導的炎癥反應進行干預有可能發揮改善糖尿病足細胞損傷及糖尿病腎病腎功能、延緩糖尿病腎病發展的作用[20-21]。本研究結果顯示，早期糖尿病腎病組患者血 NLRP3 mRNA 濃度高于單純糖尿病組，但低于臨床糖尿病腎病組，進一步提示血 NLRP3 炎性小體的激活與糖尿病所致腎損傷有關，且可能與腎臟損傷的程度相關。蔣東波等[22]研究發現，糖尿病腎病患者腎臟組織中 NLRP3 陽性表達率以及 NLRP3 表達水平均高于非糖尿病腎病患者；黃秀麗等[23]研究發現，老年糖尿病腎病患者外周血單個核細胞中 NLRP3 炎性小體水平與尿微量白蛋白呈正相關。以上結論均與本研究一致，進一步提示了 NLRP3 在糖尿病所致腎臟損傷中的作用。然而，NLRP3 炎性小體與糖尿病患者腎臟損害的關系仍需動物實驗進一步驗證，并結合腎臟病理損傷等指標深入探索。
糖尿病可以引起腎小球硬化、腎血管改變以及間質小管的萎縮和纖維化，其中腎小球系膜細胞的肥大、細胞外基質的過度生成和沉積導致的系膜區增生以及腎小球基膜增厚是糖尿病腎病早期典型的病理表現，而 S1P 除可刺激腎小球系膜細胞增殖、細胞外基質積累并促進腎臟纖維化、導致腎損傷[24-26]，還可通過激活 G 蛋白信號通路引起系膜增殖，進而促進糖尿病腎病進展[27-28]。本研究結果顯示，早期糖尿病腎病組患者血 S1P 水平高于單純糖尿病組，但低于臨床糖尿病腎病組。然而，有研究發現，S1P 可以保護腎小管上皮細胞的屏障功能及舒張功能，還可改善腎臟微循環[6, 29]；趙郁松等[30]研究發現，經治療 6 個月后仍病情進展的糖尿病腎病患者的 S1P 水平顯著低于病情未進展者，S1P 水平可用于預測糖尿病腎病患者經治療后的進展風險。導致上述與本研究結果不一致現象的原因可能是 S1P 通過 2 種作用相反的受體 S1P1 與 S1P2 發揮生物學作用，而糖尿病腎病時引起血管損傷的 S1P2 受體表達相對上調所致[28, 31]。因此，糖尿病患者血 S1P 水平增高是腎臟損傷的促進因素還是代償性保護因素，有待進一步研究。
本研究進一步發現，糖尿病患者血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平存在正相關關系，且血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平以及聯合檢測均可用以判斷糖尿病患者是否發生早期糖尿病腎病以及是否進展至臨床糖尿病腎病。雖然，NLRP3 mRNA 用于診斷早期糖尿病腎病的 ROC 曲線下面積僅為 0.645，診斷價值一般，但與 S1P 水平聯合診斷的 ROC 曲線下面積卻可顯著提高至 0.971。因此，如果可在臨床工作中聯合血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平進行診斷，可能大大降低早期糖尿病腎病的漏診率，為臨床早期發現腎損傷提供依據，而且也可能更準確地把握患者由早期糖尿病腎病發展為臨床糖尿病腎病的時機，從而及時調整治療策略。
綜上所述，通過檢測糖尿病患者血 NLRP3 mRNA 與 S1P 水平變化，可以及時發現早期糖尿病腎病并用以監測其進展情況，為糖尿病腎病的早期診斷和及時、有效治療提供重要的臨床參考。
利益沖突：所有作者聲明不存在利益沖突。
