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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"cTnC-linker-TnI(P)" 1條結果
        • cTnC-linker-TnI(P)基因的構建、融合蛋白表達及凍干品的制備

          從GenBank中檢索人源心肌肌鈣蛋白C亞基(cTnC)和心肌肌鈣蛋白I亞基(cTnI)編碼序列, 合成cTnC和cTnI第30至110氨基酸基因-cTnI(P), 并在兩者之間合成一段由15個氨基酸(G4S)3組成的接頭(linker)序列。構建原核表達載體pColdⅠ-cTnC-linker-TnI(P), 轉化大腸桿菌BL21(DE3), 用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導融合蛋白表達, 結果在大腸桿菌中成功實現了cTnC-linker-TnI(P)融合蛋白的穩定可溶性高表達。經Ni2+柱純化后得到純度大于95%的cTnC-linker-TnI(P)融合蛋白, 制備凍干品并采用萬孚飛測?心肌肌鈣蛋白I(cTnI)定量檢測試劑盒檢測其穩定性。cTnC-linker-TnI(P)凍干品在37℃可穩定保存10 d以上, 25℃、4℃穩定保存4個月以上。本研究獲得的cTnC-linker-TnI(P)融合蛋白活性高, 凍干品穩定性好, 為后續研究提供了穩定高效的生物原材料。

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