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      2. 華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"程傲" 1條結果
        • 缺氧條件下大鼠髓核細胞中缺氧誘導因子 1α 與自噬相關分子的表達及相關性分析

          目的探討缺氧條件下大鼠髓核細胞中缺氧誘導因子 1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)與自噬相關分子 Beclin1、LC3B 的表達及其相關性。方法取健康成年 SD 大鼠髓核組織,分離培養髓核細胞并傳代。取第 3 代髓核細胞行 HE 染色和Ⅱ型膠原酶免疫熒光染色鑒定后,隨機分為 4 組。A 組細胞于常氧條件下(37℃、5%CO2、20%O2)培養,B 組細胞于缺氧條件下(37℃、5%CO2、1%O2)培養,C 組細胞轉染 HIF-1α-小干擾 RNA 后于缺氧條件下培養,D 組細胞加入自噬抑制劑 3-MA 后于缺氧條件下培養。各組細胞培養 8 h 后,采用 Western blot 和實時熒光定量 PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)檢測 HIF-1α 與自噬相關分子 Beclin1、LC3B 的表達情況。結果經分離純化的第 3 代大鼠髓核細胞 HE 染色后細胞質呈淡粉色,細胞核呈藍黑色;Ⅱ型膠原酶免疫熒光染色為陽性。Western blot 和 qRT-PCR 檢測示,B 組 HIF-1α、Beclin1 和 LC3B 蛋白及 mRNA 相對表達量均顯著高于 A 組(P<0.05),C 組均顯著低于 B 組,差異均有統計學意義(P<0.05)。D 組 HIF-1α 蛋白和 mRNA 相對表達量與 B 組比較差異無統計學意義(P>0.05),Beclin1 和 LC3B 蛋白和 mRNA 相對表達量均較 B 組顯著降低(P<0.05)。結論缺氧條件能誘導大鼠髓核細胞中 HIF-1α 和自噬相關分子 Beclin1、LC3B 的表達,且 HIF-1α 與自噬相關分子的表達具有相關性,即 HIF-1α 下調能降低自噬相關分子的表達,而缺氧條件下自噬水平下調對 HIF-1α 的表達無明顯影響。

          發表時間:2020-04-15 09:18 導出 下載 收藏 掃碼
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