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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"Piezo1" 1條結果
        • 沉默 Piezo1 機械敏感型離子通道對 MC3T3-E1 成骨細胞遷移的影響

          目的研究 Piezo1 機械敏感型離子蛋白在小鼠 MC3T3-E1 成骨細胞遷移中的作用。方法取第 5~10 代小鼠 MC3T3-E1 成骨細胞,分為 Piezo1-小干擾 RNA(small interfering RNA,siRNA)轉染組(A 組)、陰性對照組(B 組)和空白對照組(C 組)。A、B 組分別采用 siRNA 轉染試劑將 Piezo1-siRNA 或陰性對照 siRNA 轉染入小鼠 MC3T3-E1 成骨細胞,C 組僅加入 siRNA 轉染試劑,在倒置相差顯微鏡及熒光顯微鏡下觀察細胞形態并計算轉染效率。采用免疫熒光染色和 Western blot 檢測各組 Piezo1 蛋白表達水平;采用 Transwell 細胞遷移實驗和細胞劃痕實驗檢測 Piezo1-siRNA 轉染后 MC3T3-E1 成骨細胞遷移能力的變化。結果轉染 48 h 后,A 組可見細胞體積較未轉染細胞略有增大,細胞突變長增粗,但細胞集落有所減少,懸浮細胞較未轉染增多,細胞碎片增多。熒光顯微鏡下可見 B 組小鼠 MC3T3-E1 成骨細胞中出現綠色熒光,轉染效率為 68.56%±4.12%。免疫熒光染色及 Western blot 檢測示,A 組細胞內 Piezo1 蛋白表達水平均顯著低于 B、C 組,差異有統計學意義(P<0.05);B、C 組間差異無統計學意義(P>0.05)。Transwell 細胞遷移實驗及細胞劃痕實驗檢測示,A 組每孔遷移細胞數及培養 1~4 d 的細胞劃痕愈合率均明顯低于 B、C 組,差異有統計學意義(P<0.05);B、C 組間差異無統計學意義(P>0.05)。結論沉默 Piezo1 基因能顯著抑制小鼠 MC3T3-E1 成骨細胞的遷移能力。

          發表時間:2019-01-03 04:07 導出 下載 收藏 掃碼
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