目的探討miR-93-5p是否通過靶向調控其預測靶基因Smad5的表達，從而抑制小鼠MSCsC3H10T1/2細胞的成骨分化。 方法構建Smad5 3'-UTR-熒光素酶報告載體（pmiR-RB-REPORTTM），通過雙熒光素酶報告基因檢測，觀察miR-93-5p對Smad5 3'-UTR熒光素酶活性的影響，鑒定Smad5是否為miR-93-5p的靶基因。將miR-93-5p mimics（M組）與miR-93-5p inhibitor（In組）及其對應的陰性對照組miR-93-5p mimics陰性對照（MC組）與miR-93-5p inhibitor陰性對照（InC組）分別轉染至C3H10T1/2細胞中，并進行成骨誘導培養，48 h后分別采用實時熒光定量PCR（real-time fluorescent quantitative PCR，qRT-PCR）及Western blot檢測各組細胞Smad5在mRNA及蛋白水平的相對表達量；14 d后通過茜素紅染色檢測各組細胞外鈣鹽的沉積情況，了解miR-93-5p對C3H10T1/2細胞成骨分化的調控效應。 結果雙熒光素酶報告基因檢測結果顯示，miR-93-5p能與Smad5 mRNA3'-UTR特異性結合，抑制其熒光素酶活性（P＜0.05）。qRT-PCR檢測示，M組及In組Smad5的mRNA相對表達量與對應陰性對照組MC組及InC組比較差異均無統計學意義（P＞0.05）；Western blot檢測示，M組及In組Smad5蛋白相對表達量與對應陰性對照組比較差異均有統計學意義（P＜0.05），其中M組較MC組表達量下調，而In組則較InC組表達量上調。茜素紅染色示，M組鈣鹽沉積較MC組明顯減少，而In組則較InC組鈣鹽沉積明顯增多。 結論Smad5是miR-93-5p的靶基因，miR-93-5p可通過靶向調控Smad5的表達，抑制小鼠C3H10T1/2細胞成骨分化。