目的 評價Cu2+ 對人臍靜脈血管內皮細胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖與分化的影響。 方法 體外培養并傳代HUVEC。將HUVEC 以5 × 103 個/ 孔密度接種于96 孔板,根據向孔板中加入溶液濃度的不同將細胞隨機分成3 組,A 組5 μmol/L CuSO4,B 組25 μmol/L CuSO4,C 組為空白對照,每組4 個復孔,基礎培養基為MCDB131,采用MTT 法檢測細胞增殖并繪制生長曲線。另取HUVEC 以2 × 105 個/ 孔密度接種于6 孔板,分組同前,熒光定量RT-PCR 檢測3 組HUVEC 的內皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因和Tie-1 基因表達。 結果 生長曲線示前3 d 為指數增長期,第4 天開始進入平臺期。A 組細胞增殖能力從第3 天開始明顯高于B、C 組,B 組在2 d 內高于C 組,但從第4 天開始顯著低于C 組,比較差異均有統計學意義(P lt; 0.05)。熒光定量RT-PCR 檢測示作用48 h 后,A、B、C組eNOS 基因表達分別為7.294 ± 1.488、0.149 ± 0.044 和1.000 ± 0.253,Tie-1 基因的表達分別為1.481 ± 0.137、1.131 ± 0.191 和1.000 ± 0.177。A 組與B、C 組比較,2 個基因的表達均有上調(P lt; 0.05);B、C 組比較,eNOS 基因表達下調(P lt; 0.05),Tie-1 基因表達差異無統計學意義(P gt; 0.05)。 結論 5 μmol/L Cu2+ 能有效促進HUVEC 的增殖與分化。
目的比較內側副韌帶切斷加半月板切除與軟骨刮除方法制備膝軟骨缺損模型的差異,為軟骨缺損造模方法選擇提供參考。 方法選擇成年健康比格犬10只,雌雄不限,體質量5.0~10.0 kg,隨機分成3組,A組4只為內側副韌帶切斷加半月板切除組,B組4只為軟骨刮除組,C組2只為正常對照組。造模術后16周各組行MRI檢查、標本大體觀察,HE、番紅O、甲苯胺藍組織學染色,并采用國際骨關節炎研究協會(OARSI)骨關節炎組織學評分表對A、B組進行評分。 結果術后16周,與C組相比,A組MRI及組織學觀察未見明顯軟骨缺損;B組MRI和組織學可見明顯軟骨缺損,大體標本見缺損部位呈暗紅色。A、B組OARSI骨關節炎組織學評分分別為(0.940±0.574)、(4.500±0.516)分,差異有統計學意義(t=18.461,P=0.000)。 結論采用軟骨刮除方法制備軟骨缺損模型效果較內側副韌帶切斷加半月板切除好,是一種構建軟骨缺損模型的良好方法。