引用本文： 滕達, 楊沫, 彭春霞, 周歡粉, 劉洪娟, 宋宏魯, 孫明明, 徐全剛, 魏世輝. Leber遺傳性視神經病變患者外顯率和視網膜神經纖維層及黃斑厚度觀察. 中華眼底病雜志, 2019, 35(3): 235-241. doi: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2019.03.005 復制
Leber遺傳性視神經病變（LHON）是由線粒體DNA突變所致的致盲性遺傳性視神經疾病，呈母系遺傳[1]；顯著特點是其不完全外顯率，只有當個體攜帶致病性線粒體DNA突變位點時才有可能發展為LHON，其中約50%的男性和90%的女性不會出現視力下降[2]。目前對于LHON外顯率的研究多基于少數家系的研究且年代多較早[3-4]；國內關于LHON外顯率的大樣本量研究較為缺乏。LHON患者中，95%的患者由11778G、3460G、14484A等3個原發致病突變中之一所致[1, 5]。其中，11778G突變患者其視力損傷程度較其他位點突變者更重；14484C具有自發緩解傾向，視力損傷程度較其他這突變位點輕[1, 6]。組織學研究證實，LHON主要影響RGC和視神經功能，對光感受器細胞和RPE細胞無影響[7]。LHON的RGC損害主要位于乳斑束（PMB）中央的小口徑纖維，其周邊部的大口徑纖維損害較低。而在視盤RNFL，尤其是篩板前部無髓鞘包裹的神經纖維，是對線粒體供能需求最高的部分[1]。國內外關于LHON患者RNFL和黃斑區節細胞復合體（GCC）改變多數局限于11778突變位點，其他突變位點患者觀察較少。為此，本研究對一組LHON不同位點突變患者的視盤RNFL及黃斑區GCC、內界膜（ILM）-RPE層進行了定量分析。現將結果報道如下。
1 對象和方法
橫斷面觀察性研究，研究遵循赫爾辛基宣言，所有受試者和未成年患者監護人均簽署知情同意書。2015年至2017年于解放軍總醫院第一醫學中心眼科檢查確診的LHON患者88例及其母系親屬1492人（基因攜帶者）納入研究。患者分別來自88個無血緣關系家系。其中，男性69例，女性13例。發病年齡4～50歲，平均發病年齡（17.79±8.58）歲。母系親屬1492人中，男性694人，女性798人。
LHON納入標準：（1）線粒體DNA檢測結果顯示存在包括m.11778G＞A、m.14484T＞C、m.3460G＞A等3種常見原發突變及m.3733G＞A、m.3736G＞A、m.11696A＞G、m.14502T＞C、m.13513G＞A等罕見位點中1個或多個位點發生突變；（2）臨床表現為單眼或雙眼急性、漸進性中心視力下降，色覺改變及盲中心暗點，或眼底表現為視神經萎縮；（3）行BCVA、裂隙燈顯微鏡、眼壓、眼底、視野、OCT、VEP等眼科檢查[8-9]。排除標準：（1）屈光及屈光間質異常因素；（2）其他因素所致視神經萎縮如顱內病變、炎癥性、缺血性、中毒性、外傷性，青光眼等。高度疑似患者定義為有明確LHON家族史且包括先證者在內至少2人線粒體 DNA檢測結果為陽性；眼科檢查或家系病史詢問中發現患者有與LHON臨床表現相同的病史。排除其他影響視功能的因素。
詳細收集患者及母系親屬成員性別、年齡、患病與否等基本信息。行BCVA、裂隙燈顯微鏡、眼底、視敏度、OCT檢查117人，其中LHON患者82例，未發病基因攜帶者35人。BCVA檢查采用Snellen視力表，記錄時換算為logMAR視力。
抽取先證者88人及母系親屬成員98人外周靜脈血5～10 ml，提取全基因組DNA。先證者應用二代測序檢測全線粒體基因，母系親屬成員經一代測序驗證。通過分析明確與LHON相關線粒體基因突變位點。外顯率=3代內先證者和高度疑似患者/所有突變基因攜帶者×100%。
采用德國Carl Zeiss公司Cirrus HD-OCT儀行雙眼視盤和黃斑區掃描，統計時僅納入先發眼。受檢眼自然瞳孔下按照標準方法進行檢查。視盤RNFL厚度測量：選擇視盤掃描模式，掃描范圍6 mm×6 mm。以視盤為中心，3.4 mm直徑進行環形掃描，單次掃描時間1.92 s；每次環形掃描的A掃描為256點，掃描深度2 mm。包括視盤上方（S）、鼻側（N）、下方（I）、顳側（T）以及平均RNFL厚度。黃斑區ILM-RPE層、GCC厚度測量：選擇以黃斑中心凹為中心512×128視盤Cube掃描模式，掃描范圍6 mm×6 mm，自動獲得該掃描范圍內ILM-RPE、GCC厚度。GCC厚度定義為從內界膜到內叢狀層邊界之間的所有黃斑各層的總平均厚度。根據ETDRS分區將黃斑中心凹6 mm范圍內視網膜劃分為以黃斑中心凹為中心的3個同心圓，分別是直徑為1 mm的中心區, 1～3 mm的內環區，3～6 mm的外環區，在內外環分別有2條放射線將其分為上下左右4區，共9個區。內環4區分別為上方（IS）、下方（II）、鼻側（IN）、顳側（IT）；外環4區分別上方（OS）、下方（OI）、鼻側（ON）、顳側（OT）。
82例患者中，接受隨訪81例。隨訪時間0～424個月，平均隨訪時間（50.02±86.27）個月。根據發病時間，將患者分為≤3、4～6、7～12、＞12個月組，分別為23、16、7、35例。對比觀察不同發病時間、不同位點突變患者與未發病基因攜帶者視盤RNFL、黃斑區GCC和ILM-RNFL厚度。
采用SPSS22.0軟件行統計學分析。數值型變量以均數±標準差（
）表示，方差齊性檢驗采用Levene’s檢驗；不同發病時間、不同位點突變患者與未發病基因攜帶者視網膜OCT參數的比較分別采用方差分析、協方差分析，以去除發病時間對統計結果的影響；分類變量以百分率表示，多組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。
2 結果
母系親屬1492人中，11778、14484及罕見位點突變分別為1149、161、182人。確診LHON或臨床表現高度疑似患者285例（外顯率19.10%），其中男性190例（外顯率27.38%），女性95例（外顯率11.90%）；未發病基因攜帶者1207人，其中男性504人，女性703人。
88個家系中，11778突變位點64個；14484突變位點12個，其中1個家系為包含14484突變位點的多位點突變（14484和14502）；罕見突變位點（3460、3733、3736、11696、14502、13513）12個。無明確家族遺傳疾病史，單一先證者家系28個，有明確遺傳疾病史家系60個。285例患者中，11778、14484、罕見突變位點分別為228、33、24例，外顯率分別為19.84%、20.50%、13.19%。男性患者分別為153、20、17例，外顯率分別為28.87%、27.78%、18.48%；女性患者分別為75、13、7例，外顯率分別為12.12%、14.61%、7.78%。不同位點突變者總外顯率（χ2=4.732）及不同性別者外顯率（χ2=4.263、2.108）比較，差異均無統計學意義（P=0.094、0.110、0.349）。28個單一先證者家系中，男性、女性患者分別為26、2例。
行BCVA、視敏度、OCT檢查的82例患者中，11778、14484、3460、罕見位點突變分別為58、12、5、7例。不同位點突變者之間平均發病年齡比較，差異無統計學意義（P=0.115）（表1）。
表1
不同突變位點LHON患者發病年齡比較（歲，
）
與未發病基因攜帶者比較，發病時間≤3、4～6、7～12、＞12個月組患者視盤RNFL厚度及黃斑區GCC以及除中心區外ILM-RPE層厚度均隨發病時間延長逐漸薄變（P=0.000）（表2～4）。
表2
不同發病時間LHON患者及未發病基因攜帶者視盤RNFL厚度比較（μm，
）
表3
不同發病時間LHON患者及未發病基因攜帶者黃斑區GCC厚度比較（μm，
）
表4
不同發病時間LHON患者及基因攜帶者黃斑區ILM-RPE層厚度比較（μm，
）
罕見位點、14484、11778、3460位點突變患者logMAR BCVA分別為0.60±0.59、1.03±0.45、1.33±0.53、1.13±0.56；BCVA依次降低，差異有統計學意義（H=26.773，P=0.000）。不同位點突變患者視盤RNFL各象限厚度差異無統計學意義（P＞0.05）（表5）。黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度差異均有統計學意義（P＜0.05）。其中，11778、3460位點突變患者黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度最薄，其次為14484位點突變患者；罕見位點突變患者黃斑GCC及ILM-RPE層除中心區外其他各象限厚度最厚（表6，7）。
表5
不同位點突變LHON患者視盤RNFL厚度比較（μm，
）
表6
不同位點突變LHON患者黃斑區GCC厚度比較（μm，
）
表7
不同位點突變LHON患者黃斑區ILM-RPE厚度比較（μm，
）
3 討論
對LHON不完全外顯率造成影響的因素包括核基因調控、不同線粒體單倍體、線粒體異質性、環境因素（煙草與酒精）[10-12]及年齡。既往文獻報道，只有當個體攜帶致病性線粒體DNA突變位點時才有可能發展為LHON，其中約50%的男性和90%的女性不會出現視力下降[2]。不同位點之間外顯率會有差異，相同位點也會因不同家系甚至相同家系的不同分支而出現外顯率的不同[4]。國外LHON外顯率報告顯示，英國及加拿大常見位點男性、女性的外顯率為11778（51%、9%）[3]、14484（47%、8%）[13]、3460（49%、28%）[3]。國內張清炯等[14]報道16個11778家系共130人，外顯率為33.1%，男性、女性外顯率分別為52.3%、13.8%。本研究結果與以上結果差異較大，總外顯率及男性外顯率明顯較低。其原因一方面可能是由于存在年齡偏差，本研究因家系眾多，未考慮10歲以下未發病突變基因攜帶者潛在的外顯風險，導致其外顯率偏低；另一方面，以上研究不超過20個家系，普遍較少，且統計年代較早，檢測手段存在一定限制。近年Khan等[4]報道印度64個LHON 11 778位點突變家系543名成員的研究結果，其總外顯率為27.07%，男性、女性外顯率分別為37.9%、13.7%，與本研究結果類似。
LHON多于青年時期出現雙眼同時或先后無痛性視力下降。文獻報道，11778位點突變的LHON患者發病年齡中位數為22歲[12]，14484位點突變發病年齡中位數為20歲[14]，高于本研究的（17.78±8.59）歲，說明國內LHON患者更多見于青春期發病。文獻報道，視力自發恢復在14484位點突變的LHON患者中最為常見，恢復率約為37%～58%[4, 15]；而3460位點突變患者視功能恢復最差，11778位點突變患者恢復率約為4%～25%[16]。本研究結果顯示，11778和3460位點突變患者視力較14484位點和罕見位點突變患者更差。因本研究14484及3460位點突變患者數量較11778位點突變患者少，未能有效觀察各位點突變患者視力的恢復率。今后尚需進行臨床大樣本量觀察以得到更準確的數據。
組織學研究證實，LHON主要影響RGC和視神經功能，對光感受器細胞和RPE細胞無有影響[7]。視網膜中50%的RGC位于黃斑部[17]，LHON的RGC損害主要位于PMB中央的小口徑纖維，其周邊部的大口徑纖維損害較低。而在視盤RNFL，尤其是篩板前部無髓鞘包裹的神經纖維，是對線粒體供能需求最高的部分[1]。因此，為本研究通過OCT分析LHON患者RNFL層和GCC層以評估病理變化提供了依據。
LHON患者通常在發病初期（數周至數月）表現為急性或亞急性視力下降，前3個月內視力都處于變化狀態中；發病1年后，患者視力、視野及OCT等各項指標均達到平穩期，處于“視神經萎縮”狀態；發病4～12個月期間，雖然患者視力一般不再發生變化，但視野、OCT等臨床指標都會隨時間推移處于動態變化中[18]。因此本研究觀察并分析了發病時間≤3、4～6、7～12、＞12個月對LHON患者及未發病基因攜帶者視盤RNFL厚度、GCC以及除黃斑中心區外ILM-RPE層厚度的影響。結果顯示，除黃斑中心區外，視盤RNFL和黃斑區GCC、ILM-RPE層各象限厚度，隨發病時間延長厚度呈逐漸變薄，與之前急性期后視力穩定但視網膜超微結構仍處于變化狀態的觀點相一致，也為藥物干預時間窗的延長提供了依據。
對不同位點突變患者黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度分析發現，不同位點突變患者視盤RNFL各象限厚度無明顯差，但不同位點突變患者黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度存在顯著差異。結果說明黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度變化較視盤RNFL在鑒別不同位點突變LHON患者方面更有意義。
本研究存在以下不足：由于家系較多，對未達到發病高危年齡的家系成員未進行排除或隨訪，LHON外顯率結果可能存在一定偏倚；僅對患者及家系成員行線粒體基因檢測，未行線粒體同質性比例分析，未能獲知同質性對LHON外顯率的影響；除11778突變家系外其他各位點家系相對較少，有待繼續收錄后進行分析。
Leber遺傳性視神經病變（LHON）是由線粒體DNA突變所致的致盲性遺傳性視神經疾病，呈母系遺傳[1]；顯著特點是其不完全外顯率，只有當個體攜帶致病性線粒體DNA突變位點時才有可能發展為LHON，其中約50%的男性和90%的女性不會出現視力下降[2]。目前對于LHON外顯率的研究多基于少數家系的研究且年代多較早[3-4]；國內關于LHON外顯率的大樣本量研究較為缺乏。LHON患者中，95%的患者由11778G、3460G、14484A等3個原發致病突變中之一所致[1, 5]。其中，11778G突變患者其視力損傷程度較其他位點突變者更重；14484C具有自發緩解傾向，視力損傷程度較其他這突變位點輕[1, 6]。組織學研究證實，LHON主要影響RGC和視神經功能，對光感受器細胞和RPE細胞無影響[7]。LHON的RGC損害主要位于乳斑束（PMB）中央的小口徑纖維，其周邊部的大口徑纖維損害較低。而在視盤RNFL，尤其是篩板前部無髓鞘包裹的神經纖維，是對線粒體供能需求最高的部分[1]。國內外關于LHON患者RNFL和黃斑區節細胞復合體（GCC）改變多數局限于11778突變位點，其他突變位點患者觀察較少。為此，本研究對一組LHON不同位點突變患者的視盤RNFL及黃斑區GCC、內界膜（ILM）-RPE層進行了定量分析。現將結果報道如下。
1 對象和方法
橫斷面觀察性研究，研究遵循赫爾辛基宣言，所有受試者和未成年患者監護人均簽署知情同意書。2015年至2017年于解放軍總醫院第一醫學中心眼科檢查確診的LHON患者88例及其母系親屬1492人（基因攜帶者）納入研究。患者分別來自88個無血緣關系家系。其中，男性69例，女性13例。發病年齡4～50歲，平均發病年齡（17.79±8.58）歲。母系親屬1492人中，男性694人，女性798人。
LHON納入標準：（1）線粒體DNA檢測結果顯示存在包括m.11778G＞A、m.14484T＞C、m.3460G＞A等3種常見原發突變及m.3733G＞A、m.3736G＞A、m.11696A＞G、m.14502T＞C、m.13513G＞A等罕見位點中1個或多個位點發生突變；（2）臨床表現為單眼或雙眼急性、漸進性中心視力下降，色覺改變及盲中心暗點，或眼底表現為視神經萎縮；（3）行BCVA、裂隙燈顯微鏡、眼壓、眼底、視野、OCT、VEP等眼科檢查[8-9]。排除標準：（1）屈光及屈光間質異常因素；（2）其他因素所致視神經萎縮如顱內病變、炎癥性、缺血性、中毒性、外傷性，青光眼等。高度疑似患者定義為有明確LHON家族史且包括先證者在內至少2人線粒體 DNA檢測結果為陽性；眼科檢查或家系病史詢問中發現患者有與LHON臨床表現相同的病史。排除其他影響視功能的因素。
詳細收集患者及母系親屬成員性別、年齡、患病與否等基本信息。行BCVA、裂隙燈顯微鏡、眼底、視敏度、OCT檢查117人，其中LHON患者82例，未發病基因攜帶者35人。BCVA檢查采用Snellen視力表，記錄時換算為logMAR視力。
抽取先證者88人及母系親屬成員98人外周靜脈血5～10 ml，提取全基因組DNA。先證者應用二代測序檢測全線粒體基因，母系親屬成員經一代測序驗證。通過分析明確與LHON相關線粒體基因突變位點。外顯率=3代內先證者和高度疑似患者/所有突變基因攜帶者×100%。
采用德國Carl Zeiss公司Cirrus HD-OCT儀行雙眼視盤和黃斑區掃描，統計時僅納入先發眼。受檢眼自然瞳孔下按照標準方法進行檢查。視盤RNFL厚度測量：選擇視盤掃描模式，掃描范圍6 mm×6 mm。以視盤為中心，3.4 mm直徑進行環形掃描，單次掃描時間1.92 s；每次環形掃描的A掃描為256點，掃描深度2 mm。包括視盤上方（S）、鼻側（N）、下方（I）、顳側（T）以及平均RNFL厚度。黃斑區ILM-RPE層、GCC厚度測量：選擇以黃斑中心凹為中心512×128視盤Cube掃描模式，掃描范圍6 mm×6 mm，自動獲得該掃描范圍內ILM-RPE、GCC厚度。GCC厚度定義為從內界膜到內叢狀層邊界之間的所有黃斑各層的總平均厚度。根據ETDRS分區將黃斑中心凹6 mm范圍內視網膜劃分為以黃斑中心凹為中心的3個同心圓，分別是直徑為1 mm的中心區, 1～3 mm的內環區，3～6 mm的外環區，在內外環分別有2條放射線將其分為上下左右4區，共9個區。內環4區分別為上方（IS）、下方（II）、鼻側（IN）、顳側（IT）；外環4區分別上方（OS）、下方（OI）、鼻側（ON）、顳側（OT）。
82例患者中，接受隨訪81例。隨訪時間0～424個月，平均隨訪時間（50.02±86.27）個月。根據發病時間，將患者分為≤3、4～6、7～12、＞12個月組，分別為23、16、7、35例。對比觀察不同發病時間、不同位點突變患者與未發病基因攜帶者視盤RNFL、黃斑區GCC和ILM-RNFL厚度。
采用SPSS22.0軟件行統計學分析。數值型變量以均數±標準差（）表示，方差齊性檢驗采用Levene’s檢驗；不同發病時間、不同位點突變患者與未發病基因攜帶者視網膜OCT參數的比較分別采用方差分析、協方差分析，以去除發病時間對統計結果的影響；分類變量以百分率表示，多組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。
2 結果
母系親屬1492人中，11778、14484及罕見位點突變分別為1149、161、182人。確診LHON或臨床表現高度疑似患者285例（外顯率19.10%），其中男性190例（外顯率27.38%），女性95例（外顯率11.90%）；未發病基因攜帶者1207人，其中男性504人，女性703人。
88個家系中，11778突變位點64個；14484突變位點12個，其中1個家系為包含14484突變位點的多位點突變（14484和14502）；罕見突變位點（3460、3733、3736、11696、14502、13513）12個。無明確家族遺傳疾病史，單一先證者家系28個，有明確遺傳疾病史家系60個。285例患者中，11778、14484、罕見突變位點分別為228、33、24例，外顯率分別為19.84%、20.50%、13.19%。男性患者分別為153、20、17例，外顯率分別為28.87%、27.78%、18.48%；女性患者分別為75、13、7例，外顯率分別為12.12%、14.61%、7.78%。不同位點突變者總外顯率（χ2=4.732）及不同性別者外顯率（χ2=4.263、2.108）比較，差異均無統計學意義（P=0.094、0.110、0.349）。28個單一先證者家系中，男性、女性患者分別為26、2例。
行BCVA、視敏度、OCT檢查的82例患者中，11778、14484、3460、罕見位點突變分別為58、12、5、7例。不同位點突變者之間平均發病年齡比較，差異無統計學意義（P=0.115）（表1）。
表1
不同突變位點LHON患者發病年齡比較（歲，）
與未發病基因攜帶者比較，發病時間≤3、4～6、7～12、＞12個月組患者視盤RNFL厚度及黃斑區GCC以及除中心區外ILM-RPE層厚度均隨發病時間延長逐漸薄變（P=0.000）（表2～4）。
表2
不同發病時間LHON患者及未發病基因攜帶者視盤RNFL厚度比較（μm，）
表3
不同發病時間LHON患者及未發病基因攜帶者黃斑區GCC厚度比較（μm，）
表4
不同發病時間LHON患者及基因攜帶者黃斑區ILM-RPE層厚度比較（μm，）
罕見位點、14484、11778、3460位點突變患者logMAR BCVA分別為0.60±0.59、1.03±0.45、1.33±0.53、1.13±0.56；BCVA依次降低，差異有統計學意義（H=26.773，P=0.000）。不同位點突變患者視盤RNFL各象限厚度差異無統計學意義（P＞0.05）（表5）。黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度差異均有統計學意義（P＜0.05）。其中，11778、3460位點突變患者黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度最薄，其次為14484位點突變患者；罕見位點突變患者黃斑GCC及ILM-RPE層除中心區外其他各象限厚度最厚（表6，7）。
表5
不同位點突變LHON患者視盤RNFL厚度比較（μm，）
表6
不同位點突變LHON患者黃斑區GCC厚度比較（μm，）
表7
不同位點突變LHON患者黃斑區ILM-RPE厚度比較（μm，）
3 討論
對LHON不完全外顯率造成影響的因素包括核基因調控、不同線粒體單倍體、線粒體異質性、環境因素（煙草與酒精）[10-12]及年齡。既往文獻報道，只有當個體攜帶致病性線粒體DNA突變位點時才有可能發展為LHON，其中約50%的男性和90%的女性不會出現視力下降[2]。不同位點之間外顯率會有差異，相同位點也會因不同家系甚至相同家系的不同分支而出現外顯率的不同[4]。國外LHON外顯率報告顯示，英國及加拿大常見位點男性、女性的外顯率為11778（51%、9%）[3]、14484（47%、8%）[13]、3460（49%、28%）[3]。國內張清炯等[14]報道16個11778家系共130人，外顯率為33.1%，男性、女性外顯率分別為52.3%、13.8%。本研究結果與以上結果差異較大，總外顯率及男性外顯率明顯較低。其原因一方面可能是由于存在年齡偏差，本研究因家系眾多，未考慮10歲以下未發病突變基因攜帶者潛在的外顯風險，導致其外顯率偏低；另一方面，以上研究不超過20個家系，普遍較少，且統計年代較早，檢測手段存在一定限制。近年Khan等[4]報道印度64個LHON 11 778位點突變家系543名成員的研究結果，其總外顯率為27.07%，男性、女性外顯率分別為37.9%、13.7%，與本研究結果類似。
LHON多于青年時期出現雙眼同時或先后無痛性視力下降。文獻報道，11778位點突變的LHON患者發病年齡中位數為22歲[12]，14484位點突變發病年齡中位數為20歲[14]，高于本研究的（17.78±8.59）歲，說明國內LHON患者更多見于青春期發病。文獻報道，視力自發恢復在14484位點突變的LHON患者中最為常見，恢復率約為37%～58%[4, 15]；而3460位點突變患者視功能恢復最差，11778位點突變患者恢復率約為4%～25%[16]。本研究結果顯示，11778和3460位點突變患者視力較14484位點和罕見位點突變患者更差。因本研究14484及3460位點突變患者數量較11778位點突變患者少，未能有效觀察各位點突變患者視力的恢復率。今后尚需進行臨床大樣本量觀察以得到更準確的數據。
組織學研究證實，LHON主要影響RGC和視神經功能，對光感受器細胞和RPE細胞無有影響[7]。視網膜中50%的RGC位于黃斑部[17]，LHON的RGC損害主要位于PMB中央的小口徑纖維，其周邊部的大口徑纖維損害較低。而在視盤RNFL，尤其是篩板前部無髓鞘包裹的神經纖維，是對線粒體供能需求最高的部分[1]。因此，為本研究通過OCT分析LHON患者RNFL層和GCC層以評估病理變化提供了依據。
LHON患者通常在發病初期（數周至數月）表現為急性或亞急性視力下降，前3個月內視力都處于變化狀態中；發病1年后，患者視力、視野及OCT等各項指標均達到平穩期，處于“視神經萎縮”狀態；發病4～12個月期間，雖然患者視力一般不再發生變化，但視野、OCT等臨床指標都會隨時間推移處于動態變化中[18]。因此本研究觀察并分析了發病時間≤3、4～6、7～12、＞12個月對LHON患者及未發病基因攜帶者視盤RNFL厚度、GCC以及除黃斑中心區外ILM-RPE層厚度的影響。結果顯示，除黃斑中心區外，視盤RNFL和黃斑區GCC、ILM-RPE層各象限厚度，隨發病時間延長厚度呈逐漸變薄，與之前急性期后視力穩定但視網膜超微結構仍處于變化狀態的觀點相一致，也為藥物干預時間窗的延長提供了依據。
對不同位點突變患者黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度分析發現，不同位點突變患者視盤RNFL各象限厚度無明顯差，但不同位點突變患者黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度存在顯著差異。結果說明黃斑區GCC及ILM-RPE層各象限厚度變化較視盤RNFL在鑒別不同位點突變LHON患者方面更有意義。
本研究存在以下不足：由于家系較多，對未達到發病高危年齡的家系成員未進行排除或隨訪，LHON外顯率結果可能存在一定偏倚；僅對患者及家系成員行線粒體基因檢測，未行線粒體同質性比例分析，未能獲知同質性對LHON外顯率的影響；除11778突變家系外其他各位點家系相對較少，有待繼續收錄后進行分析。
