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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"miR-142-5p" 1條結果
        • miR-142-5p靶向調控叉頭轉錄蛋白O亞族3介導輔助性T細胞17細胞炎性反應促進自身免疫性葡萄膜炎的發展

          目的觀察實驗性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)模型大鼠CD4+T細胞中miR-142- 5p及叉頭轉錄蛋白O亞族3(FOXO3)的表達,初步探討兩者靶向關系以及對EAU的影響。方法健康雄性Lewis大鼠10只隨機分為模型組、對照組。模型組大鼠以過繼免疫方式誘導EAU動物模型。免疫后20 d,取對照組、模型組大鼠眼球和引流淋巴結提取CD4+T細胞,并分為對照組、模型組、mimic-陰性對照(NC)組、miR-142-5p-mimic組、小干擾(si)-NC組、si-FOXO3組進行體外實驗。miR-142-5p-mimic組、si-FOXO3組分別轉染miR-142-5p-mimic、si-FOXO3。健康雄性Lewis大鼠25只隨機分為模型組、轉染mimic-NC組、轉染miR-142-5p-mimic組、轉染si-NC組、轉染si-FOXO3組,分別注射上述體外實驗組細胞。免疫后4、8、12、16、20 d行裂隙燈顯微鏡檢查并進行EAU評分;免疫后20 d,蘇木精-伊紅染色行組織病理學分級。實時熒光定量聚合酶鏈反應檢測各組大鼠CD4+T細胞和眼組織中miR-142-5p、FOXO3 mRNA相對表達量及細胞培養上清液中輔助性T細胞17(Th17)標志物白細胞介素(IL)-17、IL-22、維甲酸相關孤兒受體γ(RORγ)mRNA相對表達量。生物信息學網站及雙熒光素酶預測miR-142-5p與FOXO3的靶向關系。組間比較采用單因素方差分析或t檢驗。結果模型組大鼠均出現不同程度EAU癥狀,隨時間延長,其癥狀加重。與對照組比較,模型組大鼠CD4+T細胞中miR-142-5p mRNA相對表達量升高,FOXO3 mRNA相對表達量下降,差異均有統計學意義(t=7.374、10.423,P=0.002、0.001)。與mimic-NC組比較,miR-142-5p-mimic組大鼠CD4+T細胞中miR-142-5p mRNA相對表達量上升,差異有統計學意義(t=6.540,P=0.003)。與模型組、mimic-NC組、si-NC組比較,miR-142-5p-mimic組、si-FOXO3組大鼠CD4+T細胞培養上清液中IL-17、IL-22、RORγ mRNA相對表達量均顯著增加,差異有統計學意義(F=26.110、6.292、5.269、55.660、10.490、11.430,P<0.05)。與轉染mimic-NC組比較,轉染miR-142-5p-mimic組大鼠眼組織中miR-142-5p mRNA相對表達量顯著上升,差異有統計學意義(t=6.690,P<0.05);與轉染si-NC組比較,轉染si-FOXO3組大鼠眼組織中FOXO3 mRNA相對表達量顯著下降,差異有統計學意義(t=17.751,P<0.05)。轉染mimic-NC組、轉染miR-142-5p-mimic組、轉染si-NC組、轉染si-FOXO3組大鼠免疫后隨時間延長,EAU評分均呈上升趨勢。轉染miR-142-5p-mimic組大鼠EAU評分與組織病理學分級均較轉染mimic-NC組升高,差異有統計學意義(t=5.633、6.286,P<0.05)。轉染si-FOXO3組大鼠EAU評分與組織病理學分級均較轉染si-NC組升高,差異有統計學意義(t=6.852、6.635,P<0.05)。FOXO3與miR-142-5p具有靶向關系。結論EAU大鼠CD4+T細胞中,miR-142- 5p表達上調,FOXO3表達下調;miR-142-5p靶向調控FOXO3表達促進Th17細胞相關炎性因子發展。

          發表時間:2021-07-21 02:14 導出 下載 收藏 掃碼
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