• 1 蘇州大學附屬第二醫院骨科(江蘇蘇州,215004);;
  • 2 蘇州大學醫學部 江蘇省干細胞重點實驗室,3 材料工程學院;
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目的 探討嗅鞘細胞(olfactory ensheathing cells,OECs)與絲素蛋白納米纖維復合的生物相容性,為修復脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)提供良好的組織工程支架材料。 方法 采用靜電紡絲技術制備絲素蛋白納米纖維,并行掃描電鏡觀察。將從SD 大鼠新鮮分離的OECs 經改良差速貼壁純化培養后,取第1 代以1 × 104 個/cm2 細胞密度分別接種至以左旋多聚賴氨酸(對照組)、絲素蛋白納米纖維(實驗組)包被蓋玻片的培養皿中,復合培養不同時間點行倒置相差顯微鏡觀察細胞形態、生長及與材料黏附情況,神經生長因子受體p75(nerve growth factor receptor p75,NGF p75)免疫熒光染色鑒定OECs 并計算其純度,死活細胞染色試劑檢測細胞生存率,MTT 法測定支架材料上OECs 的增殖情況并行毒性評價。 結果 掃描電鏡觀察示絲素蛋白納米纖維直徑為(260 ± 84)nm,呈纖維狀三維立體結構,纖維分布均勻,孔隙較均一。倒置相差顯微鏡示絲素蛋白納米纖維上培養的OECs 與對照組相比,細胞沿絲素纖維分布,細胞突起方向與絲素蛋白走向較一致,形態特征無顯著差異。培養5 d 時,NGFR p75 免疫熒光染色示實驗組OECs 純度為74.21% ± 2.48%,對照組為79.05% ± 2.52%(P  gt; 0.05) ;OECs 在絲素蛋白納米纖維上仍保留其特有的表現型。培養3 d死活細胞染色試劑檢測示實驗組細胞形態較對照組正常,成活率較高,兩組死亡細胞數比較無顯著差異。MTT 檢測示培養3、5 d 兩組吸光度值比較差異有統計學意義(P  lt; 0.05)。培養1、3、5、7、10 d,細胞相對增殖率分別為95.11%、90.35%、92.63%、94.12% 和94.81%,根據GB/T 16886 標準,細胞毒性為1 級,無毒。 結論 絲素蛋白納米纖維與OECs 生物相容性良好,有望成為修復SCI 的組織工程支架材料。

引用本文: 錢玉強,沈憶新,陸政峰,范志海,劉暾,張俊克,張鋒. 嗅鞘細胞與絲素蛋白納米纖維生物相容性研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(11): 1365-1371. doi: 復制