目的構建穩定表達谷胱甘肽 S 轉移酶 mu5(GSTM5)的人支氣管上皮 16HBE 細胞株,探討誘導 GSTM5 核轉位的關鍵因素。 方法構建表達 GSTM5 基因的重組慢病毒載體(PLVX-puro-GSTM5-SBP-3*flag-N、PLVX-puro-3*flag-SBP-GSTM5-C)并制備出相應的慢病毒,感染人支氣管上皮 16HBE 細胞后,經嘌呤霉素篩選獲得細胞克隆;實時熒光定量 PCR 和蛋白印跡法(Western blot)分別檢測細胞株中 GSTM5 的 mRNA、蛋白表達水平;以腫瘤壞死因子-α(TNF-α;10 ng/ml)刺激穩定轉染細胞株(穩轉株) 0.5 h,共聚焦熒光顯微鏡檢測 GSTM5 核轉位。 結果成功構建穩定表達 GSTM5 人支氣管上皮細胞株(16HBE-GSTM5-SBP-3*flag-N、16HBE-3*flag-SBP-GSTM5-C);熒光共聚焦顯微鏡顯示穩轉株在 TNF-α 刺激誘導后,GSTM5 由胞漿轉入胞核,以 16HBE-GSTM5-SBP-3*flag-N 穩轉株更顯著。 結論TNF-α 刺激可誘導 GSTM5 人支氣管上皮細胞株中 GSTM5 發生核轉位,可能與其 N 端含有非經典核定位信號密切相關。