不孕不育發病率在世界范圍內逐年增加，其中女性不孕患者50%～60%，其可能與生活環境及生活方式的改變有關。由于婦科惡性腫瘤發生率有逐年增加及年輕化趨勢，卵巢功能缺陷或卵巢結構缺如導致生殖細胞缺陷的患者可能終身不孕，但干細胞移植治療為這類患者帶來了新的希望。干細胞是具有自我更新及多向分化潛能的未分化細胞，存在于胚胎、胎兒或成年各階段，這些特點使其成為細胞治療及再生醫學領域的研究熱點。理論上，在適宜條件下，干細胞能分化為包括雌性生殖細胞在內的三胚層不同類型細胞，進而形成機體不同組織及器官。現今，多能干細胞誘導分化為雌性生殖細胞的實驗研究取得了一定的成果，因此，干細胞轉分化為雌性生殖細胞從而進行細胞移植治療及卵巢組織再生可能作為未來治療不孕不育的新方法。此綜述旨在總結干細胞向雌性生殖細胞轉分化的研究進展及其應用于生殖醫學所面臨的挑戰。
引用本文： 郭清民, 王慧, 鄭艾. 干細胞治療卵巢功能低下性不孕的研究進展和挑戰. 華西醫學, 2016, 31(11): 1949-1952. doi: 10.7507/1002-0179.201600535 復制
據統計，全球近72 400 000人或15%夫妻遭受不孕不育的困擾，其中女性不孕因素占50% ～ 60%[1]。雖然輔助生殖技術能夠使80%以上的不孕不育夫婦懷孕，但無法從根本上解決卵巢功能衰竭或卵巢結構缺如所致的不孕[2]。2003年Hübner等[3]在體外首次成功將胚胎干細胞（ESC）誘導分化為卵母細胞樣細胞（OLC），為卵巢功能低下或結構缺如致不孕患者帶來希望。現細胞治療已逐漸成為治療退行性疾病的一種新興方法。
1 干細胞：細胞治療的新希望
干細胞的特性：① 自我更新能力；② 克隆性，即子細胞來源于同一個干細胞；③ 分化性，干細胞能分化為機體的不同類型細胞，所以又稱“萬能細胞”[4]。
干細胞分為ESC、成體干細胞、胚外組織干細胞和誘導多能干細胞（iPSC）與核轉移胚胎干細胞（NT-ESC）。其中，ESC在多能階段時期具有無限增殖能力，能穩定地分化為三胚層衍生細胞、組織及器官。成體干細胞有助于器官損傷后的修復[5]。胚外組織干細胞最大的優點在于其取材方便、資源充足、無倫理學爭議、無致瘤風險及無免疫原性等。
Takahashi等[6]獲得iPSC，并檢出其表達ESC標志物和具有端粒酶活性，具有分化為三胚層能力。Deuse等[7]發現卵細胞過早退出減數分裂過程以及不適宜的生長環境為NT-ESC胚胎發育停止的關鍵因素。
可見，干細胞在體外能分化為雌性生殖細胞以及卵細胞。干細胞的分化潛能使其在生殖醫學領域具有廣闊的應用前景，為卵巢功能衰竭或卵巢結構缺失致生殖細胞缺如不孕患者帶來希望。
2 雌性生殖細胞的體內發育及體外研究
原始生殖細胞（PGC）源于胚胎第4周卵黃囊頂近尿囊處的內胚層。PGC歷經臨近卵黃囊的胚外區域及內胚層的后腸，稱為遷移后PGC[8]。胚胎第6周時，PGC遷入生殖腺內的初級性索，進行有絲分裂產生卵原細胞。若核型為46.XX，胚胎第10周時初級性索退化，未分化性腺的表面上皮增生再次向間充質伸入次級性索形成即皮質索，次級性索與上皮細胞分離后發育為卵巢皮質，未分化性腺的表面上皮下的間充質分化為白膜。胚胎第4個月時，皮質索斷裂形成多個細胞團，其中央的卵原細胞繼續增殖達高峰，約600萬 ～ 700萬個稱為始基卵泡。妊娠中后期卵泡不斷閉鎖，至胎兒出生時卵巢中有100萬～ 200萬原始卵泡。經過兒童期至青春期，只剩下約30萬個。經過原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡和成熟卵泡4個階段卵泡成熟并排卵，至排卵前完成，形成次級卵母細胞，其迅速進入第2次減數分裂并停滯于中期，若與精子結合則完成第2次減數分裂形成受精卵，若未受精則在排卵后12 ～ 24 h退化。女性一生約排400個卵，其余均退化。
Clark等[9]對胎兒或成年不同階段生殖細胞基因表達譜進行了總結，認為生殖細胞各階段標志物有重疊，從而增加了各階段生殖細胞的鑒定難度。Tada等[10]認為PGC與ESC均源于多向分化潛能的內細胞群，都能分化為原始三胚層及生殖系，并通過與體細胞融合可重組體細胞為胚胎樣細胞。人胚胎干細胞（hESC）具有特異的集落形態學以及不能表達早期生殖細胞標志物，但能表達無精癥缺失基因（DAZL）、nanos蛋白和Pumilio基因等[11]。1988年Thomson等[12]首次建立體外hESC系，為建立體外早期胚胎發育模型以及研究生殖細胞復雜的發育機制奠定了基礎。Takahashi等[6]通過重組體細胞遺傳物質而獲得iPSC以及Deuse等[7]通過核移植技術獲得的NT-ESC均提供了胚胎發育和疾病研究的細胞模型，為生殖醫學的未來發展提供新途徑。
人們一直認為女性一生中僅有400 ～ 500個卵泡發育成熟并排卵，從而女性生殖功能走向衰竭。近年來，多個研究表明成年卵巢中存在多能細胞，這種多能細胞被稱為雌性生殖系干細胞（FGSC）[13-14]。Zou等[15]從新生和成年小鼠卵巢中成功獲得這類干細胞系，并將綠色熒光蛋白表達陽性的FGSC移植入絕育小鼠，FGSC可分化為成熟的卵母細胞，產生綠色熒光蛋白陽性的后代。使通過植入卵母細胞和卵泡結構以重建卵巢組織不再是一個遙不可及的目標，為生殖細胞缺如患者帶來希望。
3 各種干細胞分化為雌性生殖細胞的研究
3.1 ESC分化為雌性生殖細胞
Hübner等[3]在體外首次成功將鼠胚胎干細胞（mESC）誘導分化為OLC，并在其培養基中檢測到有雌激素產生。Clark等[9]從形態學、基因表達等多方面表明hESC在體外也能分化為雌性生殖細胞，其能表達生殖細胞特異性基因DAZL及生長分化因子9、聯會復合體蛋白1、聯會復合體蛋白3等生殖細胞特異性標志物。但其未觀察到完整的聯合復合體的產生，可推測減數分裂需在體內必需的細胞因子和（或）體細胞的直接接觸下才能有效準確地完成[10]。可見，ESC具有向雌性生殖細胞分化的潛力，但體外誘導分化獲得的OLC存在成熟障礙。體外卵母細胞成熟障礙可能與卵母細胞生長發育的微環境有關。
3.2 成體干細胞分化為雌性生殖細胞
Dyce等[16]從胎豬皮膚分離出干細胞，并誘導其分化成OLC，有個別OLC自然形成孤雌胚胎樣結構。隨后，Dyce等[17]研究顯示新生胎鼠皮膚干細胞也可在體外分化為OLC。皮膚干細胞在體外能分化為OLC，可推測其培養基中可能含有促進卵母細胞生長發育的必需生長因子。后來，Virant-Klun等[18]研究顯示在卵巢早衰婦女的卵巢上皮細胞中存在多能性干細胞，并在體外、卵泡液誘導下此干細胞能產生OLC結構，并表達多能干細胞及卵細胞相關基因。卵巢生殖干細胞的提出為不同原因所致的卵巢功能衰竭或卵巢結構缺如的患者提供新的生殖細胞來源。
3.3 iPSC分化為雌性生殖細胞
Anchan等[19]研究表明源于鼠或人卵巢顆粒細胞的iPSC能分化為產生類固醇激素及生殖細胞樣細胞，表達卵巢標志物以及早期配子形成標志物，并且源于卵巢顆粒細胞的iPSC比源于胚體細胞的iPSC在分化過程中表達量更高。由此表明從卵巢組織獲得的iPSC更易向卵巢組織分化。
4 干細胞分化為雌性生殖細胞的應用前景及挑戰
干細胞在一定條件下具有分化為雌性生殖細胞的潛力。然而，ESC因源于早期胚胎組織而存在倫理學爭議；ESC高表達端粒酶活性，將其移植入受體組織后有產生致瘤性和免疫排斥等風險。這些不利因素嚴重限制了ESC應用于細胞治療、再生醫學及臨床治療。成體干細胞取材方便，無免疫排斥及致瘤性等弊端，是一種較ESC理想的干細胞。
生殖細胞的體內起源、遷移、發育及性別分化等過程需特定微環境及生殖細胞特定基因等共同調控。但生殖細胞體外培養模型建立較困難，以致人類對生殖細胞生長發育的調控機制至今仍不清楚。幸運的是，在體外成功將干細胞誘導為雌性生殖細胞的研究為建立哺乳動物雌性生殖細胞體外培養模型帶來希望，為研究生殖細胞生長發育等過程中的復雜調控機制及不孕不育的發生機制奠定了基礎，并有望為細胞治療及再生醫學提供一種新型理想的種子細胞。以后將為因卵巢功能衰竭或卵巢結構缺如致不孕患者提供卵巢再生的機會。
多能干細胞分化為雌性生殖細胞所面臨的挑戰：① 卵母細胞獲得率低且具有隨機性。由于對生殖細胞分化過程和啟動性別定向分化的機制及其所需的微環境不明確，目前尚無提高其分化效率以實現規模化生產的有效、穩定、統一的誘導方案。② 體外卵母細胞成熟障礙。有研究報道人多能干細胞能分化為單倍體雌性生殖細胞，但所產生的單倍體雌性生殖細胞既不像卵母細胞也不具有受精能力，即具有體外卵母細胞成熟障礙的問題[20]。在輔助生殖技術中也同樣存在體外卵母細胞成熟障礙，對此體外卵母細胞成熟技術（IVM）逐步得以研究，并認為IVM沒有基于促性腺激素刺激的體外受精（IVF）的卵巢過度刺激的弊端且可進入卵母細胞體內發育過程中的自然周期，將來有望取代IVF。1998，Goud等[21]研究表皮生長因子及顆粒細胞對卵細胞核及卵細胞質成熟的作用，他們發現表皮生長因子對無顆粒細胞的卵細胞及有顆粒細胞的卵細胞的成熟均有作用；而顆粒細胞的存在有助于細胞質的成熟，提高受精后的卵裂率。Hayashi等[22]報道鼠干細胞能在體內外分化為OLC，并且能與精子完成受精過程，產生正常后代。此成果能否應用于人干細胞的分化，仍需進一步研究。但此次突破表明干細胞具有向成年機體所有細胞分化的能力，同時為由于醫療干預、毒物接觸或卵巢早衰而致不孕患者通過iPSC獲得新的有功能的卵母細胞開辟了另一條途徑。③ PGC與ESC的關系。如前述，PGC與ESC具有相似的標志物表達譜，使得ESC與應用ESC分化產生的生殖細胞難以鑒別和分離。明確以及選擇合適的特異性標志基因有助于間接了解體外生殖細胞的分化進程。④ 成體干細胞與生殖干細胞之間的關系目前尚未探討清楚。⑤ 質疑生殖干細胞的存在。多個研究證實在哺乳動物的卵巢中發現潛在的生殖干細胞[23]，但仍然不確定這些細胞在生理條件下的卵巢中是否存在及其功能狀態是否正常。并且，之前表明有PGC的研究中只是應用免疫熒光學證實有PGC的存在，但未觀察到PGC進行減數分裂以及分化成卵細胞[24]。證明卵巢中存在PGC不同研究本身存在爭論，比如對Ddx4的表達，一些實驗中僅研究卵細胞但不研究生殖干細胞，因為表達細胞質標志物Ddx4的卵細胞不能發生有絲分裂，所以結果未發現Ddx4陽性的有絲分裂細胞[25]。Ddx4是存在于細胞質還是細胞表面，分離出生殖系干細胞是否可靠，這些問題使得類似實驗結果不可靠，需后續研究加以明確。
上述各種問題的存在將嚴重影響干細胞在體外分化為雌性生殖細胞，使卵巢功能衰竭或結構缺如導致不孕患者卵巢再生的機會渺茫，嚴重阻礙臨床恢復卵巢生殖功能及內分泌功能的進程。相信隨著時代的進步和科學技術的發展，這些問題最終會被解決，干細胞體外分化為雌性生殖細胞的深入研究必將促進人類發育學的發展，為不同原因導致不孕患者帶來新的希望。
5 結語
不孕不育發病率逐年增加，雖然輔助生殖技術的應用使不孕婦女妊娠成為可能，但無法從根本上解決卵巢功能或結構缺失患者的生育問題。已有研究發現mESC在體外誘導出OLC，并在培養基中檢測到雌二醇的生成。但在人卵巢上皮細胞轉分化為雌性生殖細胞的研究還存在很多問題，目前關于這方面的研究報道尚不多并且有一定的爭議。因此，解決婦女因卵巢功能或結構確實所致的不孕，有待更多更全面深入的研究。
據統計，全球近72 400 000人或15%夫妻遭受不孕不育的困擾，其中女性不孕因素占50% ～ 60%[1]。雖然輔助生殖技術能夠使80%以上的不孕不育夫婦懷孕，但無法從根本上解決卵巢功能衰竭或卵巢結構缺如所致的不孕[2]。2003年Hübner等[3]在體外首次成功將胚胎干細胞（ESC）誘導分化為卵母細胞樣細胞（OLC），為卵巢功能低下或結構缺如致不孕患者帶來希望。現細胞治療已逐漸成為治療退行性疾病的一種新興方法。
1 干細胞：細胞治療的新希望
干細胞的特性：① 自我更新能力；② 克隆性，即子細胞來源于同一個干細胞；③ 分化性，干細胞能分化為機體的不同類型細胞，所以又稱“萬能細胞”[4]。
干細胞分為ESC、成體干細胞、胚外組織干細胞和誘導多能干細胞（iPSC）與核轉移胚胎干細胞（NT-ESC）。其中，ESC在多能階段時期具有無限增殖能力，能穩定地分化為三胚層衍生細胞、組織及器官。成體干細胞有助于器官損傷后的修復[5]。胚外組織干細胞最大的優點在于其取材方便、資源充足、無倫理學爭議、無致瘤風險及無免疫原性等。
Takahashi等[6]獲得iPSC，并檢出其表達ESC標志物和具有端粒酶活性，具有分化為三胚層能力。Deuse等[7]發現卵細胞過早退出減數分裂過程以及不適宜的生長環境為NT-ESC胚胎發育停止的關鍵因素。
可見，干細胞在體外能分化為雌性生殖細胞以及卵細胞。干細胞的分化潛能使其在生殖醫學領域具有廣闊的應用前景，為卵巢功能衰竭或卵巢結構缺失致生殖細胞缺如不孕患者帶來希望。
2 雌性生殖細胞的體內發育及體外研究
原始生殖細胞（PGC）源于胚胎第4周卵黃囊頂近尿囊處的內胚層。PGC歷經臨近卵黃囊的胚外區域及內胚層的后腸，稱為遷移后PGC[8]。胚胎第6周時，PGC遷入生殖腺內的初級性索，進行有絲分裂產生卵原細胞。若核型為46.XX，胚胎第10周時初級性索退化，未分化性腺的表面上皮增生再次向間充質伸入次級性索形成即皮質索，次級性索與上皮細胞分離后發育為卵巢皮質，未分化性腺的表面上皮下的間充質分化為白膜。胚胎第4個月時，皮質索斷裂形成多個細胞團，其中央的卵原細胞繼續增殖達高峰，約600萬 ～ 700萬個稱為始基卵泡。妊娠中后期卵泡不斷閉鎖，至胎兒出生時卵巢中有100萬～ 200萬原始卵泡。經過兒童期至青春期，只剩下約30萬個。經過原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡和成熟卵泡4個階段卵泡成熟并排卵，至排卵前完成，形成次級卵母細胞，其迅速進入第2次減數分裂并停滯于中期，若與精子結合則完成第2次減數分裂形成受精卵，若未受精則在排卵后12 ～ 24 h退化。女性一生約排400個卵，其余均退化。
Clark等[9]對胎兒或成年不同階段生殖細胞基因表達譜進行了總結，認為生殖細胞各階段標志物有重疊，從而增加了各階段生殖細胞的鑒定難度。Tada等[10]認為PGC與ESC均源于多向分化潛能的內細胞群，都能分化為原始三胚層及生殖系，并通過與體細胞融合可重組體細胞為胚胎樣細胞。人胚胎干細胞（hESC）具有特異的集落形態學以及不能表達早期生殖細胞標志物，但能表達無精癥缺失基因（DAZL）、nanos蛋白和Pumilio基因等[11]。1988年Thomson等[12]首次建立體外hESC系，為建立體外早期胚胎發育模型以及研究生殖細胞復雜的發育機制奠定了基礎。Takahashi等[6]通過重組體細胞遺傳物質而獲得iPSC以及Deuse等[7]通過核移植技術獲得的NT-ESC均提供了胚胎發育和疾病研究的細胞模型，為生殖醫學的未來發展提供新途徑。
人們一直認為女性一生中僅有400 ～ 500個卵泡發育成熟并排卵，從而女性生殖功能走向衰竭。近年來，多個研究表明成年卵巢中存在多能細胞，這種多能細胞被稱為雌性生殖系干細胞（FGSC）[13-14]。Zou等[15]從新生和成年小鼠卵巢中成功獲得這類干細胞系，并將綠色熒光蛋白表達陽性的FGSC移植入絕育小鼠，FGSC可分化為成熟的卵母細胞，產生綠色熒光蛋白陽性的后代。使通過植入卵母細胞和卵泡結構以重建卵巢組織不再是一個遙不可及的目標，為生殖細胞缺如患者帶來希望。
3 各種干細胞分化為雌性生殖細胞的研究
3.1 ESC分化為雌性生殖細胞
Hübner等[3]在體外首次成功將鼠胚胎干細胞（mESC）誘導分化為OLC，并在其培養基中檢測到有雌激素產生。Clark等[9]從形態學、基因表達等多方面表明hESC在體外也能分化為雌性生殖細胞，其能表達生殖細胞特異性基因DAZL及生長分化因子9、聯會復合體蛋白1、聯會復合體蛋白3等生殖細胞特異性標志物。但其未觀察到完整的聯合復合體的產生，可推測減數分裂需在體內必需的細胞因子和（或）體細胞的直接接觸下才能有效準確地完成[10]。可見，ESC具有向雌性生殖細胞分化的潛力，但體外誘導分化獲得的OLC存在成熟障礙。體外卵母細胞成熟障礙可能與卵母細胞生長發育的微環境有關。
3.2 成體干細胞分化為雌性生殖細胞
Dyce等[16]從胎豬皮膚分離出干細胞，并誘導其分化成OLC，有個別OLC自然形成孤雌胚胎樣結構。隨后，Dyce等[17]研究顯示新生胎鼠皮膚干細胞也可在體外分化為OLC。皮膚干細胞在體外能分化為OLC，可推測其培養基中可能含有促進卵母細胞生長發育的必需生長因子。后來，Virant-Klun等[18]研究顯示在卵巢早衰婦女的卵巢上皮細胞中存在多能性干細胞，并在體外、卵泡液誘導下此干細胞能產生OLC結構，并表達多能干細胞及卵細胞相關基因。卵巢生殖干細胞的提出為不同原因所致的卵巢功能衰竭或卵巢結構缺如的患者提供新的生殖細胞來源。
3.3 iPSC分化為雌性生殖細胞
Anchan等[19]研究表明源于鼠或人卵巢顆粒細胞的iPSC能分化為產生類固醇激素及生殖細胞樣細胞，表達卵巢標志物以及早期配子形成標志物，并且源于卵巢顆粒細胞的iPSC比源于胚體細胞的iPSC在分化過程中表達量更高。由此表明從卵巢組織獲得的iPSC更易向卵巢組織分化。
4 干細胞分化為雌性生殖細胞的應用前景及挑戰
干細胞在一定條件下具有分化為雌性生殖細胞的潛力。然而，ESC因源于早期胚胎組織而存在倫理學爭議；ESC高表達端粒酶活性，將其移植入受體組織后有產生致瘤性和免疫排斥等風險。這些不利因素嚴重限制了ESC應用于細胞治療、再生醫學及臨床治療。成體干細胞取材方便，無免疫排斥及致瘤性等弊端，是一種較ESC理想的干細胞。
生殖細胞的體內起源、遷移、發育及性別分化等過程需特定微環境及生殖細胞特定基因等共同調控。但生殖細胞體外培養模型建立較困難，以致人類對生殖細胞生長發育的調控機制至今仍不清楚。幸運的是，在體外成功將干細胞誘導為雌性生殖細胞的研究為建立哺乳動物雌性生殖細胞體外培養模型帶來希望，為研究生殖細胞生長發育等過程中的復雜調控機制及不孕不育的發生機制奠定了基礎，并有望為細胞治療及再生醫學提供一種新型理想的種子細胞。以后將為因卵巢功能衰竭或卵巢結構缺如致不孕患者提供卵巢再生的機會。
多能干細胞分化為雌性生殖細胞所面臨的挑戰：① 卵母細胞獲得率低且具有隨機性。由于對生殖細胞分化過程和啟動性別定向分化的機制及其所需的微環境不明確，目前尚無提高其分化效率以實現規模化生產的有效、穩定、統一的誘導方案。② 體外卵母細胞成熟障礙。有研究報道人多能干細胞能分化為單倍體雌性生殖細胞，但所產生的單倍體雌性生殖細胞既不像卵母細胞也不具有受精能力，即具有體外卵母細胞成熟障礙的問題[20]。在輔助生殖技術中也同樣存在體外卵母細胞成熟障礙，對此體外卵母細胞成熟技術（IVM）逐步得以研究，并認為IVM沒有基于促性腺激素刺激的體外受精（IVF）的卵巢過度刺激的弊端且可進入卵母細胞體內發育過程中的自然周期，將來有望取代IVF。1998，Goud等[21]研究表皮生長因子及顆粒細胞對卵細胞核及卵細胞質成熟的作用，他們發現表皮生長因子對無顆粒細胞的卵細胞及有顆粒細胞的卵細胞的成熟均有作用；而顆粒細胞的存在有助于細胞質的成熟，提高受精后的卵裂率。Hayashi等[22]報道鼠干細胞能在體內外分化為OLC，并且能與精子完成受精過程，產生正常后代。此成果能否應用于人干細胞的分化，仍需進一步研究。但此次突破表明干細胞具有向成年機體所有細胞分化的能力，同時為由于醫療干預、毒物接觸或卵巢早衰而致不孕患者通過iPSC獲得新的有功能的卵母細胞開辟了另一條途徑。③ PGC與ESC的關系。如前述，PGC與ESC具有相似的標志物表達譜，使得ESC與應用ESC分化產生的生殖細胞難以鑒別和分離。明確以及選擇合適的特異性標志基因有助于間接了解體外生殖細胞的分化進程。④ 成體干細胞與生殖干細胞之間的關系目前尚未探討清楚。⑤ 質疑生殖干細胞的存在。多個研究證實在哺乳動物的卵巢中發現潛在的生殖干細胞[23]，但仍然不確定這些細胞在生理條件下的卵巢中是否存在及其功能狀態是否正常。并且，之前表明有PGC的研究中只是應用免疫熒光學證實有PGC的存在，但未觀察到PGC進行減數分裂以及分化成卵細胞[24]。證明卵巢中存在PGC不同研究本身存在爭論，比如對Ddx4的表達，一些實驗中僅研究卵細胞但不研究生殖干細胞，因為表達細胞質標志物Ddx4的卵細胞不能發生有絲分裂，所以結果未發現Ddx4陽性的有絲分裂細胞[25]。Ddx4是存在于細胞質還是細胞表面，分離出生殖系干細胞是否可靠，這些問題使得類似實驗結果不可靠，需后續研究加以明確。
上述各種問題的存在將嚴重影響干細胞在體外分化為雌性生殖細胞，使卵巢功能衰竭或結構缺如導致不孕患者卵巢再生的機會渺茫，嚴重阻礙臨床恢復卵巢生殖功能及內分泌功能的進程。相信隨著時代的進步和科學技術的發展，這些問題最終會被解決，干細胞體外分化為雌性生殖細胞的深入研究必將促進人類發育學的發展，為不同原因導致不孕患者帶來新的希望。
5 結語
不孕不育發病率逐年增加，雖然輔助生殖技術的應用使不孕婦女妊娠成為可能，但無法從根本上解決卵巢功能或結構缺失患者的生育問題。已有研究發現mESC在體外誘導出OLC，并在培養基中檢測到雌二醇的生成。但在人卵巢上皮細胞轉分化為雌性生殖細胞的研究還存在很多問題，目前關于這方面的研究報道尚不多并且有一定的爭議。因此，解決婦女因卵巢功能或結構確實所致的不孕，有待更多更全面深入的研究。