BMSCs聯合去細胞肌肉生物支架修復大鼠脊髓半切損傷的實驗研究_《中國修復重建外科雜志》

作者：

魏祥科 ¹ , 文益民 ¹ , 張濤 ² , 李含 ²

1 蘭州軍區蘭州總醫院骨科中心（蘭州，710050）;;
2 蘭州大學第二臨床醫學院臨床系;

關鍵詞：

BMSCs 去細胞肌肉生物支架聯合移植脊髓損傷大鼠

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目的以去細胞肌肉生物支架（acellular muscle bioscaffolds，AMBS）接種BMSCs，同種異體移植修復大鼠脊髓半切損傷，觀察兩者聯合移植對脊髓損傷的修復作用。方法取8周齡雌性SD大鼠，采用改良化學方法制備AMBS，并進行復合冷滅菌；密度梯度離心法提取、貼壁法培養BMSCs，取第3代細胞用Hoechst 33342熒光標記，采用注射法制備BMSCs-AMBS復合支架，14 d后掃描電鏡及熒光顯微鏡觀察其生物相容性。取成年雌性SD大鼠48只，制備T9～11脊髓半切損傷模型后隨機分為4組（n=12），A組于缺損處移植BMSCs-AMBS復合支架，B組單獨移植BMSCs，C組單獨移植AMBS，D組注射PBS作為空白對照組，分別于術后1、2、3、4周行運動功能評分，術后4周行HE染色觀察及免疫熒光檢測。結果Masson染色及HE染色示AMBS內部呈平行結構，主要為膠原纖維，幾乎無肌纖維。BMSCs-AMBS復合培養14 d后熒光顯微鏡觀察示Hoechst 33342標記BMSCs大量存活，掃描電鏡可見BMSCs貼附于支架內表面生長。術后2～4周，大鼠BBB評分A組均高于其余3組（P lt; 0.05），D組明顯低于其余3組（P lt; 0.05）；術后4周B組明顯高于C組（t=10.352，P=0.000）。術后4周，HE染色示脊髓空洞面積A組明顯小于其余3組，免疫熒光染色示A 組神經絲蛋白200、巢蛋白陽性細胞表達量高于其余3組，神經膠質原酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）則明顯低表達。A、B組熒光示蹤的BMSCs移植到體內后主要遷移至對側灰質前角，部分分化為神經元樣細胞。A、B、C、D組GFAP熒光半定量分析積分吸光度（IA）值分別為733.01 ± 202.04、926.42 ± 59.46、1 069.37 ± 33.42、1 469.46 ± 160.53，A組明顯低于其余3組，D組高于其余3組，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。結論AMBS具有相對規則的內部結構，與BMSCs有良好生物相容性，能抑制膠質瘢痕，促進BMSCs存活、遷徙、分化，是細胞移植理想的天然載體。兩者聯合移植修復大鼠脊髓損傷能發揮協同作用，促進運動功能恢復。

引用本文： 魏祥科,文益民,張濤,李含. BMSCs聯合去細胞肌肉生物支架修復大鼠脊髓半切損傷的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2012, 26(11): 1362-1368. doi: 復制

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