目的 探討缺氧誘導因子1α（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）及細胞外調節蛋白激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2，ERK1/2）在體外培養的胎鼠大腦皮質神經元缺氧缺血再灌注后變化的趨勢及其相互關系。 方法 取15 只16 ～ 18 d 孕齡SD 大鼠的大腦皮層，進行皮質神經元原代培養，取培養5 d 的原代神經元建立氧糖剝離（oxygen and glucose deprivation，OGD）模型。實驗分為實驗組1：OGD 模型制備后，更換培養液為含葡萄糖的神經元完全培養基，以形成再灌注；取再灌注0、2、4、8、12、24 h 觀察；對照組1：正常培養液孵育的神經元；實驗組2：U0126預處理神經元后制備OGD 模型，于再灌注后4、8 h 觀察；對照組2：DMSO 預處理神經元后制備OGD 模型，余同實驗組2。應用Western blot 定量測定各組HIF-1α、VEGF 蛋白及ERK1/2、p-ERK1/2 的表達變化，SABC 免疫細胞化學法檢測p-ERK1/2、HIF-1α 蛋白表達及分布情況。 結果 培養5 d 的皮質神經元突起間互相連接成網狀。實驗組1 HIF-1α、VEGF 蛋白表達逐漸升高，8 h 表達量最高，12 h 后逐漸下降，與對照組1 比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）。各時間點實驗組1 與對照組1 ERK1/2 蛋白表達無明顯差異（P gt; 0.05）。實驗組1 p-ERK1/2 蛋白表達在2 h 時開始增加，4 h 達高峰，8 h 開始下降，與對照組1 比較差異有統計學意義（P lt; 0.01）；實驗組2 p-ERK1/2 蛋白表達下降，HIF-1α 及VEGF 蛋白表達也隨之下調，與對照組2 比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。各時間點實驗組2 和對照組2 ERK1/2 蛋白表達差異無統計學意義（P gt; 0.05）。免疫細胞化學染色顯示神經元黃棕色著色減弱，p-ERK1/2、HIF-1α 表達下降。 結論 HIF-1α及其靶基因VEGF 蛋白在OGD 再灌注后的皮質神經元表達具有一定時間規律性，抑制ERK1/2 信號通路后這兩個蛋白表達均下降，提示該通路在神經元OGD 后誘導HIF-1α 及VEGF 的調控中起重要作用。
目的 探討 2, 3, 7, 8-四氯二苯二英（2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin，TCDD）致胎鼠腭裂模型中 miR-381-3p 下調與胎鼠腭間充質（mouse embryonic palatal mesenchymal，MEPM）細胞成骨分化抑制的相關性。方法 32 只 6～8 周齡 SPF 級建康 C57BL/6J 孕鼠隨機分為 TCDD 組與對照組，每組 16 只。于胚胎日第 10.5 天（embryonic day 10.5，E10.5）時，TCDD 組一次性灌胃 TCDD（28 μg/kg）、對照組給予等量玉米油。于 E13.5 和 E14.5 取出兩組胎鼠大體觀察腭突組織后，取 E13.5 和 E14.5 腭突組織行實時熒光定量 PCR 檢測 miR-381-3p 表達；E14.5 腭突組織 Western blot 檢測成骨特異性轉錄因子 RUNX2 和骨橋蛋白（osteopontin，OPN）的表達。取對照組 E14.5 胎鼠腭突分離培養 MEPM 細胞，取第 3 代細胞以含 10 nmol/L TCDD 的完全培養基培養，于 0、0.5、1、2、3 d 檢測 miR-381-3p 表達，0、1、2、3 d 檢測 RUNX2 和 OPN 蛋白表達。另取第 3 代 MEPM 細胞隨機分為 4 組，沉默表達組及對照組分別轉染 miR-381-3p 抑制物及抑制物對照，過表達組及對照組分別轉染 miR-381-3p 模擬物及模擬物對照。轉染 48 h 后，檢測各組 miR-381-3p 及 RUNX2 和 OPN 蛋白表達。結果 E13.5 和 E14.5 時對照組獲得活胎鼠 96 只、TCDD 組 92 只；其中，E14.5 對照組活胎鼠可見雙側腭突接觸，TCDD 組雙側腭突中間有間隙。TCDD 組胎鼠腭突組織 miR-381-3p 以及 RUNX2、OPN 蛋白相對表達量均明顯低于對照組（P<0.05）。TCDD 處理 MEPM 細胞 0.5 和 1 d 后 miR-381-3p 相對表達量較 0 d 時明顯下降（P<0.05），2、3 d 時表達量明顯上升，與 0 d 時比較差異無統計學意義（P>0.05）；1、2、3 d 時 RUNX2 及 OPN 蛋白相對表達量均較 0 d 時顯著降低（P<0.05）。MEPM 細胞轉染 48 h 后，沉默表達組 miR-381-3p 及 RUNX2、OPN 蛋白相對表達量均較其對照組下降，過表達組均較其對照組升高，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 在 TCDD 致胎鼠腭裂模型中，miR-381-3p 表達下調可能抑制胎鼠 MEPM 細胞成骨分化。