目的探討單層共培養BMSCs和韌帶成纖維細胞（ligament fibroblasts，LFs）經TGF-β1和bFGF-1誘導后，細胞活性、增殖能力和韌帶特異性基因及蛋白表達和合成情況。 方法取3月齡SD大鼠，通過密度梯度離心法結合貼壁法分離培養BMSCs，膠原酶消化法獲得LFs。取第3代BMSCs和LFs，實驗分為6組，分別為未誘導單純BMSCs組（A組）、未誘導單純LFs組（B組）、未誘導單層共培養組（C組）和誘導后單純BMSCs組（D組）、誘導后單純LFs組（E組）、誘導后單層共培養組（F組）。倒置相差顯微鏡及MTT法觀測各組細胞生長情況；ELISA法檢測細胞內Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白濃度；實時熒光定量PCR檢測韌帶特異性蛋白（Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、纖維連接蛋白、細胞黏合素C、基質金屬蛋白酶2）基因表達。 結果倒置相差顯微鏡觀察，共培養細胞可形成一單細胞層生長，F組最快融合至90%以上。MTT檢測示，培養9 d時F組吸光度（A）值最高，D組次之，B組最低，與其余組比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。ELISA檢測示細胞內Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白濃度中，F組濃度顯著高于其余各組（P＜0.05），D、E組Ⅰ型膠原蛋白濃度差異無統計學意義（P＞0.05），E組Ⅲ型膠原蛋白濃度高于D組（P＜0.05）。A～F組Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白濃度比值分別為1.17、1.19、1.10、1.25、1.17、1.18，D組明顯高于其余組。實時熒光定量PCR檢測示，Ⅰ、Ⅲ型膠原及纖維連接蛋白基因表達量F組最高，細胞黏合素C D組最高，基質金屬蛋白酶2 E組最高，與其余各組比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。 結論單層共培養BMSCs和LFs經TGF-β1和bFGF-1誘導后，細胞活性、增殖能力、韌帶特異性基因及蛋白均增高，可作為韌帶組織工程種子細胞來源之一。