目的探討模擬微重力環境下，Indianhedgehog（IHH）基因過表達對兔BMSCs成軟骨分化的影響。 方法取第2代兔BMSCs，分為旋轉微重力細胞培養系統（rotary cell culture system，RCCS）組和傳統組2個大組，每個大組進一步分為3個亞組，即IHH基因腺病毒載體轉染組（RCCS 1組和傳統1組）、綠色熒光蛋白腺病毒載體轉染組（RCCS 2組和傳統2組）及空白對照組（RCCS 3組和傳統3組）。RCCS組細胞均在模擬微重力環境下進行成軟骨細胞誘導分化；常規組在6孔板中進行常規細胞培養及成軟骨細胞誘導分化。誘導分化過程中，檢測IHH蛋白表達（ELISA法）及ALP活性；實時熒光定量PCR檢測軟骨及軟骨肥大相關基因表達；Wertern blot法檢測Ⅱ型膠原、聚集蛋白聚糖（aggrecan，ANCN）蛋白表達；并取細胞爬片行甲苯胺藍染色及膜聯蛋白V（Annexin V）-cy3免疫熒光染色觀察。 結果轉染后熒光顯微鏡下RCCS 1、2組可見明顯綠色熒光，轉染效率約95%。ELISA檢測示，RCCS及傳統1組IHH蛋白均明顯高于2、3組（P < 0.05）；傳統1組各時間點ALP活性均高于傳統2、3組（P < 0.05），RCCS 1組ALP活性僅于誘導分化3、7 d稍高于RCCS 2、3組（P < 0.05）。實時熒光定量PCR檢測示，傳統1組在誘導分化早期高表達Ⅱ型膠原、ANCN，但在后期高表達Ⅹ型膠原、ALP及AnnexinⅤ（P < 0.05）；RCCS 1組在誘導分化各時期均高表達軟骨相關基因Ⅱ型膠原、ANCN、SOX9，且低表達軟骨肥大相關基因Ⅹ型膠原、ALP及AnnexinⅤ（P < 0.05）。Wertern blot法檢測示，誘導21 d時傳統1組Ⅱ型膠原蛋白表達量明顯低于傳統2、3組（P < 0.05）；RCCS 1組各時間點Ⅱ型膠原、ANCN蛋白表達量均明顯高于RCCS 2、3組（P < 0.05）。甲苯胺藍染色示，誘導21 d時傳統1組染色淺于傳統2、3組，RCCS 1組各時間點染色均明顯深于RCCS 2、3組；Annexin V-cy3免疫熒光染色示，各時間點傳統1組紅色熒光均強于傳統2、3組，RCCS各亞組紅色熒光表達均較弱且組間無明顯差異。 結論在模擬微重力環境下，IHH基因轉染BMSCs可有效促進軟骨生成，并抑制軟骨老化或向成骨發展，適合軟骨組織工程的需要。