目的 探討不同部位取材分離純化雪旺細胞（Schwann cells，SCs）的純度、活性以及數量差異，為神經缺損修復提供優質、足量種子細胞奠定理論基礎。 方法 6 只5 日齡SD 大鼠，雌雄不限，體重8 ～ 10 g；切取背根神經節（實驗組）和坐骨神經（對照組）。采用聯合酶消化加機械吹打法分離培養SCs，并進行純化及傳代培養。取第1 代SCs，用計數法繪制8 d 內SCs 生長曲線，MTT 法檢測8 d 內SCs 增殖情況，抗S-100 免疫細胞化學檢測SCs 純度，ELISA 法檢測腦源性神經營養因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）濃度。 結果 每只大鼠可切取背根神經節36 ～ 43 個。消化成單個細胞后計數，實驗組可獲取（7.5 ± 0.6）× 106 個SCs，對照組可獲取（3.5 ± 0.4）× 106 個SCs，差異有統計學意義（t=13.175,P=0.000）。兩組SCs 第3 天開始進入對數增長期，隨培養時間延長，細胞數及細胞增殖吸光度（A）值均呈上升趨勢；且培養3、4、5、6 d 時，實驗組細胞數及A 值明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。經S-100 免疫細胞化學檢測，實驗組SCs 純度為92.08% ± 3.45%，對照組為77.50% ± 3.57%，差異有統計學意義（t=6.869，P=0.001）。ELISA法檢測示實驗組培養3 d 和5 d 時BDNF 濃度均高于對照組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）。 結 論 與坐骨神經相比，取材于背根神經節能獲得數量更多、純度和活性更高的SCs，為神經損傷修復創造了必要條件。
目的探討硫酸軟骨素酶ABC（chondroitinase ABC，ChABC）對大鼠脊髓損傷后軸突再生、髓鞘化和膠質瘢痕形成的影響。 方法將72只雄性SD大鼠隨機分為ChABC治療組（A組）、生理鹽水治療組（B組）和假手術組（C組），每組24只。A、B組采用改良Allen撞擊法制作大鼠T9中度脊髓損傷模型，分別在傷后1 h和之后連續7 d每天1次經蛛網膜下腔注射6 μL濃度為1 U/mL ChABC和生理鹽水；C組僅打開椎管，不損傷脊髓。術后1、7、14、28 d，采用BBB評分評定大鼠后肢運動功能恢復情況；取出損傷段脊髓組織，行HE染色和Nissl染色，并采用免疫組織化學染色檢測髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）、生長相關蛋白43（growth associated protein 43，GAP-43）和膠質纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）的變化情況。 結果術后各時間點C組BBB評分均明顯高于A、B組（P lt; 0.05）；術后隨時間延長A、B組BBB評分逐漸增加，14、28 d時A組BBB評分明顯優于B組（P lt; 0.05）。HE和Nissl染色顯示術后各時間點A組脊髓組織形態和神經元數量均優于B組。術后各時間點A、B組MBP和GAP-43的積分吸光度（IA）值及GFAP染色陽性面積均高于C組（P lt; 0.05），術后7、14、28 d時A組MBP和GAP-43的IA值明顯高于B組（P lt; 0.05），GFAP染色陽性面積明顯小于B組（P lt; 0.05）。 結論ChABC能有效改善大鼠脊髓損傷區域微環境，提高MBP和GAP-43表達并抑制GFAP表達，促進軸突再生與髓鞘化，抑制膠質瘢痕形成，促進神經功能恢復。
目的 探討嗅鞘細胞（olfactory ensheathing cells，OECs）與絲素蛋白納米纖維復合的生物相容性，為修復脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）提供良好的組織工程支架材料。 方法 采用靜電紡絲技術制備絲素蛋白納米纖維，并行掃描電鏡觀察。將從SD 大鼠新鮮分離的OECs 經改良差速貼壁純化培養后，取第1 代以1 × 104 個/cm2 細胞密度分別接種至以左旋多聚賴氨酸（對照組）、絲素蛋白納米纖維（實驗組）包被蓋玻片的培養皿中，復合培養不同時間點行倒置相差顯微鏡觀察細胞形態、生長及與材料黏附情況，神經生長因子受體p75（nerve growth factor receptor p75，NGF p75）免疫熒光染色鑒定OECs 并計算其純度，死活細胞染色試劑檢測細胞生存率，MTT 法測定支架材料上OECs 的增殖情況并行毒性評價。 結果 掃描電鏡觀察示絲素蛋白納米纖維直徑為（260 ± 84）nm，呈纖維狀三維立體結構，纖維分布均勻，孔隙較均一。倒置相差顯微鏡示絲素蛋白納米纖維上培養的OECs 與對照組相比，細胞沿絲素纖維分布，細胞突起方向與絲素蛋白走向較一致，形態特征無顯著差異。培養5 d 時，NGFR p75 免疫熒光染色示實驗組OECs 純度為74.21% ± 2.48%，對照組為79.05% ± 2.52%（P gt; 0.05） ；OECs 在絲素蛋白納米纖維上仍保留其特有的表現型。培養3 d死活細胞染色試劑檢測示實驗組細胞形態較對照組正常，成活率較高，兩組死亡細胞數比較無顯著差異。MTT 檢測示培養3、5 d 兩組吸光度值比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）。培養1、3、5、7、10 d，細胞相對增殖率分別為95.11%、90.35%、92.63%、94.12% 和94.81%，根據GB/T 16886 標準，細胞毒性為1 級，無毒。 結論 絲素蛋白納米纖維與OECs 生物相容性良好，有望成為修復SCI 的組織工程支架材料。