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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"miR-381-3p" 1條結果
        • TCDD 致胎鼠腭裂模型中 miR-381-3p 下調抑制腭間充質細胞成骨分化的實驗研究

          目的 探討 2, 3, 7, 8-四氯二苯二英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致胎鼠腭裂模型中 miR-381-3p 下調與胎鼠腭間充質(mouse embryonic palatal mesenchymal,MEPM)細胞成骨分化抑制的相關性。方法 32 只 6~8 周齡 SPF 級建康 C57BL/6J 孕鼠隨機分為 TCDD 組與對照組,每組 16 只。于胚胎日第 10.5 天(embryonic day 10.5,E10.5)時,TCDD 組一次性灌胃 TCDD(28 μg/kg)、對照組給予等量玉米油。于 E13.5 和 E14.5 取出兩組胎鼠大體觀察腭突組織后,取 E13.5 和 E14.5 腭突組織行實時熒光定量 PCR 檢測 miR-381-3p 表達;E14.5 腭突組織 Western blot 檢測成骨特異性轉錄因子 RUNX2 和骨橋蛋白(osteopontin,OPN)的表達。取對照組 E14.5 胎鼠腭突分離培養 MEPM 細胞,取第 3 代細胞以含 10 nmol/L TCDD 的完全培養基培養,于 0、0.5、1、2、3 d 檢測 miR-381-3p 表達,0、1、2、3 d 檢測 RUNX2 和 OPN 蛋白表達。另取第 3 代 MEPM 細胞隨機分為 4 組,沉默表達組及對照組分別轉染 miR-381-3p 抑制物及抑制物對照,過表達組及對照組分別轉染 miR-381-3p 模擬物及模擬物對照。轉染 48 h 后,檢測各組 miR-381-3p 及 RUNX2 和 OPN 蛋白表達。結果 E13.5 和 E14.5 時對照組獲得活胎鼠 96 只、TCDD 組 92 只;其中,E14.5 對照組活胎鼠可見雙側腭突接觸,TCDD 組雙側腭突中間有間隙。TCDD 組胎鼠腭突組織 miR-381-3p 以及 RUNX2、OPN 蛋白相對表達量均明顯低于對照組(P<0.05)。TCDD 處理 MEPM 細胞 0.5 和 1 d 后 miR-381-3p 相對表達量較 0 d 時明顯下降(P<0.05),2、3 d 時表達量明顯上升,與 0 d 時比較差異無統計學意義(P>0.05);1、2、3 d 時 RUNX2 及 OPN 蛋白相對表達量均較 0 d 時顯著降低(P<0.05)。MEPM 細胞轉染 48 h 后,沉默表達組 miR-381-3p 及 RUNX2、OPN 蛋白相對表達量均較其對照組下降,過表達組均較其對照組升高,差異有統計學意義(P<0.05)。結論 在 TCDD 致胎鼠腭裂模型中,miR-381-3p 表達下調可能抑制胎鼠 MEPM 細胞成骨分化。

          發表時間:2019-08-23 01:54 導出 下載 收藏 掃碼
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