目的研究BMP-14與軟骨細胞共同誘導脂肪來源干細胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）向軟骨細胞分化是否具有協同作用，優化軟骨組織工程種子細胞來源。 方法取2只雄性新西蘭大白兔（體重1.5、2.0 kg）關節軟骨和皮下脂肪組織，分離、培養軟骨細胞和ADSCs，取第3代細胞進行實驗。對ADSCs行成骨（茜素紅染色）、成軟骨（阿利新藍染色）和成脂（油紅O染色）誘導鑒定。測定Ad-巨細胞病毒-BMP-14-內部核糖體進入位點-人源化海腎綠色熒光蛋白1轉染的最佳感染復數（multiplicity of infection，MOI）并以其轉染ADSCs。實驗分為5組：A組，采用Transwell小室將BMP-14轉染的ADSCs與軟骨細胞共培養（1∶1）；B組，采用Transwell小室將未轉染的ADSCs與軟骨細胞共培養（1∶1）；C組，單純BMP-14轉染的ADSCs培養；D組，單純軟骨細胞培養；E組，單純ADSCs培養。培養3周后，取細胞采用阿利新藍法檢測糖胺聚糖（glycosaminoglycan，GAG）含量，Western blot檢測BMP-14和Ⅱ型膠原蛋白表達，RT-PCR檢測Sox-9基因表達。 結果培養細胞經鑒定提示為ADSCs。倒置熒光顯微鏡觀察示，MOI值為150時轉染效果最好。A、C組GAG含量、BMP-14和Ⅱ型膠原蛋白表達以及Sox-9基因表達均明顯高于其余3組，A組高于C組，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）；B、D組均明顯高于E組（P lt; 0.05），B、D組間差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。 結論BMP-14與軟骨細胞能共同誘導并促進兔ADSCs向軟骨細胞分化，兩者之間具有協同作用。
目的在體外環境下同時下調細胞中Noggin基因和增加BMP-14基因，觀察對脂肪來源干細胞（adipose derived stem cells，ADSCs）成骨分化能力的影響。 方法取健康成年SD大鼠5只，體質量250～300 g，采用Ⅰ型膠原酶消化法獲取原代ADSCs，體外培養、擴增。使用慢病毒載體將目的基因轉染大鼠ADSCs，根據目的基因不同將實驗分為3組，A組為空載體病毒Lv-增強型綠色熒光蛋白轉染對照組，B組為Lv-BMP-14轉染組，C組為BMP-14+Noggin shRNA轉染組。分別于轉染后3、7、14 d，采用實時熒光定量PCR檢測BMP-14及成骨相關基因[Ⅰ型膠原、ALP、骨鈣素（osteocalcin，OCN）]的表達，轉染后14 d采用茜素紅染色鑒定其成骨分化能力。 結果轉染后3 d，各組BMP-14 mRNA相對表達量比較差異無統計學意義（P＞0.05）；7、14 d，C組BMP-14 mRNA相對表達量高于A、B組，B組高于A組，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。轉染后3 d，C組各成骨相關基因mRNA相對表達量顯著高于A、B組（P＜0.05）；A、B組間比較差異無統計學意義（P＞0.05）。轉染后7、14 d，C組各成骨相關基因mRNA相對表達量顯著高于A、B組，B組高于A組，除轉染后7 d A、B組間Ⅰ型膠原mRNA相對表達量比較差異無統計學意義（P＞0.05）外，其余各組間比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。轉染后14 d茜素紅染色示，A、B、C組鈣結節量呈遞增趨勢。 結論BMP-14具有增強大鼠ADSCs向成骨細胞分化的能力；沉默細胞中的Noggin基因、聯合BMP-14基因共同作用于大鼠ADSCs，其體外成骨分化能力明顯強于BMP-14單基因轉染，兩者有顯著的協同作用。