引用本文: 韓林峰, 柯根杰, 王林, 顧永昊, 顧起宏, 董凱, 劉家佳. 孔源性視網膜脫離合并脈絡膜脫離患眼脈絡膜上腔液成份定量分析. 中華眼底病雜志, 2017, 33(5): 485-489. doi: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2017.05.011 復制
孔源性視網膜脫離(RRD)合并脈絡膜脫離(RRDCD)以嚴重葡萄膜炎、低眼壓為臨床特點。然而,視網膜裂孔形成后繼發脈絡膜脫離時脈絡膜上腔液是由炎癥所致的滲出液,還是低眼壓導致的脈絡膜血管擴張所致的漏出液尚不清楚。有研究表明,脈絡膜上腔液中白蛋白(ALB)、總膽固醇(CHOL)及總膽紅素(TBIL)濃度對鑒定液體性質具有較高的特異性[1-4]。本研究通過檢測上述相關指標,并以鑒定滲出液及漏出液的金標準“Light標準”為標準[5],對一組RRDCD患眼的脈絡膜上腔液性質進行了定性分類。現將結果報道如下。
1 對象和方法
前瞻性臨床研究。患者均獲知情并簽署同意書。隨機抽取2014年1月至2015年6月在安徽省立醫院眼底病中心住院的RRDCD患者(RRDCD組)18例納入研究。其中,男性10例10只眼,占55.56%;女性8例8只眼,占44.44%。右眼8只,占44.44%;左眼10只,占55.56%。年齡25~74歲,平均年齡(55.56±15.01)歲。病程7~143 d,平均病程(40.44±34.70)d。排除標準:(1)嚴重心、肝、肺、腎等臟器功能不全及伴有高血壓、糖尿病者。(2)既往有嚴重眼外傷、眼部手術史者。(3)玻璃體視網膜疾病行藥物或手術治療者。(4)伴有眼部其他嚴重器質性病變或感染性疾病者。(5)復發性視網膜脫離者。(6)嚴重精神疾病者。(7)近期內或手術前有全身和(或)局部使用糖皮質激素者。
所有患眼均行最佳矯正視力(BCVA)、眼壓、裂隙燈顯微鏡90 D前置鏡、間接檢眼鏡、B型超聲、超聲生物顯微鏡(UBM)、光相干斷層掃描(OCT)檢查。檢查結果符合RRDCD診斷標準[6-10]。參照文獻[11-13]標準將年齡分為≤55歲、>55歲;病程分為≤30 d、>30 d。參照文獻[14]標準對PVR進行分級。
患者中,年齡≤55歲者8例,>55歲者10例;病程≤30 d者7例,>30 d者11例。患眼平均BCVA為2.18±0.82。眼壓3~11 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),平均眼壓(6.80±2.01)mmHg。屈光度≥?6.0 D 7只眼,占38.89%;<?6.0 D 11只眼,占61.11%。黃斑裂孔5只眼,占27.78%。PVR C1~C3 11只眼,占61.11%;D1~D3 7只眼,占38.89%。
隨機選取同期10例住院患者作為對照組。均行散瞳眼底檢查及眼底彩色照相、B型超聲檢查,排除葡萄膜炎、視網膜脫離及脈絡膜脫離;其他排除標準同RRDCD組。
參照文獻[15-18]的手術方法并改良進行脈絡膜上腔切開及放液。打開玻璃體腔灌注前在角膜緣后4 mm處做一與角膜緣平行的弧形結膜切口,充分暴露鞏膜表面,必要時燒灼止血,距角膜緣4~6 mm范圍內,UBM檢查提示睫狀體脈絡膜脫離最高點位,25G玻璃體切割針頭沿鞏膜切線方向小心刺透鞏膜,淡黃色或褐色脈絡膜上腔液由切口流出,借助斜視勾或棉簽小心將周圍液體輕輕推擠至切口處排出,1 ml無菌注射器在鞏膜切口周圍抽取流出的脈絡膜上腔液,排除被血液污染的標本。如因眼壓過低,脈絡膜上腔液不能流出,在擬玻璃體切割手術灌注穿刺位,玻璃體腔注入無菌生理鹽水升高眼壓后再行鞏膜外穿刺,按上述同樣方法收集脈絡膜上腔液標本。收集的標本立即置于密閉離心管中,離心半徑13.5 cm,3000 r/min離心10 min,取上清液立即置于?80 ℃冰箱保存。
手術日當日采集RRDCD患者外周靜脈血標本與10份對照組患者外周靜脈血標本乙二胺四乙酸抗凝,4 ℃,靜置4~6 h,離心半徑13.5 cm,3000 r/min離心10 min,移液器抽取上層血清置入無菌離心管中,–80 ℃冰箱保存。
以Light標準和ALB、CHOL、TBIL標準作為鑒定脈絡膜上腔液性質是滲出液或是漏出液標準[1-5]。(1)Light標準:① 液體與血清蛋白含量比值>0.5;② 液體乳酸脫氫酶(LDH)大于血漿LDH正常上限值的2/3;③ 液體與血清LDH的比值>0.6。符合其中任何一項者即可鑒定為滲出液。(2)ALB標準:血清-液體ALB差>12 g/L鑒定為漏出液,反之為滲出液。(3)CHOL標準:液體CHOL>1.32 mmol/L鑒定為滲出液,反之為漏出液。(4)TBIL標準:液體/血清膽紅素比值≥0.5鑒定為滲出液,反之為漏出液。參照文獻[19-22]的方法分別采用微量酶標法、微板法、溴甲酚綠比色法、CHOL測定試劑盒、化學氧化酶標法測定脈絡膜上腔液、外周血中總蛋白(TP)、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度。
采用SPSS13.0統計學軟件進行統計學分析。計量資料以均數±標準差(
)表示;符合正態分布的計量資料行方差齊性檢驗,方差齊行t檢驗,反之則行Mann-Whitney秩和檢驗。計數資料均采用χ2檢驗和(或)Fishers確切概率法。兩組樣本均數之間使用兩獨立樣本均數t檢驗。脈絡膜上腔液滲出性與漏出性鑒定結果比較,以Light標準為基本標準行χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
18份脈絡膜上腔液標本性質鑒定結果,Light標準:滲出液17份,漏出液1份;ALB標準:滲出液14份,漏出液4份;CHOL標準:滲出液18份,漏出液0份;TBIL標準:滲出液16份,漏出液2份(圖1)。Light標準與ALB、CHOL、TBIL標準脈絡膜上腔液滲出性與漏出性鑒定結果比較,差異均無統計學意義(χ2=2.090、1.029、0.364,P>0.05)。

RRDCD組中,年齡≤55、>55歲(t=0.090、0.228、0.362、0.785、0.887)以及不同性別(t=0.559、1.067、1.202、0.739、0.423)、眼別(t=0.556、0.529、0.361、0.623、0.550)、屈光度(t=0.641、1.104、0.926、0.752、0.087)、病程(t=0.768、0.535、1.335、0.820、1.394)、PVR分級(t=0.038、0.793、0.880、0.976、0.078)患眼之間脈絡膜上腔液標本中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度比較,差異均無統計學意義(P>0.05)(圖2)。

RRDCD組、對照組患者血清標本中TP(t=1.940)、LDH(t=0.756)、ALB(t=0.890)、CHOL(t=0.268)、TBIL(t=0.243)濃度比較,差異無統計學意義(P>0.05)(圖3)。

RRDCD組患者血清標本與患眼脈絡膜上腔液標本中ALB(t=0.624)、CHOL(t=2.313)、TBIL(t=0.981)濃度比較,差異無統計學意義(P>0.05);TP(t=5.132)、LDH(t=2.969)濃度比較,差異有統計學意義(P<0.05)(圖4)。

3 討論
目前RRDCD發病機制主要有:(1)炎癥-低眼壓聯合。Jarrett[23]認為RRD導致的葡萄膜炎為RRDCD的初始機制。視網膜裂孔出現導致RRD并刺激脈絡膜、葡萄膜發生炎癥,睫狀體脈絡膜上腔液增多,睫狀體水腫生成的房水減少從而引起低眼壓。(2)玻璃體牽拉-低眼壓-炎癥。視網膜裂孔形成后,由裂孔排除的大量玻璃體導致眼壓下降,液化的玻璃體由視網膜裂孔進入視網膜下,繼發牽拉脈絡膜形成脈絡膜與睫狀體的脫離,脈絡膜局部血液循環障礙,脈絡膜上腔液增多,睫狀體因刺激導致水腫,睫狀體的上皮分泌房水減少,眼壓降低,并進一步引起葡萄膜炎癥反應[24-27]。(3)脈絡膜上腔壓力學說。段安麗等[25]認為眼內壓-脈絡膜上腔壓力>2 mmHg時脈絡膜血管內液體滲入脈絡膜上腔,從而繼發脈絡膜脫離。上述不同發病機制的爭議點在于視網膜裂孔形成后,繼發脈絡膜脫離時所產生的變化是炎癥還是低眼壓。不同的發病機制脈絡膜上腔液性質也不相同。本研究通過檢測脈絡膜上腔液的相關成分并鑒定其性質是滲出液還是漏出液,從而推測RRDCD發病機制可能更傾向于上述哪一種機制。
為了解患者年齡、性別、眼別、屈光度、PVR分級是否對結果存在影響,我們對比觀察了不同年齡、性別、眼別、屈光度和PVR分級患眼脈絡膜上腔液中標本中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度,結果顯示均無統計學意義。RRDCD組、對照組患者血清標本中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度差異亦無統計學意義。我們推測其原因為,RRD發生后繼發脈絡膜脫離時,脈絡膜血管擴張,在局部形成脈絡膜血管的局部性循環障礙,而血視網膜屏障尚具有一定功能,仍可以阻止這些血管滲出物質進入外周血中。RRDCD組患者血清標本與患眼脈絡膜上腔液標本中ALB、CHOL、TBIL濃度差異無統計學意義;TP、LDH濃度差異有統計學意義。其原因可能是由于樣本量較小結果不足以顯示差異。
滲出液及漏出液的鑒定方法近年國內外報道較多,但其金標準仍是Light標準[5]。在Light標準被公認為鑒定滲出液和漏出液后的數十年中,不斷有學者提出新的鑒定方法對該標準進行補充。因此,本研究采用Light標準和ALB、CHOL、TBIL標準作為鑒定脈絡膜上腔液為滲出液還是漏出液的標準,并以Light標準為基本標準與其他標準進行比較,結果顯示差異均無統計學意義。因此我們推測,RRD發生后繼發脈絡膜脫離時,脈絡膜上腔液的增加可能來自于脈絡膜血管的炎性滲出,在RRD形成后首先引起脈絡膜炎癥,脈絡膜血管滲透性增加,液體滲出增多,脈絡膜脫離,脈絡膜局部循環障礙,進而引起低眼壓,最終導致脈絡膜脫離。
我們從RRD視網膜下液研究文獻中得到啟發并根據RRDCD的特點設計了本研究,但仍存在不足,需進一步更科學的試驗設計和研究。(1)樣本量過小。小樣本研究與統計學分析不能代表整體樣本特征。(2)僅分析了脈絡膜上腔液中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL在年齡、性別、眼別、屈光度、病程及PVR分級的差異性。(3)手術中如何更有效、安全的收集脈絡膜上腔液仍是一個需要繼續探討的技術。(4)目前關于滲出液及漏出液的定性分類標準主要集中于胸腔、腹腔、心包積液等研究,這些液體的分類標準是否完全適用于脈絡膜上腔液仍需要進一步研究證實。
孔源性視網膜脫離(RRD)合并脈絡膜脫離(RRDCD)以嚴重葡萄膜炎、低眼壓為臨床特點。然而,視網膜裂孔形成后繼發脈絡膜脫離時脈絡膜上腔液是由炎癥所致的滲出液,還是低眼壓導致的脈絡膜血管擴張所致的漏出液尚不清楚。有研究表明,脈絡膜上腔液中白蛋白(ALB)、總膽固醇(CHOL)及總膽紅素(TBIL)濃度對鑒定液體性質具有較高的特異性[1-4]。本研究通過檢測上述相關指標,并以鑒定滲出液及漏出液的金標準“Light標準”為標準[5],對一組RRDCD患眼的脈絡膜上腔液性質進行了定性分類。現將結果報道如下。
1 對象和方法
前瞻性臨床研究。患者均獲知情并簽署同意書。隨機抽取2014年1月至2015年6月在安徽省立醫院眼底病中心住院的RRDCD患者(RRDCD組)18例納入研究。其中,男性10例10只眼,占55.56%;女性8例8只眼,占44.44%。右眼8只,占44.44%;左眼10只,占55.56%。年齡25~74歲,平均年齡(55.56±15.01)歲。病程7~143 d,平均病程(40.44±34.70)d。排除標準:(1)嚴重心、肝、肺、腎等臟器功能不全及伴有高血壓、糖尿病者。(2)既往有嚴重眼外傷、眼部手術史者。(3)玻璃體視網膜疾病行藥物或手術治療者。(4)伴有眼部其他嚴重器質性病變或感染性疾病者。(5)復發性視網膜脫離者。(6)嚴重精神疾病者。(7)近期內或手術前有全身和(或)局部使用糖皮質激素者。
所有患眼均行最佳矯正視力(BCVA)、眼壓、裂隙燈顯微鏡90 D前置鏡、間接檢眼鏡、B型超聲、超聲生物顯微鏡(UBM)、光相干斷層掃描(OCT)檢查。檢查結果符合RRDCD診斷標準[6-10]。參照文獻[11-13]標準將年齡分為≤55歲、>55歲;病程分為≤30 d、>30 d。參照文獻[14]標準對PVR進行分級。
患者中,年齡≤55歲者8例,>55歲者10例;病程≤30 d者7例,>30 d者11例。患眼平均BCVA為2.18±0.82。眼壓3~11 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),平均眼壓(6.80±2.01)mmHg。屈光度≥?6.0 D 7只眼,占38.89%;<?6.0 D 11只眼,占61.11%。黃斑裂孔5只眼,占27.78%。PVR C1~C3 11只眼,占61.11%;D1~D3 7只眼,占38.89%。
隨機選取同期10例住院患者作為對照組。均行散瞳眼底檢查及眼底彩色照相、B型超聲檢查,排除葡萄膜炎、視網膜脫離及脈絡膜脫離;其他排除標準同RRDCD組。
參照文獻[15-18]的手術方法并改良進行脈絡膜上腔切開及放液。打開玻璃體腔灌注前在角膜緣后4 mm處做一與角膜緣平行的弧形結膜切口,充分暴露鞏膜表面,必要時燒灼止血,距角膜緣4~6 mm范圍內,UBM檢查提示睫狀體脈絡膜脫離最高點位,25G玻璃體切割針頭沿鞏膜切線方向小心刺透鞏膜,淡黃色或褐色脈絡膜上腔液由切口流出,借助斜視勾或棉簽小心將周圍液體輕輕推擠至切口處排出,1 ml無菌注射器在鞏膜切口周圍抽取流出的脈絡膜上腔液,排除被血液污染的標本。如因眼壓過低,脈絡膜上腔液不能流出,在擬玻璃體切割手術灌注穿刺位,玻璃體腔注入無菌生理鹽水升高眼壓后再行鞏膜外穿刺,按上述同樣方法收集脈絡膜上腔液標本。收集的標本立即置于密閉離心管中,離心半徑13.5 cm,3000 r/min離心10 min,取上清液立即置于?80 ℃冰箱保存。
手術日當日采集RRDCD患者外周靜脈血標本與10份對照組患者外周靜脈血標本乙二胺四乙酸抗凝,4 ℃,靜置4~6 h,離心半徑13.5 cm,3000 r/min離心10 min,移液器抽取上層血清置入無菌離心管中,–80 ℃冰箱保存。
以Light標準和ALB、CHOL、TBIL標準作為鑒定脈絡膜上腔液性質是滲出液或是漏出液標準[1-5]。(1)Light標準:① 液體與血清蛋白含量比值>0.5;② 液體乳酸脫氫酶(LDH)大于血漿LDH正常上限值的2/3;③ 液體與血清LDH的比值>0.6。符合其中任何一項者即可鑒定為滲出液。(2)ALB標準:血清-液體ALB差>12 g/L鑒定為漏出液,反之為滲出液。(3)CHOL標準:液體CHOL>1.32 mmol/L鑒定為滲出液,反之為漏出液。(4)TBIL標準:液體/血清膽紅素比值≥0.5鑒定為滲出液,反之為漏出液。參照文獻[19-22]的方法分別采用微量酶標法、微板法、溴甲酚綠比色法、CHOL測定試劑盒、化學氧化酶標法測定脈絡膜上腔液、外周血中總蛋白(TP)、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度。
采用SPSS13.0統計學軟件進行統計學分析。計量資料以均數±標準差(
)表示;符合正態分布的計量資料行方差齊性檢驗,方差齊行t檢驗,反之則行Mann-Whitney秩和檢驗。計數資料均采用χ2檢驗和(或)Fishers確切概率法。兩組樣本均數之間使用兩獨立樣本均數t檢驗。脈絡膜上腔液滲出性與漏出性鑒定結果比較,以Light標準為基本標準行χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
18份脈絡膜上腔液標本性質鑒定結果,Light標準:滲出液17份,漏出液1份;ALB標準:滲出液14份,漏出液4份;CHOL標準:滲出液18份,漏出液0份;TBIL標準:滲出液16份,漏出液2份(圖1)。Light標準與ALB、CHOL、TBIL標準脈絡膜上腔液滲出性與漏出性鑒定結果比較,差異均無統計學意義(χ2=2.090、1.029、0.364,P>0.05)。

RRDCD組中,年齡≤55、>55歲(t=0.090、0.228、0.362、0.785、0.887)以及不同性別(t=0.559、1.067、1.202、0.739、0.423)、眼別(t=0.556、0.529、0.361、0.623、0.550)、屈光度(t=0.641、1.104、0.926、0.752、0.087)、病程(t=0.768、0.535、1.335、0.820、1.394)、PVR分級(t=0.038、0.793、0.880、0.976、0.078)患眼之間脈絡膜上腔液標本中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度比較,差異均無統計學意義(P>0.05)(圖2)。

RRDCD組、對照組患者血清標本中TP(t=1.940)、LDH(t=0.756)、ALB(t=0.890)、CHOL(t=0.268)、TBIL(t=0.243)濃度比較,差異無統計學意義(P>0.05)(圖3)。

RRDCD組患者血清標本與患眼脈絡膜上腔液標本中ALB(t=0.624)、CHOL(t=2.313)、TBIL(t=0.981)濃度比較,差異無統計學意義(P>0.05);TP(t=5.132)、LDH(t=2.969)濃度比較,差異有統計學意義(P<0.05)(圖4)。

3 討論
目前RRDCD發病機制主要有:(1)炎癥-低眼壓聯合。Jarrett[23]認為RRD導致的葡萄膜炎為RRDCD的初始機制。視網膜裂孔出現導致RRD并刺激脈絡膜、葡萄膜發生炎癥,睫狀體脈絡膜上腔液增多,睫狀體水腫生成的房水減少從而引起低眼壓。(2)玻璃體牽拉-低眼壓-炎癥。視網膜裂孔形成后,由裂孔排除的大量玻璃體導致眼壓下降,液化的玻璃體由視網膜裂孔進入視網膜下,繼發牽拉脈絡膜形成脈絡膜與睫狀體的脫離,脈絡膜局部血液循環障礙,脈絡膜上腔液增多,睫狀體因刺激導致水腫,睫狀體的上皮分泌房水減少,眼壓降低,并進一步引起葡萄膜炎癥反應[24-27]。(3)脈絡膜上腔壓力學說。段安麗等[25]認為眼內壓-脈絡膜上腔壓力>2 mmHg時脈絡膜血管內液體滲入脈絡膜上腔,從而繼發脈絡膜脫離。上述不同發病機制的爭議點在于視網膜裂孔形成后,繼發脈絡膜脫離時所產生的變化是炎癥還是低眼壓。不同的發病機制脈絡膜上腔液性質也不相同。本研究通過檢測脈絡膜上腔液的相關成分并鑒定其性質是滲出液還是漏出液,從而推測RRDCD發病機制可能更傾向于上述哪一種機制。
為了解患者年齡、性別、眼別、屈光度、PVR分級是否對結果存在影響,我們對比觀察了不同年齡、性別、眼別、屈光度和PVR分級患眼脈絡膜上腔液中標本中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度,結果顯示均無統計學意義。RRDCD組、對照組患者血清標本中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL濃度差異亦無統計學意義。我們推測其原因為,RRD發生后繼發脈絡膜脫離時,脈絡膜血管擴張,在局部形成脈絡膜血管的局部性循環障礙,而血視網膜屏障尚具有一定功能,仍可以阻止這些血管滲出物質進入外周血中。RRDCD組患者血清標本與患眼脈絡膜上腔液標本中ALB、CHOL、TBIL濃度差異無統計學意義;TP、LDH濃度差異有統計學意義。其原因可能是由于樣本量較小結果不足以顯示差異。
滲出液及漏出液的鑒定方法近年國內外報道較多,但其金標準仍是Light標準[5]。在Light標準被公認為鑒定滲出液和漏出液后的數十年中,不斷有學者提出新的鑒定方法對該標準進行補充。因此,本研究采用Light標準和ALB、CHOL、TBIL標準作為鑒定脈絡膜上腔液為滲出液還是漏出液的標準,并以Light標準為基本標準與其他標準進行比較,結果顯示差異均無統計學意義。因此我們推測,RRD發生后繼發脈絡膜脫離時,脈絡膜上腔液的增加可能來自于脈絡膜血管的炎性滲出,在RRD形成后首先引起脈絡膜炎癥,脈絡膜血管滲透性增加,液體滲出增多,脈絡膜脫離,脈絡膜局部循環障礙,進而引起低眼壓,最終導致脈絡膜脫離。
我們從RRD視網膜下液研究文獻中得到啟發并根據RRDCD的特點設計了本研究,但仍存在不足,需進一步更科學的試驗設計和研究。(1)樣本量過小。小樣本研究與統計學分析不能代表整體樣本特征。(2)僅分析了脈絡膜上腔液中TP、LDH、ALB、CHOL、TBIL在年齡、性別、眼別、屈光度、病程及PVR分級的差異性。(3)手術中如何更有效、安全的收集脈絡膜上腔液仍是一個需要繼續探討的技術。(4)目前關于滲出液及漏出液的定性分類標準主要集中于胸腔、腹腔、心包積液等研究,這些液體的分類標準是否完全適用于脈絡膜上腔液仍需要進一步研究證實。