引用本文： 何小艷, 成永蓮, 李慧, 徐培, 吳寧. 乳腺癌雌激素受體、孕激素受體、Ki-67 表達與淋巴結轉移的相關性研究. 華西醫學, 2017, 32(2): 226-228. doi: 10.7507/1002-0179.201505173 復制
乳腺癌是常見的惡性腫瘤之一，位居中國女性所有腫瘤發病率之首，近年來該病的發生率呈逐年升高趨勢。目前，大多數患者通過手術的綜合治療后預后良好，但仍有部分患者預后較差。乳腺癌淋巴結轉移和一些分子如雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）及細胞核增殖抗原 Ki-67 的表達情況同預后有密切關系。檢測患者的 ER、PR 及 Ki-67 的意義主要是判斷預后、指導其內分泌治療及化學治療等。本研究對我院 2010 年 1 月—2014 年 12 月收治的 593 例原發性乳腺癌患者采用免疫組織化學方法對其 ER、PR 和 Ki-67 的表達進行檢測，并與淋巴結轉移情況進行比較分析，探討這些分子表達與淋巴結轉移的相關性。現報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
本研究采用回顧性研究方法，選取德陽市人民醫院 2010 年 1 月—2014 年 12 月期間收治的 593 例行乳腺癌根治術或改良根治術，同時行淋巴結清掃術，術后病理組織學檢查證實為原發性乳腺癌的患者。所有患者均常規行免疫組織化學檢測 ER、PR、Ki-67 表達。男 7 例，女 586 例；年齡 22～90 歲，平均 48.3 歲；組織學分類：浸潤性導管癌 497 例，浸潤性小葉癌 14 例，黏液癌 14 例，導管內癌 44 例，化生性癌 8 例，其他類型 16 例。
1.2 免疫組織化學方法
采用 Envison 法，嚴格按操作說明進行，抗原修復方法為高壓鍋煮沸法，所有一抗由北京中杉金橋公司提供，二抗由丹麥 DAKO 公司提供。ER、PR、Ki-67 均定位于細胞核。
1.3 觀察指標
分別觀察 ER、PR 和 Ki-67 在乳腺癌細胞中的表達情況及淋巴結轉移情況。陽性細胞判斷標準為細胞核呈現棕褐色或棕黃色顆粒。① 陽性細胞百分比為陽性細胞占所有腫瘤細胞的比例。② ER、PR 半定量分級判定標準[1-2]：強陽性（+++）：陽性細胞數量>50%；陽性（++）：陽性細胞數量在 26%～50%；弱陽性（+）：陽性細胞數量在 1%～25%；陰性（–）：陽性細胞數量<1%。③ Ki-67 判定標準：依據乳腺癌國際專家組將 Ki-67 指數 14% 為分界點分為兩組[3]，Ki-67 指數≤14% 為低表達組，>14% 為高表達組。
1.4 統計學方法
采用 SPSS 13.0 軟件進行數據處理。計數資料的比較采用 χ2 檢驗，等級資料相關分析采用 Spearman 相關。檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 淋巴結轉移
593 例患者中有淋巴結轉移者 280 例，轉移率為 47.22%；轉移淋巴結數量 1～3 枚者 147 例（24.78%），4～9 枚者 75 例（12.64%），≥10 枚者 58 例（9.78%）。
2.2 ER、PR 和 Ki-67 表達
593 例乳腺癌患者中 ER 陽性表達者共 396 例，陽性表達率為 66.78%，其中弱陽性（+）16 例（2.70%），陽性（++）30 例（5.06%），強陽性（+++）350 例（59.02%）；PR 陽性表達者共 334 例，陽性表達率為 56.32%，其中弱陽性（+）34 例（5.73%），陽性（++）54 例（9.11%），強陽性（+++）246 例（41.48%）；Ki-67 指數>14% 者 420 例（70.82%）。
2.3 ER、PR 和 Ki-67 表達與淋巴結轉移的相關性
ER 表達陰性組淋巴結轉移率為 37.56%，ER 表達陽性組淋巴結轉移率為 52.02%，ER 表達陽性組與陰性組淋巴結轉移率差異有統計學意義（χ2=11.032，P=0.001），且 ER 表達陽性程度與轉移淋巴結數量呈正相關（rs=0.135，P=0.001）；PR 表達陰性組淋巴結轉移率為 44.79%，PR 表達陽性組淋巴結轉移率為 49.10%，PR 表達陽性組與陰性組淋巴結轉移率差異無統計學意義（χ2=1.089，P=0.297）；Ki-67 表達≤14% 組淋巴結轉移率為 46.24%，Ki-67 表達>14% 組淋巴結轉移率為 47.62%，Ki-67 低表達組與高表達組淋巴結轉移率差異無統計學意義（χ2=0.093，P=0.760）。見表 1。
表1
ER、PR 和 Ki-67 與淋巴結轉移相關性（n=593，例）
3 討論
3.1 ER、PR 與淋巴結轉移
乳腺癌預后的傳統判斷指標有臨床分期、腫瘤大小、淋巴結轉移、組織分類及分級等。其中淋巴結轉移是公認的預后不良指標，淋巴結出現轉移或者轉移數目越多，乳腺癌的分期越晚，患者的預后越差。ER、PR 在正常乳腺上皮細胞核內與乳腺癌細胞中均有表達。對于 ER、PR 表達陽性者，予以內分泌治療可減少復發轉移，從而提高患者的生存率。目前，淋巴結轉移與 ER、PR 之間有無相關性研究意見尚不統一，國內外許多報道顯示淋巴結轉移可能與 ER、PR 表達存在相關性[4-5]，但也有報道顯示淋巴結轉移與 ER、PR 表達無直接相關性[6]。本組資料將 ER、PR 表達≥1% 定為陽性表達，顯示 ER 和 PR 陽性表達率分別為 66.78%、56.32%，與文獻報道[7-8]基本一致。ER 表達與淋巴結轉移有一定的相關性（P<0.05），而 PR 與淋巴結轉移無相關性（P>0.05），分析原因可能有：① ER、PR 劃分標準不一，將 ER、PR 的陽性標準定為≥1%、≥10% 或 15%[1, 9]的均有，本研究依據 2010 年美國臨床腫瘤學會和美國病理醫師學院聯合制定并發布的乳腺癌 ER 和 PR 免疫組織化學檢測指南，將陽性細胞數量≥1% 定為陽性表達；② 由于實驗誤差等導致，因此完善實驗室質量控制標準，準確檢測 ER、PR 的表達情況是分析其與淋巴結轉移有無相關性的質量保證。
3.2 Ki-67 與淋巴結轉移
Ki-67 抗原是一種與細胞增殖周期有關、參與 DNA 合成的蛋白質，其表達可反映腫瘤的細胞增殖活性，與惡性腫瘤的發展、轉移和預后高度相關[10]。因此，Ki-67 可用以判斷乳腺癌的預后及指導治療。本組資料依據乳腺癌國際專家組將 Ki-67 指數 14% 用于 Luminal 型乳腺癌分型的建議[3]，選擇 Ki-67 指數 14% 為分界點，Ki-67 指數>14% 者 420 例，陽性率為 70.82%，Bhatavdekar 等[11]報道陽性率為78%，李寶江等[12]報道陽性率為 74.8%，本組資料陽性率略低，可能與 Ki-67 的分界標準有關。Ki-67 與淋巴結轉移之間有無相關性，目前意見尚不統一[13-15]。本組資料顯示，轉移淋巴結數量在 Ki-67>14% 組和 Ki-67≤14% 組之間差異無統計學意義，Ki-67 表達與淋巴結轉移不存在相關性（P>0.05），進一步提示淋巴結轉移與腫瘤細胞增殖速度可能不存在相關性，兩者是相互獨立的乳腺癌預后因素。
綜上所述，本研究通過免疫組織化學法檢測乳腺癌 ER、PR 及 Ki-67 的表達情況，并分析其與淋巴結轉移的相關性，其中 ER 與淋巴結轉移有相關性，PR 及 Ki-67 與淋巴結轉移無相關性。通過檢測 ER、PR 及 Ki-67 的蛋白表達情況對預測乳腺癌的生物學行為有一定作用，同時做好免疫組織化學檢測室內質量控制是保證檢測結果準確性的根本保證。
乳腺癌是常見的惡性腫瘤之一，位居中國女性所有腫瘤發病率之首，近年來該病的發生率呈逐年升高趨勢。目前，大多數患者通過手術的綜合治療后預后良好，但仍有部分患者預后較差。乳腺癌淋巴結轉移和一些分子如雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）及細胞核增殖抗原 Ki-67 的表達情況同預后有密切關系。檢測患者的 ER、PR 及 Ki-67 的意義主要是判斷預后、指導其內分泌治療及化學治療等。本研究對我院 2010 年 1 月—2014 年 12 月收治的 593 例原發性乳腺癌患者采用免疫組織化學方法對其 ER、PR 和 Ki-67 的表達進行檢測，并與淋巴結轉移情況進行比較分析，探討這些分子表達與淋巴結轉移的相關性。現報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
本研究采用回顧性研究方法，選取德陽市人民醫院 2010 年 1 月—2014 年 12 月期間收治的 593 例行乳腺癌根治術或改良根治術，同時行淋巴結清掃術，術后病理組織學檢查證實為原發性乳腺癌的患者。所有患者均常規行免疫組織化學檢測 ER、PR、Ki-67 表達。男 7 例，女 586 例；年齡 22～90 歲，平均 48.3 歲；組織學分類：浸潤性導管癌 497 例，浸潤性小葉癌 14 例，黏液癌 14 例，導管內癌 44 例，化生性癌 8 例，其他類型 16 例。
1.2 免疫組織化學方法
采用 Envison 法，嚴格按操作說明進行，抗原修復方法為高壓鍋煮沸法，所有一抗由北京中杉金橋公司提供，二抗由丹麥 DAKO 公司提供。ER、PR、Ki-67 均定位于細胞核。
1.3 觀察指標
分別觀察 ER、PR 和 Ki-67 在乳腺癌細胞中的表達情況及淋巴結轉移情況。陽性細胞判斷標準為細胞核呈現棕褐色或棕黃色顆粒。① 陽性細胞百分比為陽性細胞占所有腫瘤細胞的比例。② ER、PR 半定量分級判定標準[1-2]：強陽性（+++）：陽性細胞數量>50%；陽性（++）：陽性細胞數量在 26%～50%；弱陽性（+）：陽性細胞數量在 1%～25%；陰性（–）：陽性細胞數量<1%。③ Ki-67 判定標準：依據乳腺癌國際專家組將 Ki-67 指數 14% 為分界點分為兩組[3]，Ki-67 指數≤14% 為低表達組，>14% 為高表達組。
1.4 統計學方法
采用 SPSS 13.0 軟件進行數據處理。計數資料的比較采用 χ2 檢驗，等級資料相關分析采用 Spearman 相關。檢驗水準 α=0.05。
2 結果
2.1 淋巴結轉移
593 例患者中有淋巴結轉移者 280 例，轉移率為 47.22%；轉移淋巴結數量 1～3 枚者 147 例（24.78%），4～9 枚者 75 例（12.64%），≥10 枚者 58 例（9.78%）。
2.2 ER、PR 和 Ki-67 表達
593 例乳腺癌患者中 ER 陽性表達者共 396 例，陽性表達率為 66.78%，其中弱陽性（+）16 例（2.70%），陽性（++）30 例（5.06%），強陽性（+++）350 例（59.02%）；PR 陽性表達者共 334 例，陽性表達率為 56.32%，其中弱陽性（+）34 例（5.73%），陽性（++）54 例（9.11%），強陽性（+++）246 例（41.48%）；Ki-67 指數>14% 者 420 例（70.82%）。
2.3 ER、PR 和 Ki-67 表達與淋巴結轉移的相關性
ER 表達陰性組淋巴結轉移率為 37.56%，ER 表達陽性組淋巴結轉移率為 52.02%，ER 表達陽性組與陰性組淋巴結轉移率差異有統計學意義（χ2=11.032，P=0.001），且 ER 表達陽性程度與轉移淋巴結數量呈正相關（rs=0.135，P=0.001）；PR 表達陰性組淋巴結轉移率為 44.79%，PR 表達陽性組淋巴結轉移率為 49.10%，PR 表達陽性組與陰性組淋巴結轉移率差異無統計學意義（χ2=1.089，P=0.297）；Ki-67 表達≤14% 組淋巴結轉移率為 46.24%，Ki-67 表達>14% 組淋巴結轉移率為 47.62%，Ki-67 低表達組與高表達組淋巴結轉移率差異無統計學意義（χ2=0.093，P=0.760）。見表 1。
表1
ER、PR 和 Ki-67 與淋巴結轉移相關性（n=593，例）
3 討論
3.1 ER、PR 與淋巴結轉移
乳腺癌預后的傳統判斷指標有臨床分期、腫瘤大小、淋巴結轉移、組織分類及分級等。其中淋巴結轉移是公認的預后不良指標，淋巴結出現轉移或者轉移數目越多，乳腺癌的分期越晚，患者的預后越差。ER、PR 在正常乳腺上皮細胞核內與乳腺癌細胞中均有表達。對于 ER、PR 表達陽性者，予以內分泌治療可減少復發轉移，從而提高患者的生存率。目前，淋巴結轉移與 ER、PR 之間有無相關性研究意見尚不統一，國內外許多報道顯示淋巴結轉移可能與 ER、PR 表達存在相關性[4-5]，但也有報道顯示淋巴結轉移與 ER、PR 表達無直接相關性[6]。本組資料將 ER、PR 表達≥1% 定為陽性表達，顯示 ER 和 PR 陽性表達率分別為 66.78%、56.32%，與文獻報道[7-8]基本一致。ER 表達與淋巴結轉移有一定的相關性（P<0.05），而 PR 與淋巴結轉移無相關性（P>0.05），分析原因可能有：① ER、PR 劃分標準不一，將 ER、PR 的陽性標準定為≥1%、≥10% 或 15%[1, 9]的均有，本研究依據 2010 年美國臨床腫瘤學會和美國病理醫師學院聯合制定并發布的乳腺癌 ER 和 PR 免疫組織化學檢測指南，將陽性細胞數量≥1% 定為陽性表達；② 由于實驗誤差等導致，因此完善實驗室質量控制標準，準確檢測 ER、PR 的表達情況是分析其與淋巴結轉移有無相關性的質量保證。
3.2 Ki-67 與淋巴結轉移
Ki-67 抗原是一種與細胞增殖周期有關、參與 DNA 合成的蛋白質，其表達可反映腫瘤的細胞增殖活性，與惡性腫瘤的發展、轉移和預后高度相關[10]。因此，Ki-67 可用以判斷乳腺癌的預后及指導治療。本組資料依據乳腺癌國際專家組將 Ki-67 指數 14% 用于 Luminal 型乳腺癌分型的建議[3]，選擇 Ki-67 指數 14% 為分界點，Ki-67 指數>14% 者 420 例，陽性率為 70.82%，Bhatavdekar 等[11]報道陽性率為78%，李寶江等[12]報道陽性率為 74.8%，本組資料陽性率略低，可能與 Ki-67 的分界標準有關。Ki-67 與淋巴結轉移之間有無相關性，目前意見尚不統一[13-15]。本組資料顯示，轉移淋巴結數量在 Ki-67>14% 組和 Ki-67≤14% 組之間差異無統計學意義，Ki-67 表達與淋巴結轉移不存在相關性（P>0.05），進一步提示淋巴結轉移與腫瘤細胞增殖速度可能不存在相關性，兩者是相互獨立的乳腺癌預后因素。
綜上所述，本研究通過免疫組織化學法檢測乳腺癌 ER、PR 及 Ki-67 的表達情況，并分析其與淋巴結轉移的相關性，其中 ER 與淋巴結轉移有相關性，PR 及 Ki-67 與淋巴結轉移無相關性。通過檢測 ER、PR 及 Ki-67 的蛋白表達情況對預測乳腺癌的生物學行為有一定作用，同時做好免疫組織化學檢測室內質量控制是保證檢測結果準確性的根本保證。
