目的制備甲基丙烯酰化明膠（gelatin methacryloyl，GelMA）/甲基丙烯酰化透明質酸（hyaluronic acid methacryloyl，HAMA）/殼寡糖（chitosan oligosaccharide，COS）水凝膠，用于構建胰島仿生微環境，并探討GelMA/HAMA/COS水凝膠對低氧下胰島活性和功能的改善作用。方法以組織培養板培養為對照組，COS濃度分別為0、1、5、10、20 mg/mL的GelMA/HAMA/COS水凝膠為實驗組，掃描電鏡觀察微觀形態，流變儀評價成膠性能，接觸角檢測親水性，水凝膠浸提液培養L929細胞評估生物相容性 ［采用細胞計數試劑盒8（cell counting kit 8，CCK-8）法］。從8周齡SD大鼠胰腺中提取胰島，雙硫腙染色和葡萄糖刺激胰島素釋放（glucose-stimulated insulin secretion，GSIS）實驗分別鑒定胰島純度和功能。胰島在低氧（1%O2）下分別培養24、48、72 h，使用鈣黃綠素-乙酰甲氧基甲酯/碘化丙啶（Calcein-acetyl methyl/propidium iodide，Calcein-AM/PI）染色評價低氧對胰島活性的影響。將胰島在不同COS濃度的GelMA/HAMA/COS水凝膠中培養48 h，活性氧試劑盒評價COS在常氧（20%O2）和低氧（1%O2）條件下拮抗胰島活性氧產生情況，Calcein-AM/PI染色評價COS在低氧（1%O2）條件下對胰島活性的影響。將胰島分別在組織培養板（A組）、GelMA/HAMA水凝膠（B組）和GelMA/HAMA/COS水凝膠（C組）中培養48 h，免疫熒光和GSIS實驗分別評價COS在低氧（1%O2）條件下對胰島活性的影響。結果GelMA/HAMA/COS水凝膠呈多孔結構，流變儀檢測提示其具有較好的成膠性能，接觸角表現出良好親水性，CCK-8法檢測示各組水凝膠均具有良好的生物相容性。分離的大鼠胰島呈類圓形，具有較高的胰島純度和胰島素分泌能力。胰島在低氧條件下處理24、48、72 h，Calcein-AM/PI染色示死細胞比例隨時間延長逐漸增多，均顯著高于未低氧處理組（P<0.001）。活性氧染色示不同COS濃度的GelMA/HAMA/COS水凝膠在常氧和低氧條件下均能拮抗活性氧的產生，且該能力與COS濃度成正相關。Calcein-AM/PI染色示，不同COS濃度的GelMA/HAMA/COS水凝膠在低氧條件下均能改善胰島活性，細胞活性與COS濃度成正相關。免疫熒光染色示GelMA/HAMA/COS水凝膠在低氧條件下能促進胰島功能相關基因的表達；GSIS實驗結果顯示C組胰島在低氧條件胰島素分泌量顯著高于A、B組（P<0.05）。結論GelMA/HAMA/COS水凝膠具有良好的生物相容性，通過抑制活性氧提高胰島的存活和功能，是構建胰島仿生微環境用于胰島培養及移植的理想載體。