摘要:目的：探討皮膚平滑肌肉瘤的臨床病理特點和診斷要點及預后。方法:對2例皮膚平滑肌肉瘤組織病理學、免疫組化觀察,并復習相關文獻。結果: 例1為皮下平滑肌肉瘤,具有結節型的生長形態,瘤細胞豐富,異型性較大,核分裂活躍；例2為真皮平滑肌肉瘤,具有彌漫型的生長形態,瘤細胞較少,分化好,核分裂象不明顯。免疫組化2例均表達SMA、MSA、Vim,1例灶性表達Desmin。2例隨訪迄今均無復發及轉移。結論:皮膚平滑肌肉瘤少見,可分為真皮和皮下兩種類型,兩者具有不同的組織起源和預后特點,我們要注意區分,診斷除核分裂象計數外,尚需進行綜合評估,對某些病例建議采用惡性潛能未定的平滑肌肉瘤的診斷,治療首選外科手術切除。Abstract: Objective: To investigate the clinic pathological features diagnosis main point and prognosis of cutaneous leiomyosarcoma（CLMS）.Methods:Histopathology,immunohistochemical stainings observation were analyzed in two cases of CLMS and the related literatures were reviewed. Results:Case 1 was subcutaneous leiomyosarcoma with tubercular growth pattern,rich tumor cell,big heterogeneous type,active mitotic；Case 2 was dermis leiomyosarcoma with diffuse growth pattern,few tumor cell,well differentiated,no more mitotic. Immunohistochemically,the two cases reacted positively with smooth muscle action、MSA and Vim,Case 1 also expressed desman partially. The two cases were revisited to date,no recurrences and metastases.Conclusion:Cutaneous leiomyosar coma is a rare tumor,subdivided into dermis and subcutaneous forms because of their different tissue origins and prognosis features. We must discriminate between them. Diagnosis need synthetic appraisal besides mitotic counts and “smooth muscle tumor of uncertain malignant potential” should be used for diagnosis of certain cases.Primary treatment for cutaneous leiomyosarcoma is surgical excision.
【摘要】目的以人甲狀腺未分化癌細胞系TAK建立的人甲狀腺未分化癌裸鼠皮下移植模型為對象，研究裸鼠肌肉內電轉染對移植瘤的作用。方法將皮下移植腫瘤的裸鼠分為5組： 空白對照組、pcDNA-3質粒肌肉電轉染組、TIMP-3質粒肌肉注射組、TIMP-3質粒肌肉電轉染組及TIMP-3質粒腫瘤電轉染組。肌肉電轉染采用的參數是電場強度為200 V/cm，脈沖時值為20 ms，8次，1 Hz； 腫瘤內電轉染采用的參數是電場強度為600 V/cm，脈沖時值為20 ms，1次，1 Hz。結果TIMP-3質粒肌肉內電轉染組和TIMP-3質粒腫瘤內電轉染組腫瘤生長受到抑制，與另外3組相比腫瘤生長速度明顯減緩(P＜0.05)，且兩組腫瘤組織中TIMP-3蛋白量過度表達。結論抑癌基因可通過肌肉內DNA電轉染起到抗腫瘤效果。
目的通過觀察脊髓圓錐損傷膀胱功能重建術后大鼠膀胱逼尿肌及神經肌肉接頭（neuromuscular junction，NMJ）的形態學變化規律，探討膀胱重建術抑制或改善膀胱逼尿肌退行性變的可行性。 方法成年雌性SD大鼠104只，體重200～250 g，隨機分為3組，正常組（n=8）、脊髓圓錐損傷對照組（對照組，n=48）及脊髓圓錐損傷膀胱功能重建組（實驗組，n=48）。正常組大鼠不作任何處理；對照組大鼠采用L4、5平面銳性橫斷脊髓制作脊髓圓錐損傷模型；實驗組在脊髓圓錐損傷模型基礎上將雙側L5前、后根與S2前、后根吻合制作脊髓圓錐損傷后膀胱功能重建模型。術后觀察大鼠存活情況，于術后3 d及1、2、3、4、5、6個月前連續3 d分別測定大鼠殘余尿量；術后1、2、3、4、5、6個月取膀胱逼尿肌行HE染色觀測肌纖維截面積變化規律，Masson三色染色計算結締組織百分比，透射電鏡觀察膀胱逼尿肌和NMJ的變化。 結果術后11只大鼠死亡，均對應補充。對照組術后膀胱殘余尿量隨時間延長逐漸增加（P lt; 0.05）；實驗組術后膀胱殘余尿量逐漸增加，3個月后逐漸減少，除術后3 d與5個月比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）外，其余各時間點間比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。兩組間除術后3 d及1、2個月外，其余各時間點比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。HE染色及Masson三色染色示，對照組術后逼尿肌肌纖維排列紊亂、萎縮隨時間延長逐漸加重，肌束間大量結締組織浸潤；實驗組術后4、5、6個月逼尿肌形態逐漸恢復，結締組織數量無明顯增加。各時間點對照組及實驗組逼尿肌肌纖維截面積及結締組織百分比與正常組比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。對照組隨時間延長逼尿肌肌纖維截面積逐漸減小，結締組織百分比逐漸增加（P lt; 0.05）。實驗組中術后3個月內隨時間延長逼尿肌肌纖維截面積下降，4個月后逐漸增大；結締組織百分比隨時間延長緩慢增加。術后1、2、3個月實驗組與對照組比較逼尿肌肌纖維截面積無統計學意義（P gt; 0.05），4、5、6個月實驗組顯著高于對照組（P lt; 0.05）；術后1～6個月實驗組與對照組結締組織百分比比較，均有統計學意義（P lt; 0.05）。透射電鏡觀察示，對照組隨時間延長，突觸小泡數量明顯減少，3個月時NMJ呈空泡狀改變，6 個月時罕見逼尿肌間NMJ；實驗組中1、3個月逼尿肌細胞間的NMJ內突觸小泡數量減少，6個月時突觸小泡較3個月時明顯增多。 結論利用損傷平面以上正常的L5神經根作為動力神經重建脊髓圓錐損傷后大鼠膀胱功能，能夠有效延緩膀胱逼尿肌退行性變，改善其顯微結構變化。
目的 以去細胞肌肉生物支架（acellular muscle bioscaffolds，AMBS）接種BMSCs，同種異體移植修復大鼠脊髓半切損傷，觀察兩者聯合移植對脊髓損傷的修復作用。 方法取8周齡雌性SD大鼠，采用改良化學方法制備AMBS，并進行復合冷滅菌；密度梯度離心法提取、貼壁法培養BMSCs，取第3代細胞用Hoechst 33342熒光標記，采用注射法制備BMSCs-AMBS復合支架，14 d后掃描電鏡及熒光顯微鏡觀察其生物相容性。取成年雌性SD大鼠48只，制備T9～11脊髓半切損傷模型后隨機分為4組（n=12），A組于缺損處移植BMSCs-AMBS復合支架，B組單獨移植BMSCs，C組單獨移植AMBS，D組注射PBS作為空白對照組，分別于術后1、2、3、4周行運動功能評分，術后4周行HE染色觀察及免疫熒光檢測。 結果Masson染色及HE染色示AMBS內部呈平行結構，主要為膠原纖維，幾乎無肌纖維。BMSCs-AMBS復合培養14 d后熒光顯微鏡觀察示Hoechst 33342標記BMSCs大量存活，掃描電鏡可見BMSCs貼附于支架內表面生長。術后2～4周，大鼠BBB評分A組均高于其余3組（P lt; 0.05），D組明顯低于其余3組（P lt; 0.05）；術后4周B組明顯高于C組（t=10.352，P=0.000）。術后4周，HE染色示脊髓空洞面積A組明顯小于其余3組，免疫熒光染色示A 組神經絲蛋白200、巢蛋白陽性細胞表達量高于其余3組，神經膠質原酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）則明顯低表達。A、B組熒光示蹤的BMSCs移植到體內后主要遷移至對側灰質前角，部分分化為神經元樣細胞。A、B、C、D組GFAP熒光半定量分析積分吸光度（IA）值分別為733.01 ± 202.04、926.42 ± 59.46、1 069.37 ± 33.42、1 469.46 ± 160.53，A組明顯低于其余3組，D組高于其余3組，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論AMBS具有相對規則的內部結構，與BMSCs有良好生物相容性，能抑制膠質瘢痕，促進BMSCs存活、遷徙、分化，是細胞移植理想的天然載體。兩者聯合移植修復大鼠脊髓損傷能發揮協同作用，促進運動功能恢復。
目的 綜述國內外應用神經肌肉電刺激（neuromuscular electrical stimulation，NMES）治療周圍神經損傷的機制、參數選擇、臨床應用等研究進展。 方法 檢索近年來NMES 治療周圍神經損傷的國內外相關文獻，綜述分析相關研究進展。 結果 NMES 治療周圍神經損傷應在個體化參數、合適刺激方式下早期應用，具有促進神經再生、預防肌肉萎縮的作用。 結論 NMES 臨床應用安全、有效，植入式電刺激有望成為治療神經斷裂傷的較佳選擇。
目的 研究前臂骨骼肌亞部的形態學特征及肌構筑特點，探討肌亞部化移植的可行性，為臨床肌亞部移植手術提供形態學依據。 方法 第二軍醫大學解剖學教研室提供的冰凍上肢標本10 例20 側，均為男性，年齡26 ～ 39 歲。用改良Sihler 染色法對10 側橈側腕屈肌、尺側腕屈肌、橈側腕短伸肌、尺側腕伸肌、掌長肌、拇長屈肌及旋前圓肌進行肌內神經染色，以觀察肌內神經的分支分布。另取10 側標本，前臂上述肌肉沿肌腱長軸分為尺側半和橈側半，根據Wickiewicz 肌構筑研究方法測量其構筑學特征。 結果 各肌肉神經在入肌前或入肌后發出2 支或以上神經分支，分別進入尺側半和橈側半。各分支以肌內腱板為界，兩側的肌內神經各支配一側肌肉。各肌肉所分成的兩亞部之間，生理橫切面積相比差異均有統計學意義（P lt; 0.05）；其中以尺側腕屈肌尺側半最大，掌長肌兩亞部及旋前圓肌尺側半較小。各肌肉兩亞部之間生理橫切面積與肌濕重比值，差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。生理橫切面積與肌纖維長度比值，旋前圓肌尺側半、掌長肌兩亞部較高，尺側腕屈肌尺側半最小，與其余各亞部比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）；其余各亞部間差異無統計學意義（P gt; 0.05）。 結 論 前臂各肌可分為尺側半和橈側半兩亞部；各亞部的生理功能特征存在差異；對選擇和切取理想的部分肌肉移植，重建運動功能提供了理論依據。
目的 觀察肌肉游離移植后泛素連接酶（MAFbx）mRNA 和蛋白表達的變化，以及肌肉萎縮和肌肉功能的動態恢復情況，并探討三者之間的關系。 方法 雌性SPF 級SD 大鼠36 只，體重（250 ± 25）g。隨機選取一側行股薄肌原位游離移植手術，作為實驗側；另一側不行手術作為對照側。術后觀察大鼠一般情況，于術后1、2、4、10、15 和30周，分別取6 只大鼠測量實驗側和對照側股薄肌肌肉收縮能力、肌濕重維持率，HE 染色觀察肌纖維橫截面積，實時定量PCR 檢測MAFbx/Atrogin-1 mRNA 相對表達量，Western blot 檢測MAFbx 蛋白表達。 結果 36 只大鼠全部成活，切口愈合好，實驗側肢體功能無障礙。實驗側肌纖維橫截面積、肌肉濕重維持率、肌肉最大單收縮力維持率和肌肉強直收縮力維持率均呈先降低（術后1 ～ 4 周）后增加（術后4 ～ 30 周）的趨勢。MAFbx mRNA 相對表達量術后2 周最高，為對照側7 倍；術后15 ～ 30 周逐漸下降，為對照側1.1 ～ 1.5 倍；各時間點實驗側與對照側比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。Western blot 檢測結果顯示術后1 ～ 15 周，實驗側肌肉內MAFbx 蛋白相對表達量與對照側相比，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）；術后30 周差異無統計學意義（P gt; 0.05）。肌濕重維持率、肌纖維橫截面積恢復率分別與最大單收縮力維持率和最大強直收縮力維持率的相關系數為0.95、0.75 和0.93、0.68（P lt; 0.05）。MAFbx mRNA 及蛋白相對表達量分別與肌肉濕重維持率、肌纖維橫截面積恢復率、最大單收縮力維持率、最大強直收縮力維持率的相關系數為— 0.62（P lt; 0.05）、— 0.45（P gt; 0.05）、— 0.72（P lt; 0.05）、— 0.78（P lt; 0.05）和— 0.95（P lt; 0.05）、— 0.82（P lt; 0.05）、— 0.89（P lt; 0.05）、— 0.54（P gt; 0.05）。 結論 移植肌肉功能降低與肌肉萎縮密切相關。MAFbx mRNA 和蛋白表達增高，尤其在獲得神經支配后4 ～ 15周仍持續升高，可能是肌肉萎縮引起肌肉功能降低的一個聯系點。
【摘 要】 目的 應用不同來源的成肌細胞（myoblast，Mb）研究肌球蛋白輕鏈（myosin light chain，Myl）在肌肉再生中的作用，為進一步了解Myl 的生理功能提供依據。 方法 3 周齡健康雄性C57BL/6 小鼠12 只。采用酶消化法和Preplate 技術分離純化小鼠眼外肌、膈肌和腓腸肌Mb（eMb、dMb 和gMb），進行傳代培養。采用RT-PCR 和Western blot法檢測第1 代細胞Myl 的表達，亞甲基藍法檢測細胞增殖能力，倒置相差顯微鏡觀察肌管形成情況。采用濃度為1、2、4、8、16 ng/mL Myl 單克隆抗體分別處理3 種細胞（實驗組），與未處理的細胞比較（對照組），觀察細胞增殖能力及肌管形成的變化。 結果 培養24 h 的eMb、dMb 和gMb 均檢測到Myl1、Myl4 mRNA 和Myl 蛋白表達，且eMb 的表達水平顯著低于dMb 和gMb（P lt; 0.01），dMb 和gMb 間差異無統計學意義（P gt; 0.05） ；3 種細胞均未檢測到Myl2 和 Myl3 mRNA 表達。eMb 的增殖速度高于dMb 和gMb（P lt; 0.01）；eMb 和dMb、gMb 分別在接種后40 h 和16 h 出現肌管；第6 天eMb 肌管數為（137.2 ± 24.5）/ 視野，顯著高于dMb 的（47.6 ± 15.5）/ 視野和gMb 的（39.8 ± 5.1）/ 視野（P lt; 0.01），后兩者差異無統計學意義（P gt; 0.05）。Myl 抗體作用后，3 種細胞實驗組各濃度吸光度值均顯著高于對照組（P lt; 0.05），表現濃度依賴性；dMb 實驗組和對照組16 h 肌管數分別為（48.2 ± 7.1）/ 孔和（23.4 ± 4.9）/ 孔，6 d 肌管數分別為（40.6 ± 10.2）/ 視野和（63.1 ±6.1）/ 視野，兩組間差異均有統計學意義（P lt; 0.01）。 結 論 Myl 可能通過促使Mb 終末分化，負性影響Mb 增殖而在肌肉再生中發揮一定作用。
目的 研究異體神經干細胞（neural stem cell，NSC）移植于切斷的周圍神經遠端，延緩失神經肌肉萎縮的作用，并探討其發揮作用的可能機制。 方法 取2 只孕12 ～ 14 d 綠色熒光蛋白（green fluorescent protein，GFP）轉基因大鼠，取其胚胎并體外分離培養脊髓NSC。選取2 月齡健康成年F344 雌性大鼠32 只，體重（180 ± 20）g，隨機分為實驗組和對照組（n=16）。于右股部膝關節上1.5 cm 處水平切斷脛神經及腓總神經，近端反折縫合，建立小腿三頭肌失神經支配模型。實驗組：將制備的5 μL GFP-NSC 懸液自脛神經遠側斷端進針1 cm 后緩慢注入脛神經內；對照組：同法注入等量NSC 培養上清液。術后觀察大鼠一般情況，于術后4 周及12 周取材，測量小腿三頭肌濕重，行肌肉HE 染色、Mal lory 三色染色及突觸后膜染色，觀察并測量肌纖維橫截面積維持率及肌肉突觸后膜的形態和面積。 結果 各組大鼠傷口均Ⅰ期愈合，右側后肢無潰瘍發生。術后4 周和12 周，右側小腿三頭肌濕重，實驗組分別為（0.849 ± 0.064）g 和（0.596 ± 0.047）g，對照組分別為（0.651 ± 0.040）g 和（0.298 ± 0.016）g，同時間點組間比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）。術后4 周與12 周，骨骼肌纖維橫截面積維持率實驗組分別為72.55% ± 8.12% 和58.96% ± 6.07%，對照組分別為50.23% ±4.76% 和33.63% ± 4.41%；實驗組均優于對照組，差異有統計學意義（P lt; 0.05）。失神經肌肉經Mallory 三色染色，術后4 周可見肌纖維之間已有大量膠原纖維增生；術后12 周，膠原纖維進一步增多，大部分肌肉纖維被取代，但實驗組纖維化程度輕于對照組。術后12 周，實驗組突觸后膜面積為（137.29 ± 29.14）μm2，更接近于正常（198.63 ± 23.11）μm2，達對照組（61.03 ± 11.38）μm2 的2 倍以上，各組差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 異體胚胎脊髓NSC 體內移植可發揮延緩失神經肌肉萎縮和維持失神經肌肉突觸后膜形態、功能的作用，為臨床上周圍神經損傷后肌肉萎縮的防治提供了新的思路和方法。