目的篩選質粒，研究質粒短發夾RNA（shRNA）對小鼠腎內髓集合管細胞（IMCD3）Klotho基因的抑制作用。 方法針對Klotho基因的3個位點設計并合成3對Klotho-shRNA序列（shRNA轉染1、2、3組），構建其表達質粒pRNAU6-Klotho，并設置陰性序列（陰性對照組）及正常IMCD3細胞（未處理組）為對照，以Lipofactine2000轉染至IMCD3細胞，24 h后采用逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）及蛋白質印跡法檢測IMCD3細胞Klotho基因mRNA及蛋白表達水平。 結果轉染后，RT-PCR顯示shRNA轉染2組IMCD3細胞Klotho mRNA水平與未處理組和陰性對照組相比較，均存在統計學意義（P＜0.01）；蛋白質印跡法結果顯示與未處理組、陰性對照組、shRNA轉染1組及shRNA轉染3組相比，shRNA轉染2組IMCD3細胞的Klotho蛋白水平差異均有統計學意義（P＜0.001）。 結論質粒shRNA能高效抑制小鼠腎臟IMCD3細胞Klotho的表達，提示其在腎臟病研究中可有一定的作用，并為下一步研究篩選出一條合適的干擾序列。