目的探討重組腺病毒介導BMP-9及促紅細胞生成素（erythropoietin，EPO）雙基因共轉染對脂肪來源干細胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）體外成骨分化的影響。 方法取4月齡新西蘭兔腹股溝脂肪組織，采用酶消化法與貼壁法分離培養ADSCs并鑒定其多向分化能力。將第3代ADSCs分為5組：A組為正常細胞，B組為空質粒轉染細胞作為對照，C、D組分別采用BMP-9、EPO重組腺病毒轉染細胞，E組采用BMP-9、EPO重組腺病毒共轉染細胞。轉染培養7 d后倒置相差顯微鏡觀察各組細胞生長變化；計算48 h時病毒轉染效率，14 d熒光顯微鏡下觀察各組細胞熒光表達情況；14 d時Western blot檢測各組細胞BMP-9及EPO蛋白表達。取轉染培養14 d的5組細胞進行成骨誘導培養，于誘導培養3、7、14 d檢測各組細胞ALP活性；3周時茜素紅染色觀察鈣結節形成情況，實時熒光定量PCR檢測骨橋蛋白（osteopontin，OPN）、骨鈣素（osteocalcin，OCN）基因表達。 結果轉染培養7 d后倒置相差顯微鏡下見A、B組部分細胞變為橢圓形、圓形和不規則形；C、D組可見少量長梭形細胞；E組長梭形細胞明顯增多，僅見少量圓形細胞。熒光顯微鏡下觀察BMP-9、EPO及BMP-9/EPO重組腺病毒均能穩定轉染ADSCs，轉染效率為80%～93%。Western blot檢測示E組BMP-9及EPO蛋白相對表達量顯著高于其他組，差異有統計學意義（P < 0.05）。成骨誘導培養3、7、14 d時各組細胞ALP活性明顯升高，E組優于其余各組（P < 0.05）；3周時茜素紅染色示E組鈣結節數亦顯著高于其余各組（P < 0.05），實時熒光定量PCR示E組OPN和OCN基因相對表達量明顯高于其他組，C、D組高于A、B組，比較差異有統計學意義（P < 0.05）。 結論重組腺病毒介導BMP-9及EPO基因均可轉染ADSCs并穩定表達，雙基因共轉染后能顯著促進成骨相關基因和蛋白的表達。