引用本文： 陳麗, 唐卓蕓, 張可依, 李冬冬, 羅嵐, 敖科萍, 陶傳敏. 人類免疫缺陷病毒抗原抗體篩查聯合免疫印跡或核酸補充實驗的臨床應用. 華西醫學, 2020, 35(8): 930-935. doi: 10.7507/1002-0179.202007035 復制
獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），簡稱艾滋病，已成為威脅我國公眾健康的重大公共衛生問題[1]。截至 2018 年 9 月 30 日，我國報告現存活人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染者/AIDS 患者共 849 602 例（其中 HIV 感染者 497 231 例，AIDS 患者 352 371 例），報告死亡 262 442 例；四川、云南、廣西等地是 AIDS 流行較嚴重的地區[2]。實驗室篩查是防治工作的重要環節。四川大學華西醫院位于我國西南地區，地處 AIDS 流行較嚴重區域的腹地，HIV 篩查與防治任務尤為艱巨。《全國艾滋病檢測技術規范（2015 年修訂版）》中對 HIV 的篩查策略主要分為抗體篩查試驗和抗體確證試驗，要求對篩查陽性的樣本進行抗體確證試驗，對于采用第四代抗原抗體進行 HIV 篩查試驗陽性的，需用第三代抗體試劑進行復檢，確證陽性標本結合流行病學診斷[3]。本研究對四川大學華西醫院使用 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查和第三代抗體試劑復檢策略進行分析，評價其臨床應用，為 HIV 快速篩查與防治提供參考。
1 材料與方法
1.1 材料
回顧性分析 2018 年 1 月 1 日—12 月 31 日四川大學華西醫院進行 HIV 篩查樣本，篩查緣由包括手術前檢查、輸血前檢查、侵入性操作前檢查、門診自愿檢查等。
1.2 檢測方法
篩查采用 HIV 第四代抗原抗體檢測試劑（德國羅氏診斷公司，電化學發光法，第四代試劑）。篩查陽性及灰區的樣本，采用人類免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗體檢測試劑（珠海麗珠試劑股份有限公司，膠體金法，第三代試劑）進行復檢。復檢樣本都進行 HIV 抗體確證試驗［MP 生物醫學亞太私人有限公司，免疫印跡法（Western blot，WB）］或 HIV 核酸（HIV RNA）試驗（德國羅氏診斷公司，熒光定量聚合酶鏈反應法）。檢測方法、操作程序和質量控制（質控）均嚴格按照操作規程來進行。所有實驗均于四川大學華西醫院實驗醫學科完成。
1.3 結果判定
第四代試劑篩查試驗以臨界值指數（cut off index，COI）表示，判斷標準：COI≥1.0 為陽性，COI<0.9 為陰性，0.9≤COI<1.0 為灰區。第三代試劑復檢結果以陰性和陽性表示，質控帶與測試帶同時出現判斷為陽性，只出現質控帶判斷為陰性。WB 結果按試劑說明書進行判斷，結果分為陽性、陰性和不確定。HIV RNA 檢測結果為病毒載量值和低于檢測下限，按照《全國艾滋病檢測技術規范（2015 年修訂版）》標準作為診斷依據，即>5 000 copies/mL、≤5 000 copies/mL 和低于檢測下限[3]。HIV 第四代抗原抗體和第三代抗體試劑均陽性，記為“第四代陽性+第三代陽性”；HIV 第四代抗原抗體陽性和第三代抗體試劑陰性，記為“第四代陽性+第三代陰性”。急性期感染病例診斷按照 Fiebig 分期[4]標準進行。
1.4 統計學方法
應用 Microsoft Excel 2016 建立數據庫，對所有數據進行整理和分析。用 SPSS 19.0 軟件計算各統計數據，非正態分布變量以中位數（下四分位數，上四分位數）表示，組間比較采用 Mann-Whitney 檢驗（2 個樣本比較）或 Kruskal-Wallis 檢驗（3 個樣本比較），雙側檢驗水準α=0.05；3 個樣本比較有統計學意義的，兩兩比較采用 Mann-Whitney 檢驗，并調整雙側檢驗水準為α’=0.017。計數資料以例數和/或百分數表示，組間比較采用χ2檢驗，雙側檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 檢測總體情況
2018 年共進行 HIV 篩查 217 803 例，其中男 116 176 例（53.34%），女 101 627 例（46.66%），男女比約為 1.14∶1；年齡范圍為 0～96 歲。
篩查陽性的有 718 例，經 WB 確證試驗陽性 513 例；篩查陽性率為 0.33%，確證陽性率為 0.24%。WB 陰性和不確定的樣本中，15 例樣本經 HIV RNA 檢測，其中 6 例陽性；隨訪 4 例患者，有 2 例血清學轉陽。確證陽性樣本中，262 例患者（51.07%）來源于門急診，251 例患者（48.93%）來源于住院。臨床初步診斷以感染相關癥狀為主，出現發熱、咳嗽、頭痛等 82 例（15.98%）。
2.2 WB 試驗結果及 HIV 抗體確證陽性人群特征
WB 確證試驗陽性 513 例，占篩查陽性的 71.45%，其 COI 值為 490.50（249.05，909.90）；陰性 163 例，占篩查陽性的 22.70%，其 COI 值為 1.94（1.39，4.19）；不確定 42 例，占篩查陽性的 5.85%，其 COI 值為 5.60（1.35，44.56）。3 組間 COI 值差異有統計學意義（H=419.458，P<0.001）；確證陽性組與陰性組間比較、確證陽性組與不確定組間比較以及確證不確定組與陰性組間比較，差異均有統計學意義（Z=–19.062，P<0.001；Z=–9.913，P<0.001；Z=–2.787，P=0.005）。
513 例 HIV 抗體確證陽性人群中，男 385 例（75.05%），女 128 例（24.95%），男女比為 3.01∶1；年齡分布于各階段（16～85 歲），占比最高的年齡組是 40～49 歲。見表 1。
表1
HIV 抗體確證陽性人群的性別、年齡分布
2.3 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查聯合第三代抗體試劑復檢結果
HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性經第三代抗體試劑雙份復檢，所有樣本均進行 WB 確證試驗，見圖 1。第四代陽性+第三代陽性樣本共 536 例，占全部篩查陽性的 74.65%（536/718）；經 WB 確證試驗，確證陽性 513 例（95.71%），陰性 6 例（1.12%），不確定 17 例（3.17%）。在 17 例不確定樣本中，有 4 例患者行 HIV RNA 檢測，其中 3 例陽性；對另 4 例患者進行隨訪，其中 2 例隨訪后血清學轉陽。第四代陽性+第三代陰性共 182 例，占 25.35%（182/718）；經 WB 確證試驗，確證陽性 0 例（0.00%），陰性 157 例（86.26%），不確定 25 例（13.74%）。第四代陽性+第三代陽性樣本的確證陽性率（95.71%，513/536）明顯高于第四代陽性+第三代陰性樣本（0.00%，0/182），差異有統計學意義（χ2=610.091，P<0.001）。
圖1
HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性樣本檢測結果分布
初篩、復檢、WB 確證結果中，+ 表示陽性，– 表示陰性，± 表示不確定；HIV RNA 結果中，HIV RNA（＋）表示＞5 000 copies/mL，HIV RNA（–）表示低于檢測下限
2.4 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查聯合第三代抗體試劑復檢應用評價
2.4.1 HIV 第四代抗原抗體試劑 COI 值與第三代抗體試劑復檢結果的分析
將 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性的樣本，以第三代抗體試劑復檢結果進行分組，包括第三代抗體試劑陽性組和第三代抗體試劑陰性組。第三代抗體試劑陽性組 COI 值分布范圍較寬，主要集中在 COI≥80（占 93.28%）；當 COI 值<20 時，沒有確證陽性病例；當 COI≥20 時，WB 確證陽性率為 97.34%（513/527）；當 COI≥80 時，WB 確證陽性率達到 99.00%（495/500）。第三代抗體試劑陰性組 COI 值主要集中在 0.9<COI<40（占 98.90%），確證試驗結果以陰性和不確定為主。見表 2。
表2
HIV 第四代抗原抗體試劑 COI 值聯合第三代抗體試劑結果與 HIV 抗體確證試驗的關系
2.4.2 HIV 抗體確證陽性的 WB 帶型分析
WB 確證陽性帶型排名前三的分別是：全帶，即 9 條帶全部出現（p17、p24、p31、p51、p55、p66、gp41、gp120、gp160），占 46.39%（238 例）；其次是 2 種次全帶，一種是出現 8 條帶（p17、p24、p31、p51、p66、gp41、gp120、gp160），占 20.27%（104 例），一種是出現 7 條帶（p24、p31、p51、p66、gp41、gp120、gp160），占 15.59%（80 例）；其他帶型共計 91 例，占 17.74%。
WB 條帶數與 HIV 抗原抗體篩查 COI 值的關系：≥5 條帶的有 499 例，占 97.27%，其 COI 值為 499.30（257.35，916.75）；≤4 條帶的有 14 例，其 COI 值為 77.13（42.42，162.54）；WB 條帶數≥5 條的樣本與≤4 條的樣本 COI 值比較，兩組差異有統計學意義（Z=–4.846，P<0.001）。見圖 2。
圖2
WB 試驗條帶數與 HIV 抗原抗體篩查 COI 值的關系
2.4.3 HIV 第四代抗原抗體試劑結合第三代抗體試劑及 HIV RNA 檢出急性期感染
通過 HIV 第四代抗原抗體試劑結合第三代抗體試劑及 HIV RNA 檢出急性期感染患者 6 例，其中 5 例 WB 首次結果為不確定，1 例 WB 首次結果為陰性，其實驗室檢測結果及 Fiebig 分期見表 3。
表3
急性期感染患者實驗室檢測結果及 Fiebig 分期
3 討論
本研究的 HIV 感染者中男性占比遠高于女性，與唐卓蕓等[5]報道一致，符合當前四川省 HIV 感染流行疫情。值得關注的是≥50 歲的中老年群體占比較高，江靈等[6]分析可能與“空巢老人”現象有關。江光煚等[7]分析≥50 歲的中老年群體 HIV/AIDS 患者逐年升高與其 HIV 知曉率低、防護意識差、空閑時間較多有關，且相當比例有非婚性行為。
目前，WB 結果陽性仍然是診斷 HIV 感染的金標準[1, 8]。本研究中 95.71% 的第四代陽性+第三代陽性樣本經 WB 確證為陽性，顯示第四代陽性+第三代陽性的樣本與 WB 確證陽性的符合率高，HIV 感染的概率高。WB 確證試驗陽性的 COI 值為 490.50（249.05，909.90），與張亞蘭等[9]的研究報道相似，其 COI 值集中分布在較高的區段，提示在 HIV 篩查 COI 值高且第三代試劑陽性時 HIV 感染概率大，建議臨床醫生盡快申請 HIV 抗體確證或 HIV RNA 實驗，并結合流行病學及臨床癥狀明確診斷。本研究中，當 COI<20 時，沒有 WB 確證陽性；當 COI≥20 時隨著樣本篩查 COI 值升高，確證陽性率也隨之升高。同時值得注意的是 COI 值≥800 且<1 500 的 1 份樣本，由于 COI 值非常高，提示為特異性反應，而 HIV 第四代抗原抗體試劑檢測 HIV 抗原和抗體，第三代抗體試劑只檢測 HIV 抗體，針對這類樣本應高度考慮是 HIV 抗原陽性所致，可采用 HIV RNA 檢測的補充盡快明確診斷。閆新麗等[10]認為在 HIV 流行率較高的地區，對于急診手術、緊急分娩等情況，HIV 第四代抗原抗體試劑初篩結合第三代抗體試劑復檢結果能快速初步判斷患者的感染情況，第四代陽性+第三代陽性提示感染概率大，應及時做好醫務人員自身防護和對患者進行早期治療干預。
在第四代陽性+第三代陰性樣本中無 WB 陽性，提示 HIV 感染的可能性小，且大部分篩查 COI 值分布在低值區段（COI<10）。由于 WB 試驗批量檢測需要一定的周期，患者等待確證結果的時間較長，基于此情況，檢驗科可以通過及時與臨床醫生溝通或者在報告備注欄注明等[11]，以便臨床醫生能與患者溝通，從而降低患者的精神負擔。
確證陽性的 WB 帶型主要是全帶和次全帶，且 WB 條帶數≥5 條比≤4 條的 COI 值更高，與周昀等[12]和石明巧等[13]報道一致。WB 全帶及次全帶的出現證明患者正處于 HIV 復制活躍期，醫務工作者需隨時做好生物安全防護。
值得注意的是，6 例 HIV 急性期感染患者，其 COI 值較高，但是首次 WB 實驗的結果為不確定或陰性，通過 HIV RNA 的結果及患者流行病史，按照 Fiebig 分期有 5 例為Ⅳ期，1 例為Ⅱ期。由于第四代試劑在第三代試劑檢測基礎上增加 HIV-1 p24 抗原檢測[14]，使得檢測窗口期明顯縮短[15]，而且其檢測早期感染標本的效能與核酸檢測相當[16-17]。Nasi 等[18]的研究指出，gp160 作為前體蛋白，在蛋白酶作用下分解為 gp120 和 gp41，gp160、gp120 同時出現的 WB 陽性率達到 98.0%。因此，對于 HIV 第四代抗原抗體試劑 COI 值較高，但 WB 為陰性或不確定的情況下，特別是當 WB 出現 gp160 不確定帶型時，應盡快做 HIV RNA 檢測和隨訪，達到早期檢出 HIV 感染的目的。
本研究的不足是有部分 WB 結果不確定或陰性患者無后續資料。回顧分析發現這部分患者中大部分是成都市以外的門急診患者，其失訪原因主要有：① 患者死亡；② 無法聯系到患者；③ 聯系到患者，但是患者不愿意再次就診。因此，對于 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性患者，尤其是 COI 值較低者，可以優化檢測策略，要求患者進行 WB 檢測的同時也送檢 HIV RNA，以達到早期發現和早期診斷 HIV 感染者的目的。
綜上所述，對于使用 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查聯合 WB 或 HIV RNA 作為補充的檢測策略，第四代陽性+第三代陽性樣本，確證陽性率高；而第四代陽性+第三代陰性樣本，確證陽性率低；但對于有高危史的患者，應盡快做 HIV RNA 試驗進行早期診斷。通過 HIV 第四代抗原抗體試劑初篩聯合 WB 或 HIV RNA 補充實驗的結果綜合分析，可迅速推斷患者的感染狀態并及時提示臨床醫生關注 HIV 感染情況，盡快進行 WB 確證以及 HIV RNA 補充實驗。
獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），簡稱艾滋病，已成為威脅我國公眾健康的重大公共衛生問題[1]。截至 2018 年 9 月 30 日，我國報告現存活人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染者/AIDS 患者共 849 602 例（其中 HIV 感染者 497 231 例，AIDS 患者 352 371 例），報告死亡 262 442 例；四川、云南、廣西等地是 AIDS 流行較嚴重的地區[2]。實驗室篩查是防治工作的重要環節。四川大學華西醫院位于我國西南地區，地處 AIDS 流行較嚴重區域的腹地，HIV 篩查與防治任務尤為艱巨。《全國艾滋病檢測技術規范（2015 年修訂版）》中對 HIV 的篩查策略主要分為抗體篩查試驗和抗體確證試驗，要求對篩查陽性的樣本進行抗體確證試驗，對于采用第四代抗原抗體進行 HIV 篩查試驗陽性的，需用第三代抗體試劑進行復檢，確證陽性標本結合流行病學診斷[3]。本研究對四川大學華西醫院使用 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查和第三代抗體試劑復檢策略進行分析，評價其臨床應用，為 HIV 快速篩查與防治提供參考。
1 材料與方法
1.1 材料
回顧性分析 2018 年 1 月 1 日—12 月 31 日四川大學華西醫院進行 HIV 篩查樣本，篩查緣由包括手術前檢查、輸血前檢查、侵入性操作前檢查、門診自愿檢查等。
1.2 檢測方法
篩查采用 HIV 第四代抗原抗體檢測試劑（德國羅氏診斷公司，電化學發光法，第四代試劑）。篩查陽性及灰區的樣本，采用人類免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗體檢測試劑（珠海麗珠試劑股份有限公司，膠體金法，第三代試劑）進行復檢。復檢樣本都進行 HIV 抗體確證試驗［MP 生物醫學亞太私人有限公司，免疫印跡法（Western blot，WB）］或 HIV 核酸（HIV RNA）試驗（德國羅氏診斷公司，熒光定量聚合酶鏈反應法）。檢測方法、操作程序和質量控制（質控）均嚴格按照操作規程來進行。所有實驗均于四川大學華西醫院實驗醫學科完成。
1.3 結果判定
第四代試劑篩查試驗以臨界值指數（cut off index，COI）表示，判斷標準：COI≥1.0 為陽性，COI<0.9 為陰性，0.9≤COI<1.0 為灰區。第三代試劑復檢結果以陰性和陽性表示，質控帶與測試帶同時出現判斷為陽性，只出現質控帶判斷為陰性。WB 結果按試劑說明書進行判斷，結果分為陽性、陰性和不確定。HIV RNA 檢測結果為病毒載量值和低于檢測下限，按照《全國艾滋病檢測技術規范（2015 年修訂版）》標準作為診斷依據，即>5 000 copies/mL、≤5 000 copies/mL 和低于檢測下限[3]。HIV 第四代抗原抗體和第三代抗體試劑均陽性，記為“第四代陽性+第三代陽性”；HIV 第四代抗原抗體陽性和第三代抗體試劑陰性，記為“第四代陽性+第三代陰性”。急性期感染病例診斷按照 Fiebig 分期[4]標準進行。
1.4 統計學方法
應用 Microsoft Excel 2016 建立數據庫，對所有數據進行整理和分析。用 SPSS 19.0 軟件計算各統計數據，非正態分布變量以中位數（下四分位數，上四分位數）表示，組間比較采用 Mann-Whitney 檢驗（2 個樣本比較）或 Kruskal-Wallis 檢驗（3 個樣本比較），雙側檢驗水準α=0.05；3 個樣本比較有統計學意義的，兩兩比較采用 Mann-Whitney 檢驗，并調整雙側檢驗水準為α’=0.017。計數資料以例數和/或百分數表示，組間比較采用χ2檢驗，雙側檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 檢測總體情況
2018 年共進行 HIV 篩查 217 803 例，其中男 116 176 例（53.34%），女 101 627 例（46.66%），男女比約為 1.14∶1；年齡范圍為 0～96 歲。
篩查陽性的有 718 例，經 WB 確證試驗陽性 513 例；篩查陽性率為 0.33%，確證陽性率為 0.24%。WB 陰性和不確定的樣本中，15 例樣本經 HIV RNA 檢測，其中 6 例陽性；隨訪 4 例患者，有 2 例血清學轉陽。確證陽性樣本中，262 例患者（51.07%）來源于門急診，251 例患者（48.93%）來源于住院。臨床初步診斷以感染相關癥狀為主，出現發熱、咳嗽、頭痛等 82 例（15.98%）。
2.2 WB 試驗結果及 HIV 抗體確證陽性人群特征
WB 確證試驗陽性 513 例，占篩查陽性的 71.45%，其 COI 值為 490.50（249.05，909.90）；陰性 163 例，占篩查陽性的 22.70%，其 COI 值為 1.94（1.39，4.19）；不確定 42 例，占篩查陽性的 5.85%，其 COI 值為 5.60（1.35，44.56）。3 組間 COI 值差異有統計學意義（H=419.458，P<0.001）；確證陽性組與陰性組間比較、確證陽性組與不確定組間比較以及確證不確定組與陰性組間比較，差異均有統計學意義（Z=–19.062，P<0.001；Z=–9.913，P<0.001；Z=–2.787，P=0.005）。
513 例 HIV 抗體確證陽性人群中，男 385 例（75.05%），女 128 例（24.95%），男女比為 3.01∶1；年齡分布于各階段（16～85 歲），占比最高的年齡組是 40～49 歲。見表 1。
表1
HIV 抗體確證陽性人群的性別、年齡分布
2.3 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查聯合第三代抗體試劑復檢結果
HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性經第三代抗體試劑雙份復檢，所有樣本均進行 WB 確證試驗，見圖 1。第四代陽性+第三代陽性樣本共 536 例，占全部篩查陽性的 74.65%（536/718）；經 WB 確證試驗，確證陽性 513 例（95.71%），陰性 6 例（1.12%），不確定 17 例（3.17%）。在 17 例不確定樣本中，有 4 例患者行 HIV RNA 檢測，其中 3 例陽性；對另 4 例患者進行隨訪，其中 2 例隨訪后血清學轉陽。第四代陽性+第三代陰性共 182 例，占 25.35%（182/718）；經 WB 確證試驗，確證陽性 0 例（0.00%），陰性 157 例（86.26%），不確定 25 例（13.74%）。第四代陽性+第三代陽性樣本的確證陽性率（95.71%，513/536）明顯高于第四代陽性+第三代陰性樣本（0.00%，0/182），差異有統計學意義（χ2=610.091，P<0.001）。
圖1
HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性樣本檢測結果分布
初篩、復檢、WB 確證結果中，+ 表示陽性，– 表示陰性，± 表示不確定；HIV RNA 結果中，HIV RNA（＋）表示＞5 000 copies/mL，HIV RNA（–）表示低于檢測下限
2.4 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查聯合第三代抗體試劑復檢應用評價
2.4.1 HIV 第四代抗原抗體試劑 COI 值與第三代抗體試劑復檢結果的分析
將 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性的樣本，以第三代抗體試劑復檢結果進行分組，包括第三代抗體試劑陽性組和第三代抗體試劑陰性組。第三代抗體試劑陽性組 COI 值分布范圍較寬，主要集中在 COI≥80（占 93.28%）；當 COI 值<20 時，沒有確證陽性病例；當 COI≥20 時，WB 確證陽性率為 97.34%（513/527）；當 COI≥80 時，WB 確證陽性率達到 99.00%（495/500）。第三代抗體試劑陰性組 COI 值主要集中在 0.9<COI<40（占 98.90%），確證試驗結果以陰性和不確定為主。見表 2。
表2
HIV 第四代抗原抗體試劑 COI 值聯合第三代抗體試劑結果與 HIV 抗體確證試驗的關系
2.4.2 HIV 抗體確證陽性的 WB 帶型分析
WB 確證陽性帶型排名前三的分別是：全帶，即 9 條帶全部出現（p17、p24、p31、p51、p55、p66、gp41、gp120、gp160），占 46.39%（238 例）；其次是 2 種次全帶，一種是出現 8 條帶（p17、p24、p31、p51、p66、gp41、gp120、gp160），占 20.27%（104 例），一種是出現 7 條帶（p24、p31、p51、p66、gp41、gp120、gp160），占 15.59%（80 例）；其他帶型共計 91 例，占 17.74%。
WB 條帶數與 HIV 抗原抗體篩查 COI 值的關系：≥5 條帶的有 499 例，占 97.27%，其 COI 值為 499.30（257.35，916.75）；≤4 條帶的有 14 例，其 COI 值為 77.13（42.42，162.54）；WB 條帶數≥5 條的樣本與≤4 條的樣本 COI 值比較，兩組差異有統計學意義（Z=–4.846，P<0.001）。見圖 2。
圖2
WB 試驗條帶數與 HIV 抗原抗體篩查 COI 值的關系
2.4.3 HIV 第四代抗原抗體試劑結合第三代抗體試劑及 HIV RNA 檢出急性期感染
通過 HIV 第四代抗原抗體試劑結合第三代抗體試劑及 HIV RNA 檢出急性期感染患者 6 例，其中 5 例 WB 首次結果為不確定，1 例 WB 首次結果為陰性，其實驗室檢測結果及 Fiebig 分期見表 3。
表3
急性期感染患者實驗室檢測結果及 Fiebig 分期
3 討論
本研究的 HIV 感染者中男性占比遠高于女性，與唐卓蕓等[5]報道一致，符合當前四川省 HIV 感染流行疫情。值得關注的是≥50 歲的中老年群體占比較高，江靈等[6]分析可能與“空巢老人”現象有關。江光煚等[7]分析≥50 歲的中老年群體 HIV/AIDS 患者逐年升高與其 HIV 知曉率低、防護意識差、空閑時間較多有關，且相當比例有非婚性行為。
目前，WB 結果陽性仍然是診斷 HIV 感染的金標準[1, 8]。本研究中 95.71% 的第四代陽性+第三代陽性樣本經 WB 確證為陽性，顯示第四代陽性+第三代陽性的樣本與 WB 確證陽性的符合率高，HIV 感染的概率高。WB 確證試驗陽性的 COI 值為 490.50（249.05，909.90），與張亞蘭等[9]的研究報道相似，其 COI 值集中分布在較高的區段，提示在 HIV 篩查 COI 值高且第三代試劑陽性時 HIV 感染概率大，建議臨床醫生盡快申請 HIV 抗體確證或 HIV RNA 實驗，并結合流行病學及臨床癥狀明確診斷。本研究中，當 COI<20 時，沒有 WB 確證陽性；當 COI≥20 時隨著樣本篩查 COI 值升高，確證陽性率也隨之升高。同時值得注意的是 COI 值≥800 且<1 500 的 1 份樣本，由于 COI 值非常高，提示為特異性反應，而 HIV 第四代抗原抗體試劑檢測 HIV 抗原和抗體，第三代抗體試劑只檢測 HIV 抗體，針對這類樣本應高度考慮是 HIV 抗原陽性所致，可采用 HIV RNA 檢測的補充盡快明確診斷。閆新麗等[10]認為在 HIV 流行率較高的地區，對于急診手術、緊急分娩等情況，HIV 第四代抗原抗體試劑初篩結合第三代抗體試劑復檢結果能快速初步判斷患者的感染情況，第四代陽性+第三代陽性提示感染概率大，應及時做好醫務人員自身防護和對患者進行早期治療干預。
在第四代陽性+第三代陰性樣本中無 WB 陽性，提示 HIV 感染的可能性小，且大部分篩查 COI 值分布在低值區段（COI<10）。由于 WB 試驗批量檢測需要一定的周期，患者等待確證結果的時間較長，基于此情況，檢驗科可以通過及時與臨床醫生溝通或者在報告備注欄注明等[11]，以便臨床醫生能與患者溝通，從而降低患者的精神負擔。
確證陽性的 WB 帶型主要是全帶和次全帶，且 WB 條帶數≥5 條比≤4 條的 COI 值更高，與周昀等[12]和石明巧等[13]報道一致。WB 全帶及次全帶的出現證明患者正處于 HIV 復制活躍期，醫務工作者需隨時做好生物安全防護。
值得注意的是，6 例 HIV 急性期感染患者，其 COI 值較高，但是首次 WB 實驗的結果為不確定或陰性，通過 HIV RNA 的結果及患者流行病史，按照 Fiebig 分期有 5 例為Ⅳ期，1 例為Ⅱ期。由于第四代試劑在第三代試劑檢測基礎上增加 HIV-1 p24 抗原檢測[14]，使得檢測窗口期明顯縮短[15]，而且其檢測早期感染標本的效能與核酸檢測相當[16-17]。Nasi 等[18]的研究指出，gp160 作為前體蛋白，在蛋白酶作用下分解為 gp120 和 gp41，gp160、gp120 同時出現的 WB 陽性率達到 98.0%。因此，對于 HIV 第四代抗原抗體試劑 COI 值較高，但 WB 為陰性或不確定的情況下，特別是當 WB 出現 gp160 不確定帶型時，應盡快做 HIV RNA 檢測和隨訪，達到早期檢出 HIV 感染的目的。
本研究的不足是有部分 WB 結果不確定或陰性患者無后續資料。回顧分析發現這部分患者中大部分是成都市以外的門急診患者，其失訪原因主要有：① 患者死亡；② 無法聯系到患者；③ 聯系到患者，但是患者不愿意再次就診。因此，對于 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查陽性患者，尤其是 COI 值較低者，可以優化檢測策略，要求患者進行 WB 檢測的同時也送檢 HIV RNA，以達到早期發現和早期診斷 HIV 感染者的目的。
綜上所述，對于使用 HIV 第四代抗原抗體試劑篩查聯合 WB 或 HIV RNA 作為補充的檢測策略，第四代陽性+第三代陽性樣本，確證陽性率高；而第四代陽性+第三代陰性樣本，確證陽性率低；但對于有高危史的患者，應盡快做 HIV RNA 試驗進行早期診斷。通過 HIV 第四代抗原抗體試劑初篩聯合 WB 或 HIV RNA 補充實驗的結果綜合分析，可迅速推斷患者的感染狀態并及時提示臨床醫生關注 HIV 感染情況，盡快進行 WB 確證以及 HIV RNA 補充實驗。
