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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"Wnt10b基因" 1條結果
        • 腺病毒介導Wnt10b基因調控人BMSCs成骨成脂分化的體外實驗研究

          目的體外實驗研究腺病毒介導Wnt10b基因表達與抑制對人BMSCs(human BMSCs,hBMSCs)成骨成脂分化的調控。 方法取健康成人髂骨骨髓分離培養hBMSCs,取第4代細胞并分為4組:A、B、C組分別加入Wnt10b基因表達腺病毒載體、Wnt10b基因沉默(Wnt10b-shRNA)腺病毒載體和空病毒轉染細胞,D組細胞不進行轉染作為空白對照組。各組進行成骨、成脂和無誘導培養,通過ALP染色、茜素紅染色和油紅O染色檢測Wnt10b對各組成骨成脂分化的影響,通過實時熒光定量PCR檢測成骨和成脂相關基因表達,Western blot檢測成骨和成脂相關蛋白表達,了解Wnt10b對hBMSCs成骨成脂轉錄和蛋白水平的影響。 結果成骨誘導培養后ALP染色4組均呈陽性,A組呈強陽性,B組染色最弱;茜素紅染色A組出現大量片狀融合褐色礦化結節,B組見少許點狀褐色礦化結節,C、D組出現大量點狀褐色礦化結節。成脂誘導培養后油紅O染色B、C、D組呈強陽性表現,其中B組最強;A組散在小團狀著色區,數量較其他組明顯減少。熒光定量PCR和Western blot結果示:A組成骨轉錄因子和蛋白表達高于B、C、D組,B組低于C、D組;而成脂轉錄因子和蛋白表達與成骨轉錄因子及蛋白表達情況相反。 結論Wnt10b基因高表達促進hBMSCs向成骨分化,低表達則促進成脂分化。

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