目的 構建胰腺癌細胞生存蛋白(survivin)表達的RNA干擾(RNAi)抑制載體,并研究其對survivin表達的抑制作用。方法 用免疫熒光技術和RT-PCR檢測胰腺癌細胞PANC-1中survivin及其mRNA的表達,并把survivin基因克隆到T載體進行測序; 構建針對survivin缺失堿基基因和survivin基因的RNAi載體si-svv-1和si-svv-2,用脂質體轉染胰腺癌細胞PANC-1后,用RT-PCR、DNA梯狀電泳及流式細胞術分析比較2種干擾載體對survivin mRNA表達的抑制情況和檢測細胞凋亡。結果 survivin在胰腺癌細胞PANC-1中高表達; si-svv-2對survivin mRNA的表達抑制率達(72.43±8.04)%,而si-svv-1為0; si-svv-2能誘導胰腺癌細胞PANC-1的凋亡, 72 h細胞凋亡率達(12.36±1.44)%。結論 本研究成功建立胰腺癌細胞survivin表達RNAi抑制載體,該載體可特異有效地抑制胰腺癌細胞PANC-1 survivin的表達并誘導胰腺癌細胞PANC-1凋亡。
目的 探討載脂蛋白(Apo)AⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇多態性與膽囊膽固醇結石病的關系,揭示膽固醇結石病的遺傳易感性。方法 應用多聚酶鏈反應技術(PCR)對膽固醇結石病患者及正常對照者ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇的限制性片段長度多態性進行研究,檢測ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因位點XmnⅠ及MspⅠ。結果 膽石組和對照組均以X1、M1等位基因為主,多為X1X1、M1M1純合子基因型。膽石組各基因型和各等位基因頻率與對照組比較,差異無統計學意義(Pgt;0.05)。膽石組女性患者正常型基因X1X1純合子頻率和正常等位基因X1的頻率低于對照組女性,突變型基因X1X2雜合子、X2X2純合子以及突變型等位基因X2的頻率均高于對照組女性,差異有統計學意義(P<0.05)。膽石組男性患者正常型基因M1M1純合子頻率低于對照組男性,而突變型基因M1M2雜合子頻率高于對照組男性,差異有統計學意義(P<0.05)。結論 ApoAⅠ-CⅢ-AⅣ基因簇XmnⅠ位點的多態性可能與女性膽囊膽固醇結石病有關,而MspⅠ位點的多態性可能與男性膽囊膽固醇結石病有關。