目的 觀察蜂毒肽(Melittin)對 IL-1β 誘導的大鼠終板軟骨細胞(endplate chondrocytes,EPCs)Ⅱ型膠原表達的影響。 方法 取 4 周齡 SD 大鼠進行腰椎 EPCs 培養,并行形態學觀察、甲苯胺藍染色及Ⅱ型膠原免疫熒光染色鑒定。取第 3 代 EPCs,采用 MTT 法確定 IL-1β 及 Melittin 對細胞干預的最適濃度。然后將第 3 代 EPCs 隨機分為 4 組:A 組為正常組,不加任何藥物;B 組加入最適濃度的 IL-1β;C 組加入最適濃度的 Melittin;D 組加入最適濃度的 IL-1β 及 Melittin;干預 48 h 后采用 Western blot 法檢測Ⅱ型膠原表達。 結果 倒置顯微鏡觀察示,第 1 代細胞多呈多角形,第 5 代后細胞增殖能力逐漸減弱,細胞形態向梭形轉變。細胞質中的酸性黏液物質(如蛋白多糖)被甲苯胺藍染成深藍色。免疫熒光染色標記Ⅱ型膠原后,可見細胞骨架部分呈陽性表達(呈綠色熒光)。MTT 法檢測示,在干預 24、48 h 后,IL-1β 及 Melittin 對 EPCs 均有抑制作用,并呈劑量依賴性,最終確定 IL-1β 及 Melittin 干預的最適濃度分別為 10 ng/mL 和 1.0 μg/mL。Western blot 法檢測示,與 A 組比較,B 組 IL-1β 干預后Ⅱ型膠原表達明顯減少,C 組 Melittin 干預后Ⅱ型膠原表達明顯增加,但 D 組與 A 組比較無明顯差異。A、B、C、D 組Ⅱ型膠原相對表達量分別為 0.991±0.024、0.474±0.127、1.913±0.350、1.159±0.297,除 A、D 組間比較差異無統計學意義(P>0.05)外,其余組間比較差異均有統計學意義(P<0.05)。 結論 研究表明 Melittin 具有保護終板軟骨作用,為其用于防治脊柱退變性疾病提供了相關實驗依據。