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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"袁成松" 1條結果
        • 機械牽伸對體外大鼠肌腱干細胞RhoA/Rho相關蛋白激酶分子表達的影響

          目的探討不同機械牽伸條件對大鼠肌腱干細胞(tendon stem cells,TSCs)RhoA/ Rho相關蛋白激酶(Rho associated protein kinases,ROCK)分子表達的影響。 方法取2~3月齡雄性SD大鼠(體重200~250 g)跟腱組織,采用酶消化法分離培養TSCs。取第2~3代細胞接種于微溝槽培養皿中,分別以牽伸應變量4%、8%(4%牽伸組、8%牽伸組),牽伸頻率1 Hz,牽伸時間4 h/d進行機械牽伸,倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況;牽伸1、2、3 d后收集細胞,采用實時定量 PCR、Western blot檢測RhoA、ROCK基因及蛋白表達情況,應用細胞計數試劑盒8檢測牽伸后細胞增殖情況。以未牽伸的TSCs作為對照組。 結果第2代TSCs形態呈鵝卵石樣,聚集生長;接種于微溝槽培養皿后呈雜亂生長;牽伸后細胞貼壁良好,無脫落,并沿受力方向排列。各時間點TSCs中RhoA、ROCK基因相對表達量隨牽伸應變量的增加呈遞增趨勢,組間比較差異均有統計學意義(P<0.05)。牽伸1 d時,4%、8%牽伸組與對照組相比RhoA、ROCK蛋白表達水平相似(P>0.05);2、3 d時,4%、8%牽伸組表達水平顯著高于對照組,且隨牽伸應變量增加呈遞增趨勢,組間比較差異均有統計學意義(P<0.05);各時間點,8%牽伸組細胞增殖顯著低于4%牽伸組及對照組(P<0.05);4%牽伸組與對照組比較,差異無統計學意義(P>0.05)。 結論大鼠TSCs中RhoA、ROCK分子表達水平隨牽伸應變量的增加而增加,RhoA/ROCK分子可能是TSCs機械牽伸后的重要效應分子。

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