目的探討microRNA-199b-5p（miR-199b-5p）在尤文肉瘤細胞系中的功能，分析其作用機制，以期為臨床生物學治療提供理論依據。 方法取人尤文肉瘤細胞系A673、TC252，分別以miR-199b-5p寡核苷酸片段（mimic）及其陰性對照（mimic control）轉染，作為實驗組及對照組。實時熒光定量PCR檢測miR-199b-5p mRNA相對表達量，并與MSCs比較；細胞計數試劑盒8法檢測miR-199b-5p對細胞增殖的影響；流式細胞術法檢測對細胞周期及凋亡的影響。雙熒光報告基因實驗初步檢測miR-199b-5p可能作用的靶基因，Western blot驗證靶基因。 結果實時熒光定量PCR檢測示，對照組A673細胞及TC252細胞中的miR-199b-5p mRNA相對表達量與MSCs相比均顯著下降（P＜0.05），與實驗組對應細胞相比亦顯著下降（P＜0.05）。與對照組對應細胞相比，實驗組處于G1期細胞明顯增多，S期細胞明顯減少，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）；而兩組G2/M期細胞無明顯差異（P＞0.05）。實驗組細胞凋亡率與對照組對應細胞相比顯著增高（P＜0.05）。雙熒光報告基因實驗檢測miR-199b-5p可能作用的靶基因是細胞周期調節蛋白1（cyclin-L1，CCNL1）和c-Kit。Western blot檢測顯示，與對照組對應細胞相比，實驗組CCNL1和c-Kit蛋白相對表達量明顯下調，差異均有統計學意義（P＜0.05）。 結論miR-199b-5p能抑制尤文肉瘤細胞增殖，阻滯細胞周期轉換，促進細胞凋亡，其抑制作用是通過靶向CCNL1和c-Kit實現的。