EB 病毒感染與人類淋巴和上皮起源的多種腫瘤有關，該病毒在大部分人體內以潛伏性感染的形式存在。EB 病毒編碼的相關基因對 EB 病毒潛伏性感染起關鍵作用，在相關腫瘤的發生發展中也起重要的促進作用。該文將簡要介紹 EB 病毒潛伏性感染的特征，EB 病毒潛伏性感染相關的蛋白編碼基因和非編碼基因（包括 EB 病毒核抗原基因、EB 病毒潛伏膜蛋白基因、EB 病毒編碼小 RNA 基因以及 EB 病毒微 RNA 基因），以及這些基因在 EB 病毒潛伏性感染及后續腫瘤發生中的主要作用機制，旨在為全面了解 EB 病毒潛伏性感染與其導致腫瘤的機制提供一定的理論基礎。
引用本文： 王中浩, 張可依, 豐姝, 陶傳敏. EB病毒潛伏性感染相關基因在其所致腫瘤中的作用機制. 華西醫學, 2021, 36(8): 1108-1114. doi: 10.7507/1002-0179.202007037 復制
每年大約有 200 萬例腫瘤的發生與感染性病原體有關，而 EB 病毒是第 1 個被發現會導致腫瘤發生的人類病毒，每年約 20 萬例腫瘤與其相關[1]。已知 EB 病毒與多種腫瘤的發生有關，包括伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、移植后淋巴增殖性疾病、人類免疫缺陷病毒相關淋巴瘤等血液系統腫瘤、鼻咽癌和 EB 病毒相關胃癌等上皮組織腫瘤[1-2]。作為人類最常見的病毒感染類型，世界范圍內約 95% 的成年人為 EB 病毒陽性，但 EB 病毒在大部分人體內以潛伏性感染的形式存在，表現為無癥狀的終生感染[2]。EB 病毒的持續潛伏性感染是其病毒基因與宿主基因間特殊相互作用的結果，而當這種相互作用出現異常時，往往會導致 EB 病毒相關腫瘤的發生。雖然已知 EB 病毒與多種腫瘤的發生有關，但 EB 病毒潛伏性感染相關基因在潛伏性感染以及由潛伏性感染進展為腫瘤過程中的作用機制尚不清楚。本文將簡要介紹 EB 病毒潛伏性感染相關基因，以及這些基因在 EB 病毒所致腫瘤發生中的主要作用機制，旨在為了解 EB 病毒潛伏性感染與 EB 病毒所致腫瘤之間的關系提供一定依據。
1 EB 病毒潛伏性感染
EB 病毒為雙鏈 DNA 病毒，屬于皰疹病毒科，又被稱為人類皰疹病毒第 4 型。與其他皰疹病毒科的病毒類似，EB 病毒的生命周期也包含潛伏性感染和裂解復制 2 個階段。被 EB 病毒感染的 B 細胞進入 EB 病毒的裂解周期時，會產生大量的病毒顆粒，并感染更多的人體細胞。與裂解復制周期相比，處于 EB 病毒潛伏性感染狀態的細胞并不會組裝和釋放病毒顆粒，且 EB 病毒基因組以環狀附加體的形式存在于宿主細胞核內，此時宿主細胞的 DNA 聚合酶參與病毒基因組的復制，而在裂解復制周期中則是由病毒編碼的 DNA 聚合酶負責病毒基因組的復制[3]。1984 年，人們獲得第 1 個 EB 病毒毒株 B95-8 的完整序列圖譜，大大加速了相關研究的進展。在此基因圖譜基礎上，研究人員相繼確定了 EB 病毒的單個病毒基因，并發現這些病毒編碼基因的協調表達對于 EB 病毒在宿主細胞內的潛伏性感染非常關鍵，后續研究也表明這些病毒編碼基因在宿主細胞由潛伏性感染進展為腫瘤細胞的過程中起到重要的調節作用[3]。潛伏性感染相關基因是幫助 EB 病毒在宿主細胞中建立潛伏性感染的 EB 病毒編碼基因，包括 EB 病毒核抗原（Epstein-Barr virus nuclear antigen，EBNA）基因、EB 病毒潛伏膜蛋白（latent membrane protein，LMP）基因、EB 病毒編碼小 RNA（Epstein-Barr virus encoded small RNA，EBER）基因以及 EB 病毒微 RNA 基因。此外，根據 B 細胞表達上述基因組合模式的不同，可將 EB 病毒的潛伏性感染分為潛伏 0 期（不表達任何 EB 病毒潛伏性感染相關基因）、潛伏Ⅰ期（僅表達EBNA1基因）、潛伏Ⅱ期（表達EBNA1、LMP1和LMP2基因）和潛伏Ⅲ期（表達所有 EB 病毒潛伏性感染相關基因）[3]。
2 EB 病毒潛伏性感染相關基因在 EB 病毒所致腫瘤中的作用機制
與人體內的其他基因類似，EB 病毒的基因也可分為蛋白編碼基因和非編碼基因兩大類，EBNA基因家族和LMP基因家族的蛋白編碼基因通過轉錄翻譯為相應的病毒蛋白來發揮功能，EBER基因和 EB 病毒微 RNA 基因則是通過轉錄為病毒 RNA 的形式來發揮作用。
2.1 EBNA基因家族
2.1.1 EBNA1
① 輔助 EB 病毒的潛伏性感染：EBNA基因家族有 6 個成員，EBNA1是其中唯一在所有 EB 病毒相關腫瘤中都有表達的病毒編碼基因[4]。EBNA1編碼一種多功能的二聚體病毒蛋白，通過與病毒附加體內部復制起始位點上的特異性序列結合，調控特定 EB 病毒基因的表達，從而維持 EB 病毒基因組在宿主細胞核內以附加體的形式存在[5]。EBNA1還可通過介導 EB 病毒基因組與宿主染色體的緊密聯系，從而在保證宿主細胞分裂的同時，輔助附加體的復制和分配；EBNA1不僅在 EB 病毒基因組附加體的維持和復制過程中發揮關鍵作用，還介導了潛伏性感染細胞的免疫逃逸。EBNA1內部具有一段甘氨酸-丙氨酸重復序列，此段序列對細胞中 EB 病毒的潛伏性感染非常重要，其不僅可以保護EBNA1免受蛋白酶體的降解，還可以抑制人體內的免疫反應過程[6]。Jiang 等[7]研究發現EBNA1的甘氨酸-丙氨酸重復序列可以通過抑制順式調控而干擾抗原的處理過程和主要組織相容性復合體Ⅰ類限制性抗原呈遞，從而避免細胞毒性 T 細胞對 EB 病毒感染細胞的識別應答。
② 促進 EB 病毒相關腫瘤的發生：EBNA1通過輔助 EB 病毒的潛伏性感染，免疫逃逸宿主的病毒清除功能，保證了 EB 病毒在宿主體內的持續存在，這也為后續 EB 病毒相關惡性腫瘤的發生提供了可能。有研究顯示EBNA1可以在轉基因小鼠中誘導 B 細胞淋巴瘤的發生，表明其可作為病毒源的原癌基因發揮作用[8]。伯基特淋巴瘤細胞在體外培養條件下的生存必須依賴于EBNA1的表達，EBNA1也可促進 B 淋巴瘤細胞的增殖生長[8-9]。另外，EBNA1還可以抑制人微 RNA-200a 和微 RNA-200b 的表達，從而導致鼻咽癌細胞上皮間質轉化的發生[10]。有研究表明，當以抑制劑選擇性地抑制EBNA1的 DNA 結合活性后，便可阻斷 EB 病毒的潛伏性感染；同時，該抑制劑還可通過抑制 EB 病毒基因的表達，改變鼻咽癌裸鼠模型中轉化生長因子-β 信號通路的表達，從而起到抑制腫瘤生長的作用[11]。
綜上，EBNA1通過調控宿主基因和病毒基因的表達來輔助 EB 病毒的潛伏性感染，同時在 EB 病毒相關腫瘤中起原癌基因的作用，但還需更多的研究來揭示EBNA1在 EB 病毒潛伏性感染進展為腫瘤過程中的具體作用機制。
2.1.2 EBNA2
① 作為反式激活因子促進 EB 病毒感染細胞的腫瘤轉化：EBNA2是 EB 病毒編碼的一種反式激活因子，在潛伏期病毒基因的轉錄和 EB 病毒感染細胞的永生化及腫瘤轉化中發揮關鍵作用[12]。與其他轉錄因子不同，EBNA2并不能直接與其順式作用元件結合，而是需要在宿主 C 啟動子結合因子 1 的幫助下才能結合其靶標序列—EB 病毒的 C 啟動子[12]。在 EB 病毒感染宿主細胞期間，EBNA2和 C 啟動子結合因子 1 形成的復合體與 C 啟動子結合，促進相關病毒基因的轉錄激活，從而表達 EB 病毒介導細胞永生化所需的全部潛伏基因。Ling 等[13]研究發現當EBNA2的 323 和 324 位氨基酸突變后，EBNA2便失去了與 C 啟動子結合因子 1 結合的能力，也就不能轉錄激活相關 EB 病毒基因的表達。EBNA2還可在 B 細胞特異性轉錄因子重組信號結合蛋白-Jκ 和早期 B 淋巴細胞因子 1 的幫助下，激活多個靶基因如CD23的轉錄表達，促進 B 細胞的生存和生長[14]。在體外培養條件下，缺失EBNA2的 EB 病毒突變體無法轉化 B 細胞為永生化細胞[15]，說明EBNA2是 EB 病毒轉化 B 細胞為永生化腫瘤細胞的必要條件。
② 通過調控甲基化參與 EB 病毒相關腫瘤發生：除了上述反式激活因子功能，EBNA2還可通過介導病毒基因和宿主基因的甲基化修飾，來調控靶基因的表達，參與相關腫瘤的發生。甲基胞嘧啶加雙氧酶 2 基因主要參與 DNA 的去甲基化修飾，Lu 等[16]研究發現甲基胞嘧啶加雙氧酶 2 基因可以與EBNA2結合形成復合物，參與 EB 病毒潛伏Ⅲ期細胞中 DNA 甲基化狀態的調控，通過調控相應基因的表達而參與 EB 病毒介導的 B 細胞永生化過程。Anastasiadou 等[17]研究發現EBNA2與早期 B 淋巴細胞因子 1 結合形成的復合物可以抑制微 RNA-34a 的轉錄，從而間接提高微 RNA-34a 靶基因程序性死亡受體-配體 1 的表達。程序性死亡受體-配體 1 的高表達有利于腫瘤細胞逃逸 T 細胞的免疫識別，因此EBNA2在相關腫瘤細胞的生存中起到重要作用。
綜上，EBNA2可轉化 EB 病毒感染細胞為永生化的腫瘤細胞，并介導腫瘤細胞的免疫逃逸，但其在靶基因的甲基化修飾與表達調控中的作用仍需更進一步的深入研究。
2.1.3 EBNA3
EBNA3基因家族包括EBNA3A、EBNA3B和EBNA3C，EBNA3僅表達于處于 EB 病毒潛伏性感染Ⅲ期的細胞中。EBNA3的 3 個家族成員在 EB 病毒基因組上的位置緊密相連，3 個基因的信使 RNA 由同一個初始轉錄本通過可變剪切而來，因此在蛋白序列上表現出一定的同源性。與EBNA1和EBNA2不同，EBNA3并不直接與宿主的 DNA 結合，而是與多種宿主細胞轉錄因子以及 DNA 結合蛋白相互作用，發揮其轉錄調控的作用[18]。
① EBNA3A和EBNA3C的原癌基因功能：雖然 3 種EBNA3在生物學功能上表現出一定的功能互補性，但相關的遺傳學研究表明僅有EBNA3A和EBNA3C對于 B 細胞在體外的永生化轉化是必需的[19]。EBNA3A和EBNA3C不僅是 B 細胞的轉化生長所必需，在轉化后細胞的生長維持中也發揮著必不可少的作用。多項研究表明EBNA3A和EBNA3C可以與多種細胞周期調控蛋白發生直接相互作用，從而擾亂 DNA 合成前期到 DNA 合成期和 DNA 合成后期到細胞分裂期的細胞周期檢查點，促進 B 細胞的轉化生長并誘導隨后 B 細胞淋巴瘤的發生發展[18, 20-22]。EBNA3C能夠通過多種直接或間接的方式抑制p53的功能，從而減少p53所誘導的細胞凋亡過程，促進細胞的生存[23-24]。EBNA3C還可與p73結合形成穩定的復合體，從而抑制轉錄因子 E2F-1-p73 通路所介導的細胞凋亡。EBNA3A和EBNA3C能介導 DNA 甲基轉移酶對 Bcl-2 相互作用細胞死亡介導因子基因啟動子區的甲基化修飾，抑制 Bcl-2 相互作用細胞死亡介導因子的表達，從而拮抗其所誘導的細胞凋亡[18]。細胞自噬主要是損壞細胞器和錯誤折疊蛋白在溶酶體中的降解再利用過程，有利于保證細胞的健康狀態，從而有助于維持細胞的生長增殖能力，并抑制細胞凋亡過程。EBNA3C 通過表觀調控的方式激活自噬相關基因 3、自噬相關基因 5 和自噬相關基因 7 的表達，促進自噬體的形成，增強細胞自噬作用，抑制細胞凋亡，從而有利于 EB 病毒感染細胞的生存[25]。Runt 相關轉錄因子 1 和 Runt 相關轉錄因子 13 在控制細胞的生長和分化過程中發揮著重要作用，Runt 相關轉錄因子 1 的表達可抑制細胞的生長，Runt 相關轉錄因子 3 則可與 Runt 相關轉錄因子 1 的啟動子區結合而抑制其表達。Gunnell 等[26]研究發現EBNA3A和EBNA3C能夠在重組信號結合蛋白-Jκ 的幫助下，與 Runt 相關轉錄因子 3 編碼區上游的超級增強子結合，激活 Runt 相關轉錄因子 3 的表達，從而減弱 Runt 相關轉錄因子 1 對細胞生長的抑制作用，最終促進細胞的生長。EBNA3A和EBNA3C通過干擾細胞周期、抑制細胞凋亡，從而促進細胞增殖，發揮其原癌基因功能。
② EBNA3B的抑癌基因功能：與EBNA3A和EBNA3C的原癌基因作用相比，EBNA3B更多是作為抑癌基因發揮作用。White 等[27]發現以缺失EBNA3B的 EB 病毒突變體感染人源化小鼠，仍可誘導淋巴瘤的發生，且所引發的淋巴瘤更具侵襲性，還能免疫逃逸 T 細胞的殺傷作用；同時，在 EB 病毒陽性的伯基特淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤患者樣本中，檢測到了可影響EBNA2蛋白表達的基因突變。這都表明EBNA3B是 EB 病毒編碼的抑癌基因，而其功能失活有助于感染細胞的免疫逃逸和淋巴瘤的發生。
③ EBNA3與EBNA2的協同作用：已知EBNA2通過與重組信號結合蛋白-Jκ 結合而發揮其轉錄激活作用，ENBA3（EBNA3A和EBNA3C）通過其 N 末端的同源序列，也可與重組信號結合蛋白-Jκ 發生相互作用。EBNA3通過與EBNA2競爭結合重組信號結合蛋白-Jκ，拮抗EBNA2的轉錄激活功能，發揮轉錄抑制的作用，減少某些宿主基因的表達；EBNA3還可與EBNA2競爭結合 C 啟動子結合因子 1，從而抑制EBNA2對 EB 病毒 C 啟動子的轉錄激活，C 啟動子控制著所有EBNA基因的轉錄，因此EBNA3對其自身表達具有一定的自我調控能力[18, 28]。結合EBNA3對宿主基因和 EB 病毒基因的轉錄抑制功能，推測EBNA3在潛伏性感染期的表達可能有助于維持感染細胞在活化增殖和癌性增殖之間的平衡。
綜上，EBNA3基因家族的 3 個成員基因各自發揮其促癌或抑癌作用，從而既能保證宿主細胞的癌性轉化，又能避免腫瘤細胞被宿主的免疫系統識別，但有關EBNA3B的研究相對較少，因而對其抑癌功能的認識尚不深入。
2.1.4 EBNA-LP（leader protein）
EBNA-LP是 EB 病毒感染靜息態 B 細胞后首先表達的潛伏性感染相關基因。在 EB 病毒感染 B 細胞的早期階段，EBNA-LP便與EBNA2協同表達，EBNA-LP也是 B 細胞永生化生長的必需基因。EBNA-LP與EBNA2具有很多共同的靶位點，從而協同激活某些特定的轉錄因子，促進C-myc及其下游相關基因的表達。雖然EBNA-LP和EBNA2共享某些表達調控位點，但互相之間并不會影響彼此與特定啟動子或增強子序列的結合[29-30]。也有研究表明EBNA-LP并非與EBNA2共同激活某些基因的轉錄，而是通過“募集”某些宿主轉錄因子至 EB 病毒基因組區域，從而促進病毒基因的轉錄表達[31]。然而對其的研究相對較少，因此具體的作用機制仍不十分明確，有待進一步的深入研究。
2.2 LMP基因家族
2.2.1 LMP1
① 激活宿主細胞的生長代謝通路：LMP1表達于 EB 病毒潛伏Ⅲ期和潛伏Ⅱ期的細胞，在霍奇金淋巴瘤和未分化型鼻咽癌中都能檢測到其表達[3]。LMP1是一個重要的 EB 病毒編碼原癌基因，是 EB 病毒轉化細胞的必需基因，能在體內和體外激活核轉錄因子-κB、Jun 激酶和 p38 信號通路[29]。在LMP1的 C 末端有 2 個轉化效應位點 TES1（transformation effecter site 1）和 TES2，這 2 個位點對于核轉錄因子-κB 信號通路的激活和 EB 病毒介導的 B 細胞轉化與永生化生長都是必需的。TES1 可以模擬 CD40 的激活信號，與腫瘤壞死因子受體相關因子 1、2、3 和 5 結合形成復合體，激活非經典核轉錄因子-κB 信號通路，TES2 與腫瘤壞死因子受體相關因子 6 共同激活經典核轉錄因子-κB 信號通路。而 TES2 是細胞轉化的起始階段所必需的，轉化細胞的長期快速生長則依賴于 TES1 所激活的信號通路[29, 32-33]。LMP1還可以“劫持”宿主細胞的代謝通路，使其有利于感染細胞的快速增殖。Jiang 等[34]研究發現鼻咽癌細胞中的LMP1可以沉默HoxC8（Homeobox C8）的表達，從而減弱HoxC8對糖酵解通路的抑制作用。Xiao 等[35]同樣發現LMP1能夠激活鼻咽癌細胞內的糖酵解代謝過程，從而保證細胞快速生長所需的能量供應。
② 通過外泌體促進腫瘤進展：外泌體是細胞分泌到胞外的小囊泡（直徑 40～100 nm），其內富含脂類、蛋白質和 RNA 分子，外泌體在腫瘤的侵襲生長中發揮重要作用[36]。EB 病毒陽性的鼻咽癌細胞也可分泌外泌體，其內含有高水平的 LMP1 和病毒微 RNA，能夠激活受體細胞內的胞外信號調節激酶和 Akt（又名蛋白激酶 B）信號通路，促進受體細胞的轉化。Aga 等[36]發現LMP1能夠提高外泌體中低氧誘導因子 1α 蛋白的含量，因此認為外泌體之所以能夠促進鼻咽癌的惡性化進展，是由于其內含有的低氧誘導因子 1α 等促遷移因子的作用，其他的相關研究也顯示外泌體在 EB 病毒相關腫瘤進展中起關鍵作用[37-38]。
2.2.2 LMP2
LMP2包括LMP2A和LMP2B，LMP2A僅在 N 末端比LMP2B多了 119 個氨基酸殘基，二者在其他部分完全一致。LMP2A作為原癌基因發揮功能，LMP2A的 N 末端可以形成一個與 B 細胞受體類似的結構域，與脾酪氨酸激酶結合從而激活下游的信號通路。LMP2A與LMP1分別激活 B 細胞的 B 細胞受體和 CD40 信號通路，從而保護生發中心內的 B 細胞免于細胞凋亡[39]。在體內條件下，LMP2A可激活 B 細胞的 Ras 通路，進而活化磷脂酰肌醇 3-激酶/Akt 信號通路，促進 B 細胞的生存并拮抗凋亡；LMP2A還能夠抑制 MHC Ⅰ類鏈相關基因 A 和 4 型 UL16 結合蛋白的表達，從而減少 MHC Ⅰ類鏈相關基因 A 和 4 型 UL16 結合蛋白與 CD8+ T 細胞的相互作用，使得 EB 病毒感染細胞能夠逃逸 T 細胞的免疫殺傷[40]。與單獨表達LMP1或LMP2A相比，LMP1與LMP2A的共表達更能促進小鼠生發中心內 B 細胞的快速增殖，表明LMP2A與LMP1存在功能上的協同性[41-42]。當特異性靶向抑制LMP2A的功能時，可以顯著抑制 EB 病毒相關惡性腫瘤的生長[43-44]。上述研究都表明LMP2A更多地作為原癌基因發揮其功能。LMP2A與 B 細胞受體交聯結合后，能夠促進鈣離子動員的發生，抑制 EB 病毒潛伏性感染的細胞進入裂解感染周期，而LMP2B與LMP2A存在共定位，能夠干擾LMP2A的功能發揮，從而抑制鈣離子動員過程，促進裂解感染周期的激活[45]。但關于LMP2B的相關研究較少，其特異性的作用機制仍不清楚。
綜上，LMP基因家族更多是通過模擬某些宿主信號通路來促進宿主細胞的癌性轉化，因此針對LMP發揮功能的關鍵結構域設計相應的靶向藥物可作為未來 EB 病毒相關腫瘤的治療方向。
2.3 EBER
在受到 EB 病毒感染的宿主細胞內，除了多種 EB 病毒的蛋白質編碼基因，還有不轉錄翻譯為蛋白質的EBER。EBER包括EBER1和EBER2，長度分別為 167 和 173 個核苷酸，由宿主細胞的 RNA 聚合酶Ⅲ轉錄生成，存在于 EB 病毒潛伏性感染Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期以及裂解復制周期細胞的細胞核內[46]。EBER在 EB 病毒感染細胞內大量存在，在每個感染細胞內，約有 1×106拷貝數的EBER1和 2.5×105拷貝數的EBER2[47]，提示其可能具有重要功能。EBER表現出很嚴格的細胞核定位，而不會進行核質穿梭轉運，因此EBER更多地在細胞核內發揮著基因表達調控的功能。在人體天然免疫通路中，蛋白酶 R 可應答病毒的雙鏈 RNA 從而起到抗病毒的作用，Zerbe 等[48]的研究表明EBER1可結合蛋白酶 R 并減弱其活力，從而介導相應的免疫逃逸過程。配對盒基因 5 可促進 B 細胞特異性基因的表達，并抑制非 B 細胞譜系基因的表達，是 B 細胞生長發育的主要調控因子。Lee 等[49]發現EBER2能與配對盒基因 5 相互作用，幫助配對盒基因 5 識別并結合到 EB 病毒基因組的末端重復區域，從而調控 EB 病毒相關原癌基因LMP1和LMP2的表達。因此，作為 EB 病毒來源的非編碼 RNA，EBER更多地是作為調控子來發揮作用，但相較于其他病毒蛋白編碼基因，EBER的研究手段相對較少，因此其作用機制研究也相對缺乏，相信隨著對人類長鏈非編碼 RNA 研究方法的日趨成熟，對這類病毒源非編碼 RNA 的研究也將取得較大的進展。
2.4 EB 病毒編碼的微 RNA
微 RNA 是一類長度約 22 個核苷酸的發揮調控功能的非編碼 RNA，在人體內廣泛存在，研究表明 EB 病毒也會編碼產生大量的微 RNA[50]。EB 病毒感染的細胞至少表達 44 種 EB 病毒微 RNA，這些微 RNA 由 EB 病毒基因組的 BART（BamH I fragment A rightward transcript）和 BHRF1（BamH I fragment H rightward open reading frame 1）2 個區域轉錄而來。EB 病毒編碼的微 RNA 可靶向調節 EB 病毒和宿主相關基因的表達，在感染細胞的生長和免疫逃逸中發揮作用[50]。Vereide 等[51]發現在缺失了其他 EB 病毒原癌基因的情況下，單獨表達 BART 微 RNA 基因便足以維持伯基特淋巴瘤細胞的生長，且也能夠促進初始 B 細胞的轉化；還發現其中的 2 種 BART 微 RNA 能夠靶向抑制半胱氨酸蛋白酶 3，從而抑制細胞凋亡，保證伯基特淋巴瘤細胞的生存。在鼻咽癌細胞內的所有微 RNA 中，來自 EB 病毒的微 RNA 占其中 20%，而在彌漫大 B 淋巴瘤細胞中則只占 2%[50]，提示 EB 病毒編碼的微 RNA 在鼻咽癌的形成和發展中起更重要的作用。Lung 等[52]在鼻咽癌細胞中也發現BART5-5p、BART7-3p、BART9-3p和BART14-3p能夠協同作用以下調毛細血管擴張性共濟失調突變基因信號通路，從而促進鼻咽癌的發生。然而，由于 EB 病毒微 RNA 的相關研究起步較晚，又大多集中于鼻咽癌，因此未來還需要大量研究才能對其作用機制有更全面的認識。
3 小結與展望
綜上所述，關于 EB 病毒基因在 EB 病毒潛伏性感染與 EB 病毒相關腫瘤中的作用機制，目前已有較多的相關研究，然而對于 EB 病毒潛伏性感染期如何進展為相關腫瘤仍未系統探討。EB 病毒的潛伏性感染在人類中廣泛存在，而 EB 病毒相關腫瘤大多是由潛伏性感染發展而來，因此對中間轉化階段的深入研究將完善人們對 EB 病毒的認識，同時也有利于 EB 病毒相關腫瘤的早期診療。鑒于 EB 病毒編碼的潛伏性感染相關基因的核心調控功能，未來的相關藥物開發可將這些基因作為潛在的治療靶點。而且相信隨著研究方法的不斷革新，未來人們對 EB 病毒潛伏性感染基因在 EB 病毒所致腫瘤中作用機制的認識也必將更加深刻與全面。
每年大約有 200 萬例腫瘤的發生與感染性病原體有關，而 EB 病毒是第 1 個被發現會導致腫瘤發生的人類病毒，每年約 20 萬例腫瘤與其相關[1]。已知 EB 病毒與多種腫瘤的發生有關，包括伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、移植后淋巴增殖性疾病、人類免疫缺陷病毒相關淋巴瘤等血液系統腫瘤、鼻咽癌和 EB 病毒相關胃癌等上皮組織腫瘤[1-2]。作為人類最常見的病毒感染類型，世界范圍內約 95% 的成年人為 EB 病毒陽性，但 EB 病毒在大部分人體內以潛伏性感染的形式存在，表現為無癥狀的終生感染[2]。EB 病毒的持續潛伏性感染是其病毒基因與宿主基因間特殊相互作用的結果，而當這種相互作用出現異常時，往往會導致 EB 病毒相關腫瘤的發生。雖然已知 EB 病毒與多種腫瘤的發生有關，但 EB 病毒潛伏性感染相關基因在潛伏性感染以及由潛伏性感染進展為腫瘤過程中的作用機制尚不清楚。本文將簡要介紹 EB 病毒潛伏性感染相關基因，以及這些基因在 EB 病毒所致腫瘤發生中的主要作用機制，旨在為了解 EB 病毒潛伏性感染與 EB 病毒所致腫瘤之間的關系提供一定依據。
1 EB 病毒潛伏性感染
EB 病毒為雙鏈 DNA 病毒，屬于皰疹病毒科，又被稱為人類皰疹病毒第 4 型。與其他皰疹病毒科的病毒類似，EB 病毒的生命周期也包含潛伏性感染和裂解復制 2 個階段。被 EB 病毒感染的 B 細胞進入 EB 病毒的裂解周期時，會產生大量的病毒顆粒，并感染更多的人體細胞。與裂解復制周期相比，處于 EB 病毒潛伏性感染狀態的細胞并不會組裝和釋放病毒顆粒，且 EB 病毒基因組以環狀附加體的形式存在于宿主細胞核內，此時宿主細胞的 DNA 聚合酶參與病毒基因組的復制，而在裂解復制周期中則是由病毒編碼的 DNA 聚合酶負責病毒基因組的復制[3]。1984 年，人們獲得第 1 個 EB 病毒毒株 B95-8 的完整序列圖譜，大大加速了相關研究的進展。在此基因圖譜基礎上，研究人員相繼確定了 EB 病毒的單個病毒基因，并發現這些病毒編碼基因的協調表達對于 EB 病毒在宿主細胞內的潛伏性感染非常關鍵，后續研究也表明這些病毒編碼基因在宿主細胞由潛伏性感染進展為腫瘤細胞的過程中起到重要的調節作用[3]。潛伏性感染相關基因是幫助 EB 病毒在宿主細胞中建立潛伏性感染的 EB 病毒編碼基因，包括 EB 病毒核抗原（Epstein-Barr virus nuclear antigen，EBNA）基因、EB 病毒潛伏膜蛋白（latent membrane protein，LMP）基因、EB 病毒編碼小 RNA（Epstein-Barr virus encoded small RNA，EBER）基因以及 EB 病毒微 RNA 基因。此外，根據 B 細胞表達上述基因組合模式的不同，可將 EB 病毒的潛伏性感染分為潛伏 0 期（不表達任何 EB 病毒潛伏性感染相關基因）、潛伏Ⅰ期（僅表達EBNA1基因）、潛伏Ⅱ期（表達EBNA1、LMP1和LMP2基因）和潛伏Ⅲ期（表達所有 EB 病毒潛伏性感染相關基因）[3]。
2 EB 病毒潛伏性感染相關基因在 EB 病毒所致腫瘤中的作用機制
與人體內的其他基因類似，EB 病毒的基因也可分為蛋白編碼基因和非編碼基因兩大類，EBNA基因家族和LMP基因家族的蛋白編碼基因通過轉錄翻譯為相應的病毒蛋白來發揮功能，EBER基因和 EB 病毒微 RNA 基因則是通過轉錄為病毒 RNA 的形式來發揮作用。
2.1 EBNA基因家族
2.1.1 EBNA1
① 輔助 EB 病毒的潛伏性感染：EBNA基因家族有 6 個成員，EBNA1是其中唯一在所有 EB 病毒相關腫瘤中都有表達的病毒編碼基因[4]。EBNA1編碼一種多功能的二聚體病毒蛋白，通過與病毒附加體內部復制起始位點上的特異性序列結合，調控特定 EB 病毒基因的表達，從而維持 EB 病毒基因組在宿主細胞核內以附加體的形式存在[5]。EBNA1還可通過介導 EB 病毒基因組與宿主染色體的緊密聯系，從而在保證宿主細胞分裂的同時，輔助附加體的復制和分配；EBNA1不僅在 EB 病毒基因組附加體的維持和復制過程中發揮關鍵作用，還介導了潛伏性感染細胞的免疫逃逸。EBNA1內部具有一段甘氨酸-丙氨酸重復序列，此段序列對細胞中 EB 病毒的潛伏性感染非常重要，其不僅可以保護EBNA1免受蛋白酶體的降解，還可以抑制人體內的免疫反應過程[6]。Jiang 等[7]研究發現EBNA1的甘氨酸-丙氨酸重復序列可以通過抑制順式調控而干擾抗原的處理過程和主要組織相容性復合體Ⅰ類限制性抗原呈遞，從而避免細胞毒性 T 細胞對 EB 病毒感染細胞的識別應答。
② 促進 EB 病毒相關腫瘤的發生：EBNA1通過輔助 EB 病毒的潛伏性感染，免疫逃逸宿主的病毒清除功能，保證了 EB 病毒在宿主體內的持續存在，這也為后續 EB 病毒相關惡性腫瘤的發生提供了可能。有研究顯示EBNA1可以在轉基因小鼠中誘導 B 細胞淋巴瘤的發生，表明其可作為病毒源的原癌基因發揮作用[8]。伯基特淋巴瘤細胞在體外培養條件下的生存必須依賴于EBNA1的表達，EBNA1也可促進 B 淋巴瘤細胞的增殖生長[8-9]。另外，EBNA1還可以抑制人微 RNA-200a 和微 RNA-200b 的表達，從而導致鼻咽癌細胞上皮間質轉化的發生[10]。有研究表明，當以抑制劑選擇性地抑制EBNA1的 DNA 結合活性后，便可阻斷 EB 病毒的潛伏性感染；同時，該抑制劑還可通過抑制 EB 病毒基因的表達，改變鼻咽癌裸鼠模型中轉化生長因子-β 信號通路的表達，從而起到抑制腫瘤生長的作用[11]。
綜上，EBNA1通過調控宿主基因和病毒基因的表達來輔助 EB 病毒的潛伏性感染，同時在 EB 病毒相關腫瘤中起原癌基因的作用，但還需更多的研究來揭示EBNA1在 EB 病毒潛伏性感染進展為腫瘤過程中的具體作用機制。
2.1.2 EBNA2
① 作為反式激活因子促進 EB 病毒感染細胞的腫瘤轉化：EBNA2是 EB 病毒編碼的一種反式激活因子，在潛伏期病毒基因的轉錄和 EB 病毒感染細胞的永生化及腫瘤轉化中發揮關鍵作用[12]。與其他轉錄因子不同，EBNA2并不能直接與其順式作用元件結合，而是需要在宿主 C 啟動子結合因子 1 的幫助下才能結合其靶標序列—EB 病毒的 C 啟動子[12]。在 EB 病毒感染宿主細胞期間，EBNA2和 C 啟動子結合因子 1 形成的復合體與 C 啟動子結合，促進相關病毒基因的轉錄激活，從而表達 EB 病毒介導細胞永生化所需的全部潛伏基因。Ling 等[13]研究發現當EBNA2的 323 和 324 位氨基酸突變后，EBNA2便失去了與 C 啟動子結合因子 1 結合的能力，也就不能轉錄激活相關 EB 病毒基因的表達。EBNA2還可在 B 細胞特異性轉錄因子重組信號結合蛋白-Jκ 和早期 B 淋巴細胞因子 1 的幫助下，激活多個靶基因如CD23的轉錄表達，促進 B 細胞的生存和生長[14]。在體外培養條件下，缺失EBNA2的 EB 病毒突變體無法轉化 B 細胞為永生化細胞[15]，說明EBNA2是 EB 病毒轉化 B 細胞為永生化腫瘤細胞的必要條件。
② 通過調控甲基化參與 EB 病毒相關腫瘤發生：除了上述反式激活因子功能，EBNA2還可通過介導病毒基因和宿主基因的甲基化修飾，來調控靶基因的表達，參與相關腫瘤的發生。甲基胞嘧啶加雙氧酶 2 基因主要參與 DNA 的去甲基化修飾，Lu 等[16]研究發現甲基胞嘧啶加雙氧酶 2 基因可以與EBNA2結合形成復合物，參與 EB 病毒潛伏Ⅲ期細胞中 DNA 甲基化狀態的調控，通過調控相應基因的表達而參與 EB 病毒介導的 B 細胞永生化過程。Anastasiadou 等[17]研究發現EBNA2與早期 B 淋巴細胞因子 1 結合形成的復合物可以抑制微 RNA-34a 的轉錄，從而間接提高微 RNA-34a 靶基因程序性死亡受體-配體 1 的表達。程序性死亡受體-配體 1 的高表達有利于腫瘤細胞逃逸 T 細胞的免疫識別，因此EBNA2在相關腫瘤細胞的生存中起到重要作用。
綜上，EBNA2可轉化 EB 病毒感染細胞為永生化的腫瘤細胞，并介導腫瘤細胞的免疫逃逸，但其在靶基因的甲基化修飾與表達調控中的作用仍需更進一步的深入研究。
2.1.3 EBNA3
EBNA3基因家族包括EBNA3A、EBNA3B和EBNA3C，EBNA3僅表達于處于 EB 病毒潛伏性感染Ⅲ期的細胞中。EBNA3的 3 個家族成員在 EB 病毒基因組上的位置緊密相連，3 個基因的信使 RNA 由同一個初始轉錄本通過可變剪切而來，因此在蛋白序列上表現出一定的同源性。與EBNA1和EBNA2不同，EBNA3并不直接與宿主的 DNA 結合，而是與多種宿主細胞轉錄因子以及 DNA 結合蛋白相互作用，發揮其轉錄調控的作用[18]。
① EBNA3A和EBNA3C的原癌基因功能：雖然 3 種EBNA3在生物學功能上表現出一定的功能互補性，但相關的遺傳學研究表明僅有EBNA3A和EBNA3C對于 B 細胞在體外的永生化轉化是必需的[19]。EBNA3A和EBNA3C不僅是 B 細胞的轉化生長所必需，在轉化后細胞的生長維持中也發揮著必不可少的作用。多項研究表明EBNA3A和EBNA3C可以與多種細胞周期調控蛋白發生直接相互作用，從而擾亂 DNA 合成前期到 DNA 合成期和 DNA 合成后期到細胞分裂期的細胞周期檢查點，促進 B 細胞的轉化生長并誘導隨后 B 細胞淋巴瘤的發生發展[18, 20-22]。EBNA3C能夠通過多種直接或間接的方式抑制p53的功能，從而減少p53所誘導的細胞凋亡過程，促進細胞的生存[23-24]。EBNA3C還可與p73結合形成穩定的復合體，從而抑制轉錄因子 E2F-1-p73 通路所介導的細胞凋亡。EBNA3A和EBNA3C能介導 DNA 甲基轉移酶對 Bcl-2 相互作用細胞死亡介導因子基因啟動子區的甲基化修飾，抑制 Bcl-2 相互作用細胞死亡介導因子的表達，從而拮抗其所誘導的細胞凋亡[18]。細胞自噬主要是損壞細胞器和錯誤折疊蛋白在溶酶體中的降解再利用過程，有利于保證細胞的健康狀態，從而有助于維持細胞的生長增殖能力，并抑制細胞凋亡過程。EBNA3C 通過表觀調控的方式激活自噬相關基因 3、自噬相關基因 5 和自噬相關基因 7 的表達，促進自噬體的形成，增強細胞自噬作用，抑制細胞凋亡，從而有利于 EB 病毒感染細胞的生存[25]。Runt 相關轉錄因子 1 和 Runt 相關轉錄因子 13 在控制細胞的生長和分化過程中發揮著重要作用，Runt 相關轉錄因子 1 的表達可抑制細胞的生長，Runt 相關轉錄因子 3 則可與 Runt 相關轉錄因子 1 的啟動子區結合而抑制其表達。Gunnell 等[26]研究發現EBNA3A和EBNA3C能夠在重組信號結合蛋白-Jκ 的幫助下，與 Runt 相關轉錄因子 3 編碼區上游的超級增強子結合，激活 Runt 相關轉錄因子 3 的表達，從而減弱 Runt 相關轉錄因子 1 對細胞生長的抑制作用，最終促進細胞的生長。EBNA3A和EBNA3C通過干擾細胞周期、抑制細胞凋亡，從而促進細胞增殖，發揮其原癌基因功能。
② EBNA3B的抑癌基因功能：與EBNA3A和EBNA3C的原癌基因作用相比，EBNA3B更多是作為抑癌基因發揮作用。White 等[27]發現以缺失EBNA3B的 EB 病毒突變體感染人源化小鼠，仍可誘導淋巴瘤的發生，且所引發的淋巴瘤更具侵襲性，還能免疫逃逸 T 細胞的殺傷作用；同時，在 EB 病毒陽性的伯基特淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤患者樣本中，檢測到了可影響EBNA2蛋白表達的基因突變。這都表明EBNA3B是 EB 病毒編碼的抑癌基因，而其功能失活有助于感染細胞的免疫逃逸和淋巴瘤的發生。
③ EBNA3與EBNA2的協同作用：已知EBNA2通過與重組信號結合蛋白-Jκ 結合而發揮其轉錄激活作用，ENBA3（EBNA3A和EBNA3C）通過其 N 末端的同源序列，也可與重組信號結合蛋白-Jκ 發生相互作用。EBNA3通過與EBNA2競爭結合重組信號結合蛋白-Jκ，拮抗EBNA2的轉錄激活功能，發揮轉錄抑制的作用，減少某些宿主基因的表達；EBNA3還可與EBNA2競爭結合 C 啟動子結合因子 1，從而抑制EBNA2對 EB 病毒 C 啟動子的轉錄激活，C 啟動子控制著所有EBNA基因的轉錄，因此EBNA3對其自身表達具有一定的自我調控能力[18, 28]。結合EBNA3對宿主基因和 EB 病毒基因的轉錄抑制功能，推測EBNA3在潛伏性感染期的表達可能有助于維持感染細胞在活化增殖和癌性增殖之間的平衡。
綜上，EBNA3基因家族的 3 個成員基因各自發揮其促癌或抑癌作用，從而既能保證宿主細胞的癌性轉化，又能避免腫瘤細胞被宿主的免疫系統識別，但有關EBNA3B的研究相對較少，因而對其抑癌功能的認識尚不深入。
2.1.4 EBNA-LP（leader protein）
EBNA-LP是 EB 病毒感染靜息態 B 細胞后首先表達的潛伏性感染相關基因。在 EB 病毒感染 B 細胞的早期階段，EBNA-LP便與EBNA2協同表達，EBNA-LP也是 B 細胞永生化生長的必需基因。EBNA-LP與EBNA2具有很多共同的靶位點，從而協同激活某些特定的轉錄因子，促進C-myc及其下游相關基因的表達。雖然EBNA-LP和EBNA2共享某些表達調控位點，但互相之間并不會影響彼此與特定啟動子或增強子序列的結合[29-30]。也有研究表明EBNA-LP并非與EBNA2共同激活某些基因的轉錄，而是通過“募集”某些宿主轉錄因子至 EB 病毒基因組區域，從而促進病毒基因的轉錄表達[31]。然而對其的研究相對較少，因此具體的作用機制仍不十分明確，有待進一步的深入研究。
2.2 LMP基因家族
2.2.1 LMP1
① 激活宿主細胞的生長代謝通路：LMP1表達于 EB 病毒潛伏Ⅲ期和潛伏Ⅱ期的細胞，在霍奇金淋巴瘤和未分化型鼻咽癌中都能檢測到其表達[3]。LMP1是一個重要的 EB 病毒編碼原癌基因，是 EB 病毒轉化細胞的必需基因，能在體內和體外激活核轉錄因子-κB、Jun 激酶和 p38 信號通路[29]。在LMP1的 C 末端有 2 個轉化效應位點 TES1（transformation effecter site 1）和 TES2，這 2 個位點對于核轉錄因子-κB 信號通路的激活和 EB 病毒介導的 B 細胞轉化與永生化生長都是必需的。TES1 可以模擬 CD40 的激活信號，與腫瘤壞死因子受體相關因子 1、2、3 和 5 結合形成復合體，激活非經典核轉錄因子-κB 信號通路，TES2 與腫瘤壞死因子受體相關因子 6 共同激活經典核轉錄因子-κB 信號通路。而 TES2 是細胞轉化的起始階段所必需的，轉化細胞的長期快速生長則依賴于 TES1 所激活的信號通路[29, 32-33]。LMP1還可以“劫持”宿主細胞的代謝通路，使其有利于感染細胞的快速增殖。Jiang 等[34]研究發現鼻咽癌細胞中的LMP1可以沉默HoxC8（Homeobox C8）的表達，從而減弱HoxC8對糖酵解通路的抑制作用。Xiao 等[35]同樣發現LMP1能夠激活鼻咽癌細胞內的糖酵解代謝過程，從而保證細胞快速生長所需的能量供應。
② 通過外泌體促進腫瘤進展：外泌體是細胞分泌到胞外的小囊泡（直徑 40～100 nm），其內富含脂類、蛋白質和 RNA 分子，外泌體在腫瘤的侵襲生長中發揮重要作用[36]。EB 病毒陽性的鼻咽癌細胞也可分泌外泌體，其內含有高水平的 LMP1 和病毒微 RNA，能夠激活受體細胞內的胞外信號調節激酶和 Akt（又名蛋白激酶 B）信號通路，促進受體細胞的轉化。Aga 等[36]發現LMP1能夠提高外泌體中低氧誘導因子 1α 蛋白的含量，因此認為外泌體之所以能夠促進鼻咽癌的惡性化進展，是由于其內含有的低氧誘導因子 1α 等促遷移因子的作用，其他的相關研究也顯示外泌體在 EB 病毒相關腫瘤進展中起關鍵作用[37-38]。
2.2.2 LMP2
LMP2包括LMP2A和LMP2B，LMP2A僅在 N 末端比LMP2B多了 119 個氨基酸殘基，二者在其他部分完全一致。LMP2A作為原癌基因發揮功能，LMP2A的 N 末端可以形成一個與 B 細胞受體類似的結構域，與脾酪氨酸激酶結合從而激活下游的信號通路。LMP2A與LMP1分別激活 B 細胞的 B 細胞受體和 CD40 信號通路，從而保護生發中心內的 B 細胞免于細胞凋亡[39]。在體內條件下，LMP2A可激活 B 細胞的 Ras 通路，進而活化磷脂酰肌醇 3-激酶/Akt 信號通路，促進 B 細胞的生存并拮抗凋亡；LMP2A還能夠抑制 MHC Ⅰ類鏈相關基因 A 和 4 型 UL16 結合蛋白的表達，從而減少 MHC Ⅰ類鏈相關基因 A 和 4 型 UL16 結合蛋白與 CD8+ T 細胞的相互作用，使得 EB 病毒感染細胞能夠逃逸 T 細胞的免疫殺傷[40]。與單獨表達LMP1或LMP2A相比，LMP1與LMP2A的共表達更能促進小鼠生發中心內 B 細胞的快速增殖，表明LMP2A與LMP1存在功能上的協同性[41-42]。當特異性靶向抑制LMP2A的功能時，可以顯著抑制 EB 病毒相關惡性腫瘤的生長[43-44]。上述研究都表明LMP2A更多地作為原癌基因發揮其功能。LMP2A與 B 細胞受體交聯結合后，能夠促進鈣離子動員的發生，抑制 EB 病毒潛伏性感染的細胞進入裂解感染周期，而LMP2B與LMP2A存在共定位，能夠干擾LMP2A的功能發揮，從而抑制鈣離子動員過程，促進裂解感染周期的激活[45]。但關于LMP2B的相關研究較少，其特異性的作用機制仍不清楚。
綜上，LMP基因家族更多是通過模擬某些宿主信號通路來促進宿主細胞的癌性轉化，因此針對LMP發揮功能的關鍵結構域設計相應的靶向藥物可作為未來 EB 病毒相關腫瘤的治療方向。
2.3 EBER
在受到 EB 病毒感染的宿主細胞內，除了多種 EB 病毒的蛋白質編碼基因，還有不轉錄翻譯為蛋白質的EBER。EBER包括EBER1和EBER2，長度分別為 167 和 173 個核苷酸，由宿主細胞的 RNA 聚合酶Ⅲ轉錄生成，存在于 EB 病毒潛伏性感染Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期以及裂解復制周期細胞的細胞核內[46]。EBER在 EB 病毒感染細胞內大量存在，在每個感染細胞內，約有 1×106拷貝數的EBER1和 2.5×105拷貝數的EBER2[47]，提示其可能具有重要功能。EBER表現出很嚴格的細胞核定位，而不會進行核質穿梭轉運，因此EBER更多地在細胞核內發揮著基因表達調控的功能。在人體天然免疫通路中，蛋白酶 R 可應答病毒的雙鏈 RNA 從而起到抗病毒的作用，Zerbe 等[48]的研究表明EBER1可結合蛋白酶 R 并減弱其活力，從而介導相應的免疫逃逸過程。配對盒基因 5 可促進 B 細胞特異性基因的表達，并抑制非 B 細胞譜系基因的表達，是 B 細胞生長發育的主要調控因子。Lee 等[49]發現EBER2能與配對盒基因 5 相互作用，幫助配對盒基因 5 識別并結合到 EB 病毒基因組的末端重復區域，從而調控 EB 病毒相關原癌基因LMP1和LMP2的表達。因此，作為 EB 病毒來源的非編碼 RNA，EBER更多地是作為調控子來發揮作用，但相較于其他病毒蛋白編碼基因，EBER的研究手段相對較少，因此其作用機制研究也相對缺乏，相信隨著對人類長鏈非編碼 RNA 研究方法的日趨成熟，對這類病毒源非編碼 RNA 的研究也將取得較大的進展。
2.4 EB 病毒編碼的微 RNA
微 RNA 是一類長度約 22 個核苷酸的發揮調控功能的非編碼 RNA，在人體內廣泛存在，研究表明 EB 病毒也會編碼產生大量的微 RNA[50]。EB 病毒感染的細胞至少表達 44 種 EB 病毒微 RNA，這些微 RNA 由 EB 病毒基因組的 BART（BamH I fragment A rightward transcript）和 BHRF1（BamH I fragment H rightward open reading frame 1）2 個區域轉錄而來。EB 病毒編碼的微 RNA 可靶向調節 EB 病毒和宿主相關基因的表達，在感染細胞的生長和免疫逃逸中發揮作用[50]。Vereide 等[51]發現在缺失了其他 EB 病毒原癌基因的情況下，單獨表達 BART 微 RNA 基因便足以維持伯基特淋巴瘤細胞的生長，且也能夠促進初始 B 細胞的轉化；還發現其中的 2 種 BART 微 RNA 能夠靶向抑制半胱氨酸蛋白酶 3，從而抑制細胞凋亡，保證伯基特淋巴瘤細胞的生存。在鼻咽癌細胞內的所有微 RNA 中，來自 EB 病毒的微 RNA 占其中 20%，而在彌漫大 B 淋巴瘤細胞中則只占 2%[50]，提示 EB 病毒編碼的微 RNA 在鼻咽癌的形成和發展中起更重要的作用。Lung 等[52]在鼻咽癌細胞中也發現BART5-5p、BART7-3p、BART9-3p和BART14-3p能夠協同作用以下調毛細血管擴張性共濟失調突變基因信號通路，從而促進鼻咽癌的發生。然而，由于 EB 病毒微 RNA 的相關研究起步較晚，又大多集中于鼻咽癌，因此未來還需要大量研究才能對其作用機制有更全面的認識。
3 小結與展望
綜上所述，關于 EB 病毒基因在 EB 病毒潛伏性感染與 EB 病毒相關腫瘤中的作用機制，目前已有較多的相關研究，然而對于 EB 病毒潛伏性感染期如何進展為相關腫瘤仍未系統探討。EB 病毒的潛伏性感染在人類中廣泛存在，而 EB 病毒相關腫瘤大多是由潛伏性感染發展而來，因此對中間轉化階段的深入研究將完善人們對 EB 病毒的認識，同時也有利于 EB 病毒相關腫瘤的早期診療。鑒于 EB 病毒編碼的潛伏性感染相關基因的核心調控功能，未來的相關藥物開發可將這些基因作為潛在的治療靶點。而且相信隨著研究方法的不斷革新，未來人們對 EB 病毒潛伏性感染基因在 EB 病毒所致腫瘤中作用機制的認識也必將更加深刻與全面。