引用本文： 鐘慧鈺, 劉堂喻亨, 王旻晉, 巫麗娟, 莊杰, 王軍, 宋興勃. 流式熒光雜交技術檢測四川大學華西醫院體檢女性人乳頭瘤病毒感染亞型分布. 華西醫學, 2019, 34(8): 895-899. doi: 10.7507/1002-0179.201907058 復制
人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是一種嗜黏膜和皮膚上皮性病毒，屬乳頭瘤病毒科，目前最新發現超過 200 種 HPV 亞型，可導致人類生殖道黏膜感染的有 51 種[1]，具體可導致包括宮頸癌在內的多種皮膚黏膜良、惡性增生性疾病。其根據致病能力不同可分為高危型 HPV 及低危型 HPV。宮頸癌在世界范圍內發病率高居女性惡性腫瘤第 2 位，在發展中國家是女性發病率及死亡率最高的腫瘤之一[2]。大量研究表明，反復持續的高危型 HPV 感染是宮頸癌及其癌前病變的主要危險因素，而低危型 HPV 感染主要引起生殖器尖銳濕疣、生殖道炎癥、低度宮頸上皮內瘤變等[3]。目前隨著 HPV 疫苗的研發和應用成為研究熱點，已有多種 HPV 疫苗陸續應用于臨床。HPV 病毒亞型不同，其生物學行為及致癌風險亦不同，且 2014 年美國食品藥品監督管理局已批準 HPV 分型檢測用于宮頸癌一線篩查[4]，故進行大規模的 HPV 分型檢測、了解 HPV 亞型的地區分布和人群分布特點在宮頸癌等疾病的篩查、隨診及國內疫苗的研發、型別選擇和應用中具有重要價值。本研究采用流式熒光雜交技術（即液相生物芯片技術）對四川大學華西醫院 25 148 例健康體檢女性宮頸脫落細胞樣本進行 HPV-DNA 分型檢測，旨在了解成都地區女性 HPV 感染率及病毒亞型的流行病學特征，為建立有效的宮頸癌早期防治體系及國內 HPV 疫苗研發提供一定參考。現報告如下。
1 資料與方法
1.1 研究對象
納入 2018 年 5 月 1 日—2019 年 5 月 31 日于四川大學華西醫院健康體檢中心進行體檢的女性 25 148 例，年齡 19～89 歲，平均 43 歲。為分析各年齡分組 HPV 感染陽性率，將納入的體檢女性按照年齡分為 19～29、30～39、40～49、50～59、60～69、70～89 歲 6 個年齡組。所有納入參檢者無子宮切除史且處于非月經期，24 h 內無性行為，72 h 內無陰道上藥及陰道沖洗；排除分泌物清潔度Ⅲ度及以上、有陰道流血、宮頸已切除或檢查前已行陰道鏡檢查者。研究對象均簽署知情同意書。
1.2 儀器和試劑
HPV-DNA 分型檢測所用 HPV 核酸分型檢測試劑盒由上海透景生命科技有限公司提供（包括樣本處理試劑、核酸擴增試劑及微球雜交試劑）。檢測采用 ABI Veriti 96 Well 聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）擴增儀（美國 ABI 公司）及 Luminex 200 多功能流式點陣儀（美國 Luminex 公司），結果分析使用透景 HPV 專用分析軟件（上海透景生命科技有限公司）。
1.3 檢測方法
參檢者宮頸脫落細胞樣本均按照常規步驟以宮頸刷采集后置于細胞保存液中，2～8℃ 保存待檢。采用流式熒光雜交技術同時檢測包括 17 種高危型 HPV（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、26、53、68、82）以及 10 種低危型 HPV（HPV6、11、40、42、43、44、55、61、81、83）在內的 27 種 HPV 亞型。檢測過程包括核酸提取、PCR 擴增、微球雜交及流式熒光檢測，實驗操作嚴格按照相應試劑盒說明書進行。
1.4 結果判定
陽性內對照 Globin 的信號值大于 150 即代表整個實驗成功，若不符合則代表實驗失敗，可能的原因是樣本中未采集到細胞、某種試劑失效或相關儀器設備故障。在實驗成功的基礎上，如果有任何一種 HPV 亞型特異性探針的信號值大于 150，即判斷為該探針對應的 HPV 亞型陽性，信號值小于 150 即判斷為陰性。
1.5 統計學方法
采用 SPSS 17.0 軟件對各分組 HPV 陽性率進行統計，對多亞型感染者，各 HPV 亞型陽性率重復計算。年齡組間陽性率比較采用 χ2 檢驗，檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 體檢女性 HPV 感染情況及亞型分布情況
在納入的 25 148 例體檢女性中，檢出宮頸 HPV 感染者 3 066 例，感染率為 12.19%。檢出 HPV 亞型陽性 3 809 項，包含全部 27 種 HPV 亞型。在檢出的 HPV 感染者中，2 186 例（8.69%）感染高危型 HPV，感染率前 5 位的亞型依次是 HPV52、HPV53、HPV58、HPV16 和 HPV39；1 171 例（4.66%）感染低危型 HPV，感染率前 5 位的亞型依次是 HPV61、HPV81、HPV43、HPV44 和 HPV6。各 HPV 亞型感染情況見表 1。
表1
被檢女性 HPV 感染及亞型分布情況
2.2 單一及多重 HPV 亞型感染情況
本研究納入的 3 066 例宮頸 HPV 感染陽性者中，單一 HPV 亞型感染者居多，有 2 506 例，占 81.74%；多重感染者中以二重感染最為常見，占 13.96%。HPV 亞型感染具體情況見表 2。
表2
不同 HPV 亞型感染類型情況
2.3 不同年齡段 HPV 感染情況
在納入的 25 148 例體檢女性中，60～69 歲年齡組的 HPV 感染陽性率最高（12.87%），其次為 50～59 歲年齡組（12.67%）和 19～29 歲年齡組（12.65%），而 70～89 歲年齡組的 HPV 感染陽性率最低（10.88%）。不同年齡段 HPV 感染陽性率之間差異無統計學意義（χ2=4.035，P=0.544）。見表 3。
表3
不同年齡分組 HPV 感染陽性率情況
3 討論
目前，宮頸癌仍是嚴重危害全球女性健康的腫瘤，也是病因明確、可以有效預防的腫瘤之一。持續高危型 HPV 感染更易導致癌前病變，并可能最終發展為宮頸癌，而不同的 HPV 亞型具有不同的致癌風險，據世界衛生組織統計，宮頸癌患者中最常見的 4 種高危 HPV 亞型是 HPV16、HPV18、HPV33 及 HPV45，而正常女性群體中最常見的亞型是 HPV16、HPV18、HPV31 和 HPV58。HPV 感染的檢出率和基因型隨診斷方法、地域和人種的不同而不同[5-6]，針對不同人群的 HPV 分型檢測尤為必要。
本研究采用流式熒光雜交技術對四川大學華西醫院健康體檢女性人群進行 27 種 HPV 亞型分型檢測，結果顯示該體檢女性人群中宮頸 HPV 感染率為 12.19%，試劑盒包含的 27 種 HPV 亞型均有檢出。陽性感染者以高危 HPV 亞型感染為主（8.69%），感染率前 5 位的亞型依次為 HPV52、HPV53、HPV58、HPV16、HPV39；低危 HPV 亞型感染率為 4.66%，以 HPV61 及 HPV81 為主。HPV 感染者中又以單一亞型感染占大多數（81.74%），二重及多重感染者比例雖小，但因 HPV 基因亞型之間相互作用可增加癌前病變風險，所導致的臨床疾病風險較單一感染高，也應引起高度重視。在不同年齡段體檢者中，以 60～69 歲 HPV 感染率最高，50～59 歲及 19～29 歲次之，70～89 歲感染率最低。可能由于 30 歲以下年輕女性宮頸發育相對不成熟，免疫系統未被致敏，且性生活活躍，易受 HPV 感染；30～49 歲年齡段女性生殖道免疫較為成熟，且性伴侶較為固定，HPV 感染率有所下降；而 50 歲以后，隨年齡增長，機體免疫能力逐漸降低，HPV 感染風險再次呈增高趨勢；由于本研究中 70 歲以上樣本量少，檢測所得陽性率可能不具代表性。
3.1 國內各地區 HPV 感染情況
目前四川地區及國內其他地區女性 HPV 感染情況的報道中，感染率有較大差異。以門診患者為主的女性群體中 HPV 感染率往往較高，吳海燕等[7]報道的成都北部地區婦科門診及體檢女性的總體 HPV 感染陽性率為 23.05%，另一項針對四川北部女性的研究顯示高危 HPV 亞型感染率為 16.31%[8]，與趙佳等[9]報道的四川南充地區門診及體檢女性中高危 HPV 亞型感染率 17.50% 相近。四川地區門診女性感染者中均以高危 HPV 亞型感染為主，最常檢出的亞型為 HPV52，其次為 HPV58、HPV16、HPV39、HPV53 等，低危 HPV 亞型以 HPV6、HPV11 感染為主。此外，近年來國內其他地區如北京、甘肅、浙江、湖南、江蘇、河南等報道的門診女性群體 HPV 感染率分別為 20.64%、19.44%、25.93%、24.58%、39.02%（高危型）、33.38%[10-15]，最常感染的亞型多為 HPV16，其他常見的高危 HPV 亞型有 HPV52、HPV58、HPV18 及 HPV53，低危 HPV 亞型有 HPV6、HPV11 等。總體看來國內各地區報道的門診女性 HPV 感染陽性率均遠高于本研究結果（12.19%），四川地區及江蘇地區門診女性高危型 HPV 感染率亦高于本研究（8.69%）。
而在體檢女性人群的相關報道中，成都地區另一項研究得出健康體檢婦女宮頸 HPV 陽性感染率為 13.29%[16]，與本研究所得結果相近；感染率最高的高危 HPV 亞型依次為 HPV52、HPV58、HPV16 及 HPV68，與本研究基本一致，而最常見的低危 HPV 亞型為 HPV11、HPV6，相比此兩種亞型，本研究結果中則以 HPV61 及 HPV81 感染為主，可能與檢測方法包含的亞型數量不同有關。其他地區如新疆、陜西等在體檢婦女人群中檢測得到的 HPV 陽性感染率分別為 14.55%（高危型）及 23.37%[17-18]，均高于本研究所得結果，體檢人群中常見 HPV 亞型為 HPV52、HPV16、HPV58 等，與本研究所得成都地區體檢人群的 HPV 亞型分布較為一致。
綜合本研究及國內其他文獻報道可看出，國內多地區針對門診患者及健康體檢者的 HPV 分型檢測結果中，門診人群的總體 HPV 感染率及高危 HPV 亞型感染率均高于體檢人群，可能因為門診人群多已有明確診斷或異常的細胞學及病理結果，而體檢女性多為表觀正常的健康個體；且無論在門診患者還是健康體檢女性群體中，總體 HPV 感染率均存在地域差異，可能與地區經濟水平、女性群體年齡構成及健康教育普及程度相關。除地域差異外，所用檢測方法靈敏度、檢測的 HPV 亞型數量及納入的樣本人群也有較大影響。但多數報道的分型結果顯示感染率最高的亞型均為 HPV52、HPV58、HPV16 等亞型，各地區較為一致。
3.2 流式熒光雜交技術在各地區 HPV 分型檢測中的應用
在 HPV 病毒分型檢測中，目前臨床上廣泛應用的方法主要有熒光定量 PCR、第二代雜交捕獲技術、基因芯片技術等。本研究所用流式熒光雜交技術可一次性對多個樣本進行 HPV 分型檢測，檢測亞型包含黏膜感染常見的 17 種高危型 HPV 及 10 種低危型 HPV，其靈敏度、特異度均較高。蔡鵬飛等[19]采用流式熒光雜交技術檢測得出廣西柳州地區門診婦女中 HPV 總體感染率為 14.23%，高危型 HPV 感染率為 10.20%。另一研究采用同樣方法得出湖北地區門診婦女中 HPV 感染率為 17.2%[20]。應用流式熒光雜交技術在安徽合肥及廣東惠州地區健康體檢女性群體中進行檢測，結果顯示 HPV 感染陽性率分別為 15.52%、14.40%，其中單一感染占大多數，分別占比 79.12%、82.20%，此結果低于多數采用相同檢測方法的門診女性群體報道，但與本研究所得成都地區健康體檢女性群體中的數據相近。此外，以上在體檢人群的研究中高危 HPV 亞型感染率前 3 位均為 HPV52、HPV16 及 HPV58，低危 HPV 亞型以 HPV61、HPV43、HPV81 為主，與本研究所得結果高度一致。
3.3 展望
本研究采用流式熒光雜交技術檢測 HPV 分型的結果與同樣檢測方法的相關報道相符，適合在臨床宮頸癌篩查中應用。而本研究對四川大學華西醫院大樣本量健康體檢女性進行的 HPV 分型檢測，相對門診女性，其檢出的感染率及分型結果對了解成都地區 HPV 亞型感染的流行病學特征、特定人群的疫苗研發更有意義。目前已上市的九價 HPV 疫苗覆蓋了致病風險最高的高危亞型 HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV52、HPV58 以及低危亞型 HPV6、HPV11，覆蓋亞型基本包含本研究中體檢女性感染率前幾位的亞型，是國內較為適合接種的宮頸癌防治疫苗，但本研究結果中高危亞型 HPV53、HPV39 感染率亦位于前 5 位，目前疫苗尚未能覆蓋。國內 HPV 疫苗現處于研發階段，且 HPV 分型檢測的靈敏度高于宮頸細胞學篩查，地區性、大規模的分型檢測可提示宮頸癌的患病風險、對研制針對中國人群的特異性 HPV 疫苗有指導意義。
總之，根據本研究中四川大學華西醫院健康體檢者的 HPV 亞型分布情況，建議將 HPV52、HPV53 及 HPV58 納入到國內 HPV 疫苗篩選評估及宮頸癌防治體系中。
人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是一種嗜黏膜和皮膚上皮性病毒，屬乳頭瘤病毒科，目前最新發現超過 200 種 HPV 亞型，可導致人類生殖道黏膜感染的有 51 種[1]，具體可導致包括宮頸癌在內的多種皮膚黏膜良、惡性增生性疾病。其根據致病能力不同可分為高危型 HPV 及低危型 HPV。宮頸癌在世界范圍內發病率高居女性惡性腫瘤第 2 位，在發展中國家是女性發病率及死亡率最高的腫瘤之一[2]。大量研究表明，反復持續的高危型 HPV 感染是宮頸癌及其癌前病變的主要危險因素，而低危型 HPV 感染主要引起生殖器尖銳濕疣、生殖道炎癥、低度宮頸上皮內瘤變等[3]。目前隨著 HPV 疫苗的研發和應用成為研究熱點，已有多種 HPV 疫苗陸續應用于臨床。HPV 病毒亞型不同，其生物學行為及致癌風險亦不同，且 2014 年美國食品藥品監督管理局已批準 HPV 分型檢測用于宮頸癌一線篩查[4]，故進行大規模的 HPV 分型檢測、了解 HPV 亞型的地區分布和人群分布特點在宮頸癌等疾病的篩查、隨診及國內疫苗的研發、型別選擇和應用中具有重要價值。本研究采用流式熒光雜交技術（即液相生物芯片技術）對四川大學華西醫院 25 148 例健康體檢女性宮頸脫落細胞樣本進行 HPV-DNA 分型檢測，旨在了解成都地區女性 HPV 感染率及病毒亞型的流行病學特征，為建立有效的宮頸癌早期防治體系及國內 HPV 疫苗研發提供一定參考。現報告如下。
1 資料與方法
1.1 研究對象
納入 2018 年 5 月 1 日—2019 年 5 月 31 日于四川大學華西醫院健康體檢中心進行體檢的女性 25 148 例，年齡 19～89 歲，平均 43 歲。為分析各年齡分組 HPV 感染陽性率，將納入的體檢女性按照年齡分為 19～29、30～39、40～49、50～59、60～69、70～89 歲 6 個年齡組。所有納入參檢者無子宮切除史且處于非月經期，24 h 內無性行為，72 h 內無陰道上藥及陰道沖洗；排除分泌物清潔度Ⅲ度及以上、有陰道流血、宮頸已切除或檢查前已行陰道鏡檢查者。研究對象均簽署知情同意書。
1.2 儀器和試劑
HPV-DNA 分型檢測所用 HPV 核酸分型檢測試劑盒由上海透景生命科技有限公司提供（包括樣本處理試劑、核酸擴增試劑及微球雜交試劑）。檢測采用 ABI Veriti 96 Well 聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）擴增儀（美國 ABI 公司）及 Luminex 200 多功能流式點陣儀（美國 Luminex 公司），結果分析使用透景 HPV 專用分析軟件（上海透景生命科技有限公司）。
1.3 檢測方法
參檢者宮頸脫落細胞樣本均按照常規步驟以宮頸刷采集后置于細胞保存液中，2～8℃ 保存待檢。采用流式熒光雜交技術同時檢測包括 17 種高危型 HPV（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、26、53、68、82）以及 10 種低危型 HPV（HPV6、11、40、42、43、44、55、61、81、83）在內的 27 種 HPV 亞型。檢測過程包括核酸提取、PCR 擴增、微球雜交及流式熒光檢測，實驗操作嚴格按照相應試劑盒說明書進行。
1.4 結果判定
陽性內對照 Globin 的信號值大于 150 即代表整個實驗成功，若不符合則代表實驗失敗，可能的原因是樣本中未采集到細胞、某種試劑失效或相關儀器設備故障。在實驗成功的基礎上，如果有任何一種 HPV 亞型特異性探針的信號值大于 150，即判斷為該探針對應的 HPV 亞型陽性，信號值小于 150 即判斷為陰性。
1.5 統計學方法
采用 SPSS 17.0 軟件對各分組 HPV 陽性率進行統計，對多亞型感染者，各 HPV 亞型陽性率重復計算。年齡組間陽性率比較采用 χ2 檢驗，檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 體檢女性 HPV 感染情況及亞型分布情況
在納入的 25 148 例體檢女性中，檢出宮頸 HPV 感染者 3 066 例，感染率為 12.19%。檢出 HPV 亞型陽性 3 809 項，包含全部 27 種 HPV 亞型。在檢出的 HPV 感染者中，2 186 例（8.69%）感染高危型 HPV，感染率前 5 位的亞型依次是 HPV52、HPV53、HPV58、HPV16 和 HPV39；1 171 例（4.66%）感染低危型 HPV，感染率前 5 位的亞型依次是 HPV61、HPV81、HPV43、HPV44 和 HPV6。各 HPV 亞型感染情況見表 1。
表1
被檢女性 HPV 感染及亞型分布情況
2.2 單一及多重 HPV 亞型感染情況
本研究納入的 3 066 例宮頸 HPV 感染陽性者中，單一 HPV 亞型感染者居多，有 2 506 例，占 81.74%；多重感染者中以二重感染最為常見，占 13.96%。HPV 亞型感染具體情況見表 2。
表2
不同 HPV 亞型感染類型情況
2.3 不同年齡段 HPV 感染情況
在納入的 25 148 例體檢女性中，60～69 歲年齡組的 HPV 感染陽性率最高（12.87%），其次為 50～59 歲年齡組（12.67%）和 19～29 歲年齡組（12.65%），而 70～89 歲年齡組的 HPV 感染陽性率最低（10.88%）。不同年齡段 HPV 感染陽性率之間差異無統計學意義（χ2=4.035，P=0.544）。見表 3。
表3
不同年齡分組 HPV 感染陽性率情況
3 討論
目前，宮頸癌仍是嚴重危害全球女性健康的腫瘤，也是病因明確、可以有效預防的腫瘤之一。持續高危型 HPV 感染更易導致癌前病變，并可能最終發展為宮頸癌，而不同的 HPV 亞型具有不同的致癌風險，據世界衛生組織統計，宮頸癌患者中最常見的 4 種高危 HPV 亞型是 HPV16、HPV18、HPV33 及 HPV45，而正常女性群體中最常見的亞型是 HPV16、HPV18、HPV31 和 HPV58。HPV 感染的檢出率和基因型隨診斷方法、地域和人種的不同而不同[5-6]，針對不同人群的 HPV 分型檢測尤為必要。
本研究采用流式熒光雜交技術對四川大學華西醫院健康體檢女性人群進行 27 種 HPV 亞型分型檢測，結果顯示該體檢女性人群中宮頸 HPV 感染率為 12.19%，試劑盒包含的 27 種 HPV 亞型均有檢出。陽性感染者以高危 HPV 亞型感染為主（8.69%），感染率前 5 位的亞型依次為 HPV52、HPV53、HPV58、HPV16、HPV39；低危 HPV 亞型感染率為 4.66%，以 HPV61 及 HPV81 為主。HPV 感染者中又以單一亞型感染占大多數（81.74%），二重及多重感染者比例雖小，但因 HPV 基因亞型之間相互作用可增加癌前病變風險，所導致的臨床疾病風險較單一感染高，也應引起高度重視。在不同年齡段體檢者中，以 60～69 歲 HPV 感染率最高，50～59 歲及 19～29 歲次之，70～89 歲感染率最低。可能由于 30 歲以下年輕女性宮頸發育相對不成熟，免疫系統未被致敏，且性生活活躍，易受 HPV 感染；30～49 歲年齡段女性生殖道免疫較為成熟，且性伴侶較為固定，HPV 感染率有所下降；而 50 歲以后，隨年齡增長，機體免疫能力逐漸降低，HPV 感染風險再次呈增高趨勢；由于本研究中 70 歲以上樣本量少，檢測所得陽性率可能不具代表性。
3.1 國內各地區 HPV 感染情況
目前四川地區及國內其他地區女性 HPV 感染情況的報道中，感染率有較大差異。以門診患者為主的女性群體中 HPV 感染率往往較高，吳海燕等[7]報道的成都北部地區婦科門診及體檢女性的總體 HPV 感染陽性率為 23.05%，另一項針對四川北部女性的研究顯示高危 HPV 亞型感染率為 16.31%[8]，與趙佳等[9]報道的四川南充地區門診及體檢女性中高危 HPV 亞型感染率 17.50% 相近。四川地區門診女性感染者中均以高危 HPV 亞型感染為主，最常檢出的亞型為 HPV52，其次為 HPV58、HPV16、HPV39、HPV53 等，低危 HPV 亞型以 HPV6、HPV11 感染為主。此外，近年來國內其他地區如北京、甘肅、浙江、湖南、江蘇、河南等報道的門診女性群體 HPV 感染率分別為 20.64%、19.44%、25.93%、24.58%、39.02%（高危型）、33.38%[10-15]，最常感染的亞型多為 HPV16，其他常見的高危 HPV 亞型有 HPV52、HPV58、HPV18 及 HPV53，低危 HPV 亞型有 HPV6、HPV11 等。總體看來國內各地區報道的門診女性 HPV 感染陽性率均遠高于本研究結果（12.19%），四川地區及江蘇地區門診女性高危型 HPV 感染率亦高于本研究（8.69%）。
而在體檢女性人群的相關報道中，成都地區另一項研究得出健康體檢婦女宮頸 HPV 陽性感染率為 13.29%[16]，與本研究所得結果相近；感染率最高的高危 HPV 亞型依次為 HPV52、HPV58、HPV16 及 HPV68，與本研究基本一致，而最常見的低危 HPV 亞型為 HPV11、HPV6，相比此兩種亞型，本研究結果中則以 HPV61 及 HPV81 感染為主，可能與檢測方法包含的亞型數量不同有關。其他地區如新疆、陜西等在體檢婦女人群中檢測得到的 HPV 陽性感染率分別為 14.55%（高危型）及 23.37%[17-18]，均高于本研究所得結果，體檢人群中常見 HPV 亞型為 HPV52、HPV16、HPV58 等，與本研究所得成都地區體檢人群的 HPV 亞型分布較為一致。
綜合本研究及國內其他文獻報道可看出，國內多地區針對門診患者及健康體檢者的 HPV 分型檢測結果中，門診人群的總體 HPV 感染率及高危 HPV 亞型感染率均高于體檢人群，可能因為門診人群多已有明確診斷或異常的細胞學及病理結果，而體檢女性多為表觀正常的健康個體；且無論在門診患者還是健康體檢女性群體中，總體 HPV 感染率均存在地域差異，可能與地區經濟水平、女性群體年齡構成及健康教育普及程度相關。除地域差異外，所用檢測方法靈敏度、檢測的 HPV 亞型數量及納入的樣本人群也有較大影響。但多數報道的分型結果顯示感染率最高的亞型均為 HPV52、HPV58、HPV16 等亞型，各地區較為一致。
3.2 流式熒光雜交技術在各地區 HPV 分型檢測中的應用
在 HPV 病毒分型檢測中，目前臨床上廣泛應用的方法主要有熒光定量 PCR、第二代雜交捕獲技術、基因芯片技術等。本研究所用流式熒光雜交技術可一次性對多個樣本進行 HPV 分型檢測，檢測亞型包含黏膜感染常見的 17 種高危型 HPV 及 10 種低危型 HPV，其靈敏度、特異度均較高。蔡鵬飛等[19]采用流式熒光雜交技術檢測得出廣西柳州地區門診婦女中 HPV 總體感染率為 14.23%，高危型 HPV 感染率為 10.20%。另一研究采用同樣方法得出湖北地區門診婦女中 HPV 感染率為 17.2%[20]。應用流式熒光雜交技術在安徽合肥及廣東惠州地區健康體檢女性群體中進行檢測，結果顯示 HPV 感染陽性率分別為 15.52%、14.40%，其中單一感染占大多數，分別占比 79.12%、82.20%，此結果低于多數采用相同檢測方法的門診女性群體報道，但與本研究所得成都地區健康體檢女性群體中的數據相近。此外，以上在體檢人群的研究中高危 HPV 亞型感染率前 3 位均為 HPV52、HPV16 及 HPV58，低危 HPV 亞型以 HPV61、HPV43、HPV81 為主，與本研究所得結果高度一致。
3.3 展望
本研究采用流式熒光雜交技術檢測 HPV 分型的結果與同樣檢測方法的相關報道相符，適合在臨床宮頸癌篩查中應用。而本研究對四川大學華西醫院大樣本量健康體檢女性進行的 HPV 分型檢測，相對門診女性，其檢出的感染率及分型結果對了解成都地區 HPV 亞型感染的流行病學特征、特定人群的疫苗研發更有意義。目前已上市的九價 HPV 疫苗覆蓋了致病風險最高的高危亞型 HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV52、HPV58 以及低危亞型 HPV6、HPV11，覆蓋亞型基本包含本研究中體檢女性感染率前幾位的亞型，是國內較為適合接種的宮頸癌防治疫苗，但本研究結果中高危亞型 HPV53、HPV39 感染率亦位于前 5 位，目前疫苗尚未能覆蓋。國內 HPV 疫苗現處于研發階段，且 HPV 分型檢測的靈敏度高于宮頸細胞學篩查，地區性、大規模的分型檢測可提示宮頸癌的患病風險、對研制針對中國人群的特異性 HPV 疫苗有指導意義。
總之，根據本研究中四川大學華西醫院健康體檢者的 HPV 亞型分布情況，建議將 HPV52、HPV53 及 HPV58 納入到國內 HPV 疫苗篩選評估及宮頸癌防治體系中。
