目的構建人血管內皮生長因子（VEGF）mRNA 靶向小片段干擾 RNA（siRNA）表達的慢病毒載體，并測定其對 VEGFA 基因的沉默率，選擇效率最高的干擾序列。 方法設計 3 種人 VEGFA 靶向的發夾樣 siRNA（KD1、 KD2、 KD3），分別 2 條互補的寡核苷酸鏈，退火后連接入 pGCSIL-GFP 載體，轉化擴增后得到重組載體 pGCSIL-GFP-siVEGFA，進行測序。將重組載體與慢病毒包裝輔助質粒 pHelper 1.0 和 pHelper 2.0 通過Lipofectamine 2000 共同轉染至細胞人胚腎細胞株（293T），產生病毒后，再轉染至人臍靜脈內皮細胞（HUVEC），逆轉錄-聚合酶鏈反應法檢測轉染細胞 VEGFA mRNA 的表達水平，比較 3 種 siRNA 序列的效率。 結果經過酶切鑒定與測序，pGCSIL-GFP-siVEGFA 構建成功。轉染至 HVUEC 后，細胞 VEGFA mRNA 表達水平均明顯降低（KD1：0.614±0.043； KD2： 0.334±0.030； KD3： 0.201±0.015），其中以 KD3 為相對最有效的 siRNA 序列。 結論成功構建了針對 VEGFA mRNA 的 siRNA 載體，并可以顯著抑制內皮細胞 VEGFA mRNA 的表達。