目的克隆大鼠galectin-9基因全長cDNA，構建含大鼠galectin-9基因的重組腺病毒載體，并予以鑒定。方法從大鼠的肝臟組織中用RT-PCR的方法克隆擴增大鼠galectin-9基因，再定向插入到帶NotⅠ和HindⅢ酶切的pDC316-GFP穿梭質粒中，獲得穿梭質粒pDC316-GFP-galectin-9。經PCR、NotⅠ和HindⅢ酶切及測序鑒定后，用脂質體將穿梭質粒pDC316-GFP-galectin-9與腺病毒骨架質粒pBHGlox△E1.3Cre共轉染HEK-293細胞。經位點特異性重組獲得含目的基因的重組腺病毒Ad5-galectin-9，行PCR鑒定，經HEK-293細胞擴增及純化制備高滴度病毒液，用細胞培養方法測定病毒TCID50滴度。結果 PCR、酶切及測序證實穿梭質粒構建正確，PCR鑒定證實大鼠galectin-9基因重組腺病毒載體構建正確，病毒的感染滴度為1.4×109 U/ml。結論成功構建了含大鼠galectin-9基因的重組腺病毒表達載體，為進一步研究大鼠galectin-9基因的功能奠定了基礎。