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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"邱汗柯" 1條結果
        • LOC103693069對BMSCs缺氧性凋亡的作用研究

          目的 探討LOC103693069對BMSCs缺氧性凋亡的作用。方法 取1周齡SD大鼠骨髓,采用全骨髓貼壁培養法分離培養BMSCs并傳代,經成脂、成軟骨和成骨誘導分化鑒定后,取第3代細胞分別采用5%O2、1%O2及無氧條件處理48 h,檢測細胞活性、凋亡以及凋亡相關蛋白 [低氧誘導因子 1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase-3)、B細胞淋巴瘤/白血病基因2(B cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)] 表達,以正常BMSCs作為對照,確定細胞凋亡最明顯的濃度組用于后續實驗。取缺氧處理48 h后BMSCs,通過基因芯片以及實時熒光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)分析,篩選表達下調最顯著基因并構建其高表達、低表達以及陰性對照慢病毒并轉染BMSCs,經qRT-PCR檢測明確轉染成功后,缺氧處理48 h觀察細胞活性及凋亡相關蛋白表達。結果 經細胞活性、凋亡以及凋亡相關蛋白檢測,以無氧條件培養48 h后細胞凋亡最顯著,上述指標與其他組比較差異均有統計學意義(P<0.05),以該組處理條件進行后續實驗。基因芯片分析示缺氧處理48 h后,BMSCs中AC125847.1、LOC102547753、AABR07017208.2、LOC103693069明顯下調,qRT-PCR檢測LOC103693069表達下調最顯著(P<0.05);選擇其構建慢病毒并轉染BMSCs,qRT-PCR檢測示成功轉染至細胞;經缺氧處理后檢測顯示該基因高表達的BMSCs凋亡率和凋亡相關蛋白表達明顯降低(P<0.05)。結論LOC103693069可改善BMSCs缺氧性凋亡。

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